聚乙二醇定点修饰集成干扰素突变体Ⅱ

目的：用聚乙二醇（PEG）修饰集成干扰素突变体Ⅱ（IFN-Con-m2，IIFNm2），通过纯化获得新型修饰分子并对该分子进行抗胰蛋白酶水解稳定性及初步药代动力学研究。 方法：将mPEG20000定点偶联到IIFNm2的第86位Cys残基上，修饰后的产物经CM层析后，以SDS-PAGE考察其纯度，用WISH-VSV系统进行生物活性测定；在0.1%胰蛋白酶条件下考察体外抗酶解稳定性；并以SD大鼠进行初步药代动力学研究，绘制血药浓度-时间曲线。采用3P87软件进行数据拟合，分析药物动力学参数。 结果：干扰素修饰率约为50%，且绝大多数以单修饰体（mono-PEG- IIFNm2）形式存在；提纯后mono-PEG-IIFNm2 的纯度大于98%，比活性约为修饰前IIFNm2的1%。抗胰蛋白酶水解试验表明：30min后，IIFNm2抗病毒活性残留为8%，mono-PEG-IIFNm2为41%。初步药代动力学研究显示：IIFNm的消除半衰期为(1.57±0.34)h，mono-PEG-IIFNm2为(18.0±4.0)h。 结论：成功地偶联了PEG和IIFNm2，建立了mono-PEG-IIFNm2的纯化工艺，PEG修饰能增加IIFNm2的体外抗胰蛋白酶水解稳定性，并显著延长体内半衰期。     

滇产粗根荨麻不同提取部位的镇痛抗炎作用研究

为探讨滇产粗根荨麻不同部位的镇痛抗炎活性,并作有效部位筛选,本文采用醋酸扭体法和角叉菜胶致大鼠足肿胀模型筛选有效部位.正丁醇部分(200 mg/kg)对醋酸诱发小鼠扭体有抑制作用与空白及溶媒对照组比较(P＜0.05);水部分(100,200,400 mg/kg)对角叉菜胶致大鼠足肿胀有明显抑制作用,与空白及溶媒对照组比较(P＜0.01);正丁醇部分(400 mg/kg)可减轻角叉菜胶致大鼠足肿胀,与空白及溶媒对照组比较(P＜0.05).滇产粗根荨麻正丁醇部分有一定的镇痛抗炎作用,水部分具较强抗炎作用.     

肌筋膜放松术对慢性颈部疼痛的疗效优于静态牵引术

为了研究肌筋膜放松术对慢性颈部疼痛的疗效,本研究选取了50位慢性颈部疼痛患者,随机分为肌筋膜放松术组(观察组)与持续静态牵引术组(对照组),每组各25人。通过比较干预前后两组患者疼痛、肌肉压痛阈值、颈部关节活动度、颈部障碍状况与恐惧回避信念,发现肌筋膜放松术组自觉疼痛症状严重程度、颈部关节活动度、颈部障碍状况、恐惧回避信念在治疗后皆显著改善(p0.05),肌肉压痛阈值则无显著差异(p0.05);持续静态牵引组在自觉疼痛症状严重程度、颈部障碍状况上有显著改善(p0.05),其它则无显著差异(p0.05);肌筋膜放松术组自觉疼痛症状严重程度、颈部关节活动度、颈部障碍状况的改变量显著大于持续静态牵引术(p0.05),其它则无显著差异(p0.05)。本研究证实肌筋膜放松术可立即改善慢性颈痛患者的自觉疼痛程度、颈部关节活动度、颈部障碍状况与恐惧回避信念,且效果显著优于持续静态牵引术。     

武陵山东段不同样地小型兽类群落结构及多样性分布(英文）

2000—2004年对长江三峡南岸的武陵山东段7个不同样地、3个不同海拔梯度和6种生境类型的啮齿等小兽进行了5年调查。共布放鼠铗29297铗次,获得啮齿等小兽2271只;其他方法获26只,分隶于8科19属24种。其中啮齿目占70.83%,食虫目占29.17%。对所获数据分析结果表明:1)虽物种丰富度具有从南向北随海拔升高而增加的趋势,但在垂直分布上有相当一部分物种呈现较宽的分布;2)无论在7个不同样地,还是在6种生境,1200m以下均以黑线姬鼠(Apodemus agrarius)和褐家鼠(Rattus norvegicus)为优势种;1300m以上则以短尾鼩(Anourosorex squamipes)、社鼠(Niviventer confucianus)和中华姬鼠(Apodemus draco)为优势,但在数量上缺乏规律性;3)冬季密度明显大于春季,沿海拔高度呈梯度增高,但不同样地的密度缺乏一致规律性;4)7个不同样地多样性和均匀度均呈现较大变化。这可能与该地区人为干预较多有关。     

一种提高PCR产物定向克隆效率的新方法

介绍一种在对PCR产物进行定向克隆之前先用T4DNA聚合酶将PCR产物末端进行补齐，然后进行限制性酶切和克隆，能显著提高克隆效率的新方法。     

氨溴索对铜绿假单胞菌生物膜早期黏附及胞外多糖的影响

目的研究氨溴索对铜绿假单胞菌PA01菌株BF早期黏附及胞外多糖复合物（Extracellular Pdymeric Substances，EPS）的影响。方法利用荧光多功能酶标仪检测各组不同时间点96孔板中pGFPuv转化PA01菌株的荧光强度，计算黏附率以表示干预对不同时间点细菌黏附的影响；利用罗丹明标记的麦胚凝集素（WGA）特异性结合细菌EPS，荧光显微镜下定性观察各组EPS的变化；利用硫酸-苯酚法定量各组细菌EPS的产量。结果8h组，氨溴索高浓度干预后细菌的黏附率由0．72±0．17下降至0．49±0．08，t=4．03，P〈0．05，与克拉霉素阳性对照组黏附率（0．50±0．06）相比，t=-1．19，P〉0．05；氨溴索低浓度干预后黏附率也有下降，但不及高浓度组明显；其余时间组趋势与8h组大致相似。罗丹明标记WGA可使胞外多糖显色，在荧光显微镜下观察可见氨溴索干预后EPS减少，稀薄；EPS定量实验，EPS总量（μg）／细菌干重（g）氨溴索干预组（477．82±7．90）较生理盐水对照组（523．76±10．12）有明显降低，t=8．76，P〈0．05。结论氨溴索可显著减少PA01菌株黏附及产EPS的能力。     

氨溴索对粘液型铜绿假单胞茵生物膜藻酸盐作用的体外研究

目的探讨氨溴索对铜绿假单胞菌临床分离株形成的生物膜（biofilm，BF）主要成分藻酸盐的干预作用，研究其对藻酸盐合成过程中起重要作用的基因表达和合成过程中限速酶活性的影响，以及其对藻酸盐降解的影响。方法建立铜绿似单胞菌临床分离株BF体外模型，培养7d后得到成熟BF。将BF内的细菌振荡下来后，用疏酸-苯酚法检测氨溴索对藻酸盐含量的影响；RT-PCR检测藻酸盐合成过程中重要基因algD、algU、algR和mucA的mRNA表达；分光光度计检测合成过程中限速酶——GDP-甘露糖脱氢酶（guanosine diphospho-D-mannose dehydrogenase，GMD）的活性，并检测藻酸盐的降解情况。结果在氨溴索3．75mg／ml作用下，藻酸盐含量（mg／g）由86．4024±0．8588下降到59．9199±0．5803（F=66．2，P〈0．01）；其合成重要基因algD、algU、algR和mucA的mRNA的表达分别由1．2994±0．0173、1．0488±0．0457、0．9888±0．0267和0．8731±0．0336变化为1．0253±0．0265、0．9594±0．0106、0．8536±0．0179和1．0770±0．0503（F=91．9，41．1，88．4和56，9，P均〈0．05）；其合成限速酶GMD活性由0．0989±0．0055下降到0．0558±0．0016（F=121．2，P〈0．01）；藻酸盐的降解量（△mg／g）由1．4122±0．0073变化为1．4175±0．0019（F=21．81，P〉0．05）。1．875mg／ml氨溴索作用下，有同样的趋势但效应不如高浓度明显。结论氨溴索可以降低铜绿假单胞菌BF藻酸盐的含量，影响藻酸盐合成过程中重要基因algD、algU、algR和mucA的mRNA的表达，降低藻酸盐合成限速酶GMD活性，但对藻酸盐的降解无影响。     

氨溴索对粘液型铜绿假单胞菌生物膜藻酸盐作用的体外研究

目的探讨氨溴索对铜绿假单胞菌临床分离株形成的生物膜（biofilm，BF）主要成分藻酸盐的干预作用，研究其对藻酸盐合成过程中起重要作用的基因表达和合成过程中限速酶活性的影响，以及其对藻酸盐降解的影响。方法建立铜绿似单胞菌临床分离株BF体外模型，培养7d后得到成熟BF。将BF内的细菌振荡下来后，用疏酸-苯酚法检测氨溴索对藻酸盐含量的影响；RT-PCR检测藻酸盐合成过程中重要基因algD、algU、algR和mucA的mRNA表达；分光光度计检测合成过程中限速酶——GDP-甘露糖脱氢酶（guanosine diphospho-D-mannose dehydrogenase，GMD）的活性，并检测藻酸盐的降解情况。结果在氨溴索3．75mg／ml作用下，藻酸盐含量（mg／g）由86．4024±0．8588下降到59．9199±0．5803（F=66．2，P〈0．01）；其合成重要基因algD、algU、algR和mucA的mRNA的表达分别由1．2994±0．0173、1．0488±0．0457、0．9888±0．0267和0．8731±0．0336变化为1．0253±0．0265、0．9594±0．0106、0．8536±0．0179和1．0770±0．0503（F=91．9，41．1，88．4和56，9，P均〈0．05）；其合成限速酶GMD活性由0．0989±0．0055下降到0．0558±0．0016（F=121．2，P〈0．01）；藻酸盐的降解量（△mg／g）由1．4122±0．0073变化为1．4175±0．0019（F=21．81，P〉0．05）。1．875mg／ml氨溴索作用下，有同样的趋势但效应不如高浓度明显。结论氨溴索可以降低铜绿假单胞菌BF藻酸盐的含量，影响藻酸盐合成过程中重要基因algD、algU、algR和mucA的mRNA的表达，降低藻酸盐合成限速酶GMD活性，但对藻酸盐的降解无影响。     

金双歧辅助治疗小儿扁桃体炎的随访观察

目的探讨通过随访观察金双歧辅助治疗小儿扁桃体炎患儿的远期效果。方法选取2013年1月至2014年7月在本院儿科住院诊断为扁桃体炎患儿300例,采用随机数字表法,按入院先后顺序分为对照组和观察组,对照组常规给予抗生素(包括抗病毒药)和(或)对症治疗;观察组在对照组治疗的基础上,给予金双歧口服辅助治疗,出院后继续服用金双歧4周;两组患儿分别在出院后1个月、2个月、3个月均进行电话随访,3个月后均通过家庭访视进行观察,比较两组患儿出院后发生呼吸道感染和肠道感染的差异。结果观察组患儿在出院后3个月内呼吸道感染和肠道感染的发生率低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论出院扁桃体炎患儿继续服用金双歧,可提高患儿机体免疫力,降低呼吸道和肠道感染的发生率;随访为观察患儿出院后健康状态,进行健康指导以及收集资料的重要手段。     

药用旱生植物刺山柑的植物学特性研究进展

刺山柑是一种冬季落叶的、抗旱能力比较强的药用植物。虽然刺山柑的群落结果比较简单。但它是一种比较优良的防风固沙植物。国内外对刺山柑的种子萌发和组织培养等方面进行了大量研究,目前已经成功实现了刺山柑的快速繁殖。植物解剖学的结果表明:刺山柑根茎和叶片都表现出了旱生植物的典型特征。本文对刺山柑的生物学特性、种子萌发和组织培养以及适应干旱环境的机制进行了综述。