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BMP6是一种调节成骨细胞和成软骨细胞分化的骨诱导因子, 在修复各种骨缺损方面具有很好的应用潜力。有诱骨活性的BMP6是多二硫键的二聚体蛋白, 疏水性极强容易聚集沉淀。为了在大肠杆菌中可溶表达具有生物活性的重组人BMP6(rhBMP6), 构建了具有TRX、GST、MBP、CBD融合标签和His6标签的 rhBMP6成熟肽原核表达载体, 调节诱导温度和IPTG浓度, 比较不同融合标签和诱导条件对目的蛋白表达量和溶解性的影响。结果表明, MBP最能有效的增强rhBMP6的溶解性, 诱导条件对溶解性影响较小。大肠杆菌BL21 trxB(DE3)这种硫氧还蛋白还原酶缺陷菌株为rhBMP6二硫键在胞质中形成提供了合适的氧化还原环境。MBP和BL21 trxB(DE3)相结合在细胞质中高效可溶表达出了BMP6融合蛋白二聚体。表达产物经亲和层析和凝胶排阻层析纯化后, 能诱导成肌细胞系C2C12向成骨细胞方向 转化。  相似文献   
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重组人BMP6在大肠杆菌中可溶表达、纯化及活性分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
BMP6是一种调节成骨细胞和成软骨细胞分化的骨诱导因子,在修复各种骨缺损方面具有很好的应用潜力.有诱骨活性的BMP6是多二硫键的二聚体蛋白,疏水性极强容易聚集沉淀.为了在大肠杆菌中可溶表达具有生物活性的重组人BMP6(rhBMP6),构建了具有TRX、GST、MBP、CBD融合标签和His6标签的rhBMP6成熟肽原核表达载体,调节诱导温度和IPTG浓度,比较不同融合标签和诱导条件对目的蛋白表达量和溶解性的影响.结果表明,MBP最能有效的增强rhBMP6的溶解性,诱导条件对溶解性影响较小.大肠杆菌BL21 trxB(DE3)这种硫氧还蛋白还原酶缺陷菌株为rhBMP6二硫键在胞质中形成提供了合适的氧化还原环境.MBP和BL21 trxB(DE3)相结合在细胞质中高效可溶表达出了BMP6融合蛋白二聚体.表达产物经亲和层析和凝胶排阻层析纯化后,能诱导成肌细胞系C2C12向成骨细胞方向转化.  相似文献   
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生物化学是生物学和医学学科非常重要的基础课程,是进入21世纪以来发展最为迅速和最具活力的学科之一。生物化学理论教学极具抽象性,所以其实验教学是理解相关理论与掌握实际技能的重要环节。在生物化学实验教学过程中,及时掌握新的教学理念,新的教学方法,新的教学热点,紧跟教学发展趋势一直是教师们关注的重点问题。本文以中国学术期刊网络出版总库(CNKI)作为数据来源,利用CiteSpace对2011.1.1~2020.12.31期间我国生物化学实验教学研究的年发文量、期刊分布、研究现状,研究热点及发展趋势等进行了可视化分析。结果发现,各年的发文量基本保持稳定。其中,高频词为“生物化学”,“实验教学”,“教学改革”,“生物化学实验”,“改革”,“教学方法”,“创新能力”和“教学模式”等。突变词强度较高的有“翻转课堂”和“微课”。通过Timeline分析,本文发现,“教”与“学”身份正在发生互换,提高学生们的自主学习能力成为主流,“网络教学”和“虚拟仿真”等与先进技术相结合的教学模式,已成为生物化学实验教学的发展趋势与前沿内容。本文旨在通过以上分析为我国生物化学实验教学的可持续发展提供参考。  相似文献   
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