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1.
肝细胞培养方法研究进展   总被引:13,自引:0,他引:13  
离体肝细胞的培养可以简化分析肝细胞功能,为肝脏的生理、病理以及药理的研究提供材料。特别是近年来的长期肝细胞培养技术使离体肝细胞较 成功地再现了肝脏的功能、形态以及对刺激的反应能力,为进一步的研究提供了条件。离体肝细胞的培养涉及到肝细胞的分离、纯化和培养液的成分等多方面。本文就国内外肝细胞分离、培养的各种方法的创立、发展、成熟及其应用作一综述。  相似文献
2.
行为训练与小鼠海马突触蛋白磷酸化水平的相关性   总被引:7,自引:0,他引:7  
高静  王新光 《生理学报》1992,44(1):86-91
本文对梭箱回避行为训练是否能改变小鼠海马突触蛋白磷酸化水平进行了检定。在小鼠训练结束的不同时程制备突触体,以γ-~(32)P-ATP作为标记进行离体测定。结果如下:(1)正常小鼠各脑区突触蛋白磷酸化水平无显著差异;(2)学习训练刚结束时,海马突触蛋白磷酸化水平与学习训练成绩的优劣有相关性;(3)学习训练结束后24h,上述相关性更为明显,且成绩良好组右侧海马突触蛋白磷酸化水平显著高于左侧,而成绩低劣组相反。海马突触蛋白磷酸化的这种不对称现象的成因尚不清楚。这些结果表明,海马突触蛋白磷酸化反应可能是习得行为的分子机制。  相似文献
3.
对我国北方长期施肥下三类典型农田土壤(塿土、潮土和褐潮土)的小麦产量、小麦磷肥农学利用效率、小麦磷肥利用率进行了研究.结果表明:长期施用磷肥处理(氮磷化肥配合施用、氮磷钾化肥配合施用、氮磷钾化肥和秸秆配合施用、氮磷钾化肥和有机肥配合施用)的小麦产量为2914~6219 kg·hm-2,较不施磷肥处理(不施肥对照、单施化肥氮、氮钾化肥配合施用)提高了2~4倍,各施磷肥处理之间无显著差异.试验起始年施用氮磷钾化肥处理的塿土、潮土和褐潮土上的小麦磷肥农学利用效率分别为17.0、20.3和13.3 kg·kg-1,小麦磷肥利用率分别为15.3%、31.2%和23.8%;施肥15年后,小麦磷肥农学利用效率每年分别增加3.9、2.5和2.8 kg·kg-1,小麦磷肥利用率每年分别增加1.3%、0.9%和1.0%.同一类型土壤不同施磷处理间的磷肥农学利用效率和利用率差异不显著.在我国北方地区,长期施用磷肥可以显著提高小麦产量和磷肥利用效率;氮磷钾化肥和有机肥配施处理下,塿土平均每年增长的小麦磷肥农学利用效率和磷肥利用率较潮土和褐潮土高.  相似文献
4.
一种简单、快速提取DNA的方法   总被引:5,自引:0,他引:5  
随着分子生物学研究的迅速发展,提取DNA已成为一项常规实验。用经典方法提取DNA[1],先用蛋白酶K、SDS消化,然后用酚、氯仿抽提,乙醇沉淀,耗时较多,提取液需要多次转移,易引起交叉污染和DNA丢失。本文利用硅藻(diatom)能够特异性吸附核酸的...  相似文献
5.
PEG 介导的苹果腐烂病菌原生质体转化   总被引:4,自引:1,他引:3       下载免费PDF全文
摘要: 【目的】建立PEG 介导的苹果腐烂病菌原生质体遗传转化体系。【方法】本文利用带有hph 基因的质粒,以苹果腐烂病菌(Valsa mali var.mali) 03-8 为受体菌株,通过PEG 融合法对其原生体进行转化。【结果】于YEPD 内培养48 h 的菌丝,在酶解液浓度为50 mg /mL Driselase + 10 mg /mL Lysing Enzymes 情况下,按10 mL酶液/0. 5 g湿菌体比例,酶解2 h时可以释放出4 × 107 个/mL 原生质体,其转化效率为44 个/μg DNA。对转化子的PCR 检测和Southern 杂交分析表明,hph 基因已经整合进苹果树腐烂病菌的基因组中。转化子在PDA 培养基中继代5 次后,87. 5% 的转化子仍能正常生长,表明外源基因hph 能在苹果树腐烂病菌中稳定遗传。【结论】该转化体系的建立为苹果树腐烂病菌致病相关基因的深入研究奠定了基础。  相似文献
6.
固定化脂肪酶催化毛棉籽油制备生物柴油   总被引:4,自引:1,他引:3       下载免费PDF全文
研究了固定化脂肪酶Lipozyme TL IM和Novozym435催化毛棉籽油和乙酸甲酯制备生物柴油的过程。通过向反应体系中添加甲醇,可减少乙酸的抑制,明显提高生物柴油得率,确定最佳反应条件为:正己烷作溶剂,乙酸甲酯与油摩尔比9:1,添加油重3%的甲醇、油重10%的LipozymeTLIM和5%的Novozym435复合使用,温度55°C,反应8h,生物柴油得率达到91.83%。最后探索了酶催化毛棉籽油合成生物柴油的动力学,得到动力学方程。  相似文献
7.
实验确定了Lacobacillus delbrueckii subsp.lactis BME5-18M接种的最佳种龄为24h。以氨水取代传统的中和剂碳酸钙中和发酵生成的乳酸、调控发酵液的pH,考察了不同pH值对菌体生长和产酸的影响,确定了菌种生长和产酸的较适pH值为6.5。考察了底物流加速度对菌种生长和产酸的影响,对间歇和流加发酵时菌体的生长量和产酸量进行了动力学关联。在较适pH值6.5和较佳流加速度25mL/h条件下,乳酸的产量可达到136.8g/L,产率为1.71g/(L.h)。  相似文献
8.
H2O2诱导的线粒体损伤神经元内硫氧还蛋白mRNA水平的变化   总被引:3,自引:0,他引:3  
线粒体缺陷和氧化应激参与了神经退行性疾病的发病机制。叠氮钠(NaN3)是线粒体细胞色素C氧化酶(COX)的特异性抑制剂,能诱导线粒体缺陷。本实验通过细胞活性检测(MTT法),形态学观察,分析H2O2对原代培养的正常神经元及NaN3诱导的线粒体缺陷神经元的损伤作用的差异。并通过RT-PCR半定量法检测H2O2损伤后两类神经元内硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)mRNA水平的变化,以阐明细胞内这一重要氧化还原调节蛋白在神经元损伤时的作用机制。实验表明,在正常神经元内,H2O2的损伤对Trx表达量的改变似乎不明显;而线粒体缺陷神经元内Trx的表达量下降,且对于H2O2的损伤具有浓度、时间依赖性。提示:在线粒体功能缺陷神经元中,Trx似乎发挥更重要的作用。  相似文献
9.
3-Glu示踪实验表明,谷氨酸可以透过胎盘屏障进入胎鼠体内,较均一地分布于中枢神经系统及内脏各器官。给母鼠隔日注射高、低剂量的谷氨酸单钠(MSG,2.5ms/g,1.0mg/g)至分娩,对成年后的仔鼠进行检测发现,高剂量组仔鼠记忆能力及Y-迷宫空间分辨学习能力均严重受损,下丘脑弓状核及腹内侧核神经元被明显破坏,出现胞质肿胀、核固缩、神经元数目减少。孕期MSG处理还可以使仔鼠下丘脑和海马3H-Glu受体-配体结合量显著变化。采用AR-CM-MIC阳离子检测系统观察单个神经元内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化时还发现,MSG可以通过诱发胞外Ca2+内流及胞内钙库释放Ca2+来增高[Ca2+]i。以上结果提示:MSG对仔鼠的剂量依赖性神经毒性作用可能与其过度激活膜谷氨酸受体,引起细胞内Ca2+超载,最终导致特定脑区的神经元发生溃变甚至死亡有关,而这些变化可能正是仔鼠成年后学习记忆受损的原因。  相似文献
10.
双底物抑制下脂肪酶催化合成乳酸乙酯的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
从微观体系考察了在双底物抑制下脂肪酶催化合成乳酸乙酯,叔丁醇是最佳溶剂,它可以很好地破坏乳酸分子由缔合而形成的分子簇。在所选的脂肪酶中,Novozym 435(南极假丝酵母脂肪酶B)的催化活性最好。综合产率和酶活两方面因素确定了最佳实验条件:酸醇摩尔比=1∶8、反应温度60℃、酸浓度0.3 mol/L、酶浓度45 g/mol、摇床转速200 r/min。  相似文献
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