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1.
乳糖作为诱导剂对重组目的蛋白表达的影响   总被引:31,自引:0,他引:31       下载免费PDF全文
将重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素3(GM-CSF/IL-3)融合蛋白表达菌BL21(DE3)(pFu)作为研究对象,对于以乳糖作为诱导剂时重组目的产物的诱导表达规律进行了深入的研究。分析比较了不同培养基中,不同生长阶段进行诱导对于产物表达的影响。对诱导所需的乳糖浓度、诱导持续时间长短等因素亦进行了研究。实验结果表明,在对诱导条件进行优化控制的前提下,利用乳糖作为诱导剂可以达到与IPTG类似的诱导效果。随后的研究中,将乳糖作为诱导剂应用于高密度发酵过程。这些研究结果为乳糖作为诱导剂最终应用于重组基因工程药物的工业化生产提供了有益的参考和借鉴。  相似文献
2.
植物基因工程的新载体—农杆菌Ri质粒   总被引:13,自引:0,他引:13  
3.
融合蛋白基因工程应用及研究   总被引:8,自引:0,他引:8  
通过重组DNA技术将不同的基因或基因片段融合在一起,经表达后可以得到由不同的功能蛋白拼合在一起而形成的新型多结构域的人工蛋白,这是一种极具潜在应用价值与理论意义的方法。目前这种方法已被广泛应用于诜我领域的研究中,并已显示出较高的价值,本文尝试对融合蛋白研究的几个领域的发展情况进行综述。  相似文献
4.
通过探讨一种新的钙依赖性磷脂结合蛋白Annexin32对家兔凝血时间和兔、大鼠血栓形成的影响, 对其主要药效学进行了研究, 并与普通肝素进行了比较. 兔、大鼠静脉给药, 检测用药后不同时间家兔白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)、体外血栓形成和大鼠体内血栓形成的变化. 结果显示, 按1 mg/kg静脉注射Annexin32后, KPTT明显延长(P < 0.01), 但小于肝素延长幅度, 体外血栓形成仪测定显示血栓长度、重量均明显减少(P < 0.01), 大鼠体内血栓重量明显降低(P < 0.01), 提示Annexin32具有抗血栓形成的功能, 并有对凝血系统影响小的特征.  相似文献
5.
6.
超声和高压对牛血清白蛋白结构的影响比较   总被引:6,自引:0,他引:6       下载免费PDF全文
目的:研究牛血清白蛋白经过超声和高压处理前后的结构变化,以及自由基清除剂对其结构变化的影响。为进一步研究细胞破碎和乳化蛋白时超声和高压处理对蛋白的影响提供参考。方法:将BSA溶液经过超声和高压处理,然后利用高效液相色谱(HPLC)、动态光散射(DLS)、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(nondenaturing SDS PAGE)以及园二色谱(CD)等手段检测处理前后的结构变化。结果:发现超声使BSA严重聚集,加入自由基清除剂可以减少聚集的产生。而高压处理后的BSA未出现聚集,但二级结构发生了变化。结论:超声和高压这两种处理方法对蛋白损伤机理不同,所以选择合适的破碎方法要根据蛋白自身的性质而定。  相似文献
7.
The pharmacodynamics of Annexin32, a new Ca2+-dependent phospholipid-binding protein, was studied by measuring coagulation time in rabbits and venous thrombosis in rabbits and rats. Rabbits and rats were given Annexin32 by intravenous administration. Then Kaolin partial thromboplastin time (KPTT), thrombosis in vitro and in vivo were assayed. The results showed that KPTT of rabbits was prolonged (p < 0.01), and the length and weight of thrombus in vitro were reduced (p < 0.01) after administration of Annexin32 at 1 mg/kg. It also inhibited thrombosis in vivo and reduced the weight of venous thrombus significantly in rats (p < 0.01). All these results suggested that Annexin32 possesses the characteristic of antithrombotic effect and fewer side effects on coagulation time.  相似文献
8.
重组GM—CSF/IL—3融合蛋白的纯化   总被引:4,自引:0,他引:4  
重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素3(GM-CSF/IL-3)融合蛋白是一种很有发展潜力与应用前景的重组药物,它在大肠杆菌中是以饱含体形式表达的,针对这一重组蛋白饱含体的洗涤、变性、复性以及最终的纯化过程,进行了深入地研究,重点分析和比较了不同条件及因素对于重组蛋白包含体变性及复性过程听影响。实验结果表明,8mol/L尿素及10mmol/L的DTT可以使包含体充分溶解。在复性过程中,采用  相似文献
9.
从芽鞘有紫线和无紫线的杂交组合中发现6个组合的F。代紫线有无比例为13:3,以无紫线且为不育系的亲本XNA为母本对组合XNA/21A150进行回交,BF,代的分离比例符合1:1。遗传分析表明:水稻芽鞘紫线表达受抑制基因,和反抑制基因A『(f)的影响,,抑制芽鞘紫线C_A_P_系统中的P基因,Ai(t)抑制,基因。以BF1构建了Ai(t)基因的定位群体,SSR分析表明:Ai(t)基因与RM335、RM295、RM287、RM21连锁,其遗传距离分别为2.8cM、10.2cM、13.9cM、26.1cM。  相似文献
10.
壬基酚对鲫鱼原代肝细胞增殖和抗氧化功能的影响   总被引:3,自引:0,他引:3       下载免费PDF全文
研究了不同浓度壬基酚对鲫鱼肝细胞增殖和抗氧化系统的影响.结果表明:各试验浓度壬基酚均能抑制鲫鱼肝细胞的增殖,其中高浓度的壬基酚(10-3 mol·L-1)对细胞增殖的抑制作用极其显著,肝细胞形态发生明显改变;壬基酚破坏了鲫鱼肝细胞抗氧化系统的平衡,经壬基酚处理后的肝细胞超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性均受到抑制,而羟自由基的含量升高;壬基酚对原代鲫鱼肝细胞造成氧化损伤,引起培养液中丙二醛(MDA)含量升高.壬基酚诱导的氧化胁迫对原代鲫鱼肝细胞产生了一系列的体外毒性效应.  相似文献
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