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1.
动物乳腺生物反应器的研究进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
利用转基因动物反应器生产药用蛋白是生物技术领域的一次革命,而通过动物乳腺是最好的渠道,药物蛋白可通过转基因动物的乳腺随乳汁分泌出来,产量高、易纯化,因此乳腺类似于一个制药工厂。国外已有多种蛋白通过乳朱反应器来制备,有些已进入临床研究阶段。本文主要介绍乳腺生物反应器的研究进展情况。  相似文献
2.
重组人干扰素β ser17工程菌发酵培养条件的优化研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
实验对重组人干扰素βser17(rhIFNβser17)工程菌的发酵培养条件进行了研究,通过实验优化确定了适宜rhIFNβser17表达的培养基、诱导剂使用浓度、诱导时期和诱导后的收获时间等,建立了发酵培养工艺,并在50L发酵罐进行了中试发酵,菌体收获量湿重达13.08g/L,rhIFNβser17表达量占菌体总蛋白的20.2%,纯化后比活性达2×107IU/mg蛋白以上,为进一步的下游开发奠定了基础。  相似文献
3.
重组人干扰素—β在大肠杆菌中的表达与活性分析   总被引:3,自引:1,他引:2  
利用定点突变技术将人干扰素-β第17位半胱氨酸编码序列突变为丝氨酸(IFN-βser17),DNA序列分析证明了其核苷酸序列的正确性,并在大肠杆菌TAP106中获得高效表达,IFN-βser17表达量达20%,用Westemblot得到单一条带,细胞病变抑制法测定其比活性达(2~3)×107U/mg.INF-βser17的比活性和稳定性均超过天然人IFN-β.  相似文献
4.
重组人肿瘤坏死因子α(hTNFα)衍生物发酵条件的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
本文对一种新型重组人肿瘤坏死因子衍生物(命名为hTNFD)的发酵条件进行了初步研究。通过实验优化选择了适宜该衍生物表达的培养基、IPTG使用浓度、诱导时期以及诱导时间的长短等,并在50L发酵罐进行了中试规模的放大培养,菌体的收获量湿重可达1643g/L,hTNFD表达量占总蛋白的60%,纯化的衍生物比活为101×1010U/mg,比原型hTNFα提高了465倍,具有潜在的临床应用价值。  相似文献
5.
重组人睫状神经营养因子衍生物的构建、表达和活性分析   总被引:2,自引:0,他引:2  
采用PCR定点突变技术对睫状神经营养因子(CNTF)基因进行改造,获得了CNTF衍生物(CNTF-D)基因序列分析证明其核苷酸序列符合设计要求,并在大肠杆菌中获得高效表达,CNTF-D表达量超过40%,复性后,经Q-Sepharose HP纯化,其纯度超过95%,体内法测定发现能明显降低实验小鼠的体重。表明CNTF-D在体内具有良好的生物学活性,为下游开发奠定了基础。  相似文献
6.
生长速度对β干扰素工程菌稳定性和产物表达的影响研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
为了研究发酵培养阶段生长速度对重组人干扰素β(hIFN-β)工程菌稳定性、菌体密度和干扰素表达的影响,采用日本LE.Marubishi MSJ-50L发酵罐,在发酵过程中于诱导后通过控制不同的补料速度,检测低和高生长速度及发酵结束后菌体密度、稳定性和重组人干扰素β的表达量。诱导后维持低生长速度,发酵结束后平均密度A600值为7.52,表达量达20.7%,质粒稳定率好,达到91%,粗制干扰素收获2.37克;维持高生长速度,发酵结束后平均密度A600值达20.57,而表达量降为4.13%,质粒稳定率降为27%,粗制干扰素收获仅为0.59克。诱导后生长速度对工程菌稳定性和产物表达有明显影响。  相似文献
7.
重组人干扰素—β的中试研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
从大肠杆菌中大规模纯化新型干扰素β(IFN-βser17).首先建立IFN-βser17发酵和纯化工艺,连续大量纯化三批,并对纯化终产品进行全面鉴定.建立了稳定的发酵和纯化工艺流程,中试三批菌产量平均为4.33g/L,IFNβser17的表达量平均为20%,经破碎、粗提、精制后IFN-βser17的比活达2×107IU/mg以上,纯度超过96%,其他检定项目也均符合规程要求.  相似文献
8.
以全长人TPOcDNA为模板,采用PCR方法扩增出TPO功能区段基因,克隆入PUC18中,经筛选鉴定后,插入原核表达载体中进行表达,结果rhTPO功能区片段在原核细胞中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的415%,表达产物经初步纯化后测活,具有明显促进体外培养巨核细胞集落形成的作用。  相似文献
9.
重组人干扰素βser17(rhIFN βser17)工程菌经发酵培养后,采用高压匀浆破菌、离心分离包涵体、有机抽提、酸沉淀、SephacrylS -200、SephadexG -75等进行分离纯化,通过各种方法对终产品进行鉴定。结果显示,纯化的rhIFN- βser17比活性超过 2×107IU/mg,纯度超过 99%,其它各项质量指标均符合质量标准。通过研究建立了大规模制备rhIFN- βser17的纯化工艺,研制出了符合规程要求的注射用rhIFN -βser17纯品,为临床研究奠定了基础。  相似文献
10.
选用南京市SPOT 5 HRG图像的地物反射率(PAC)、表观反射率(TOA)和灰度值(DN)影像,提取了4种植被指数(VI),即归一化植被指数(NDVI)、转换植被指数(TVI)、土壤调节植被指数(SAVI)和修正的土壤调节植被指数(MSAVI),与地面实测的植被覆盖度进行了回归分析,并建立了36个VI-VFC关系模型.结果表明:在所有模型中,基于PAC级影像提取的NDVI和TVI的3次多项式模型最优;其次为基于DN级影像提取的SAVI和MSAVI的3次多项式模型,在VFC>0.8时其精度略高于前两种模型.这4个模型在植被中等密集区域(VFC=0.4~0.8)的精度高于植被稀疏区域(VFC=0~0.4).所建模型可通过中间模型的联结,进行推广使用.在基于VI-VFC关系建模过程中,基于遥感影像不同辐射校正水平提取植被指数,有利于充分挖掘遥感影像信息,进而提高VFC估算的精度.  相似文献
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