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1.
一种简单有效的植物RNA提取方法   总被引:21,自引:0,他引:21       下载免费PDF全文
张容  郑彦峰  吴瑶  王胜华  陈放 《遗传》2006,28(5):583-586
在提取缓冲液中加入皂土有效地去除了蛋白质并抑制RNAse,建立了一种高效的植物RNA提取方法。以麻疯树幼叶为材料,分别用TRIZOL,异硫氰酸胍法,SDS-KAc法和新创皂土法提取总RNA进行比较和验证,琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析结果表明,只有皂土法能提出质量高,完整性好的RNA。进一步以皂土法提取的18S rRNA为模板的RT-PCR结果分析表明, 用该法提取的RNA 能用于分子克隆与基因表达分析等后继分子生物学实验。该方法简便,快速,不失为一种经济高效的RNA提取方法。  相似文献
2.
本文对我院在1992年6月至1993年5月8520例出院病人中,参照卫生部医政司院内感染监控协调小组确定的标准分类的422例院内感染进行调查和微生态分析。院内感染总发生率为4.95%,依次以肾移植血液透析中心、血液病科、监护中心较高,分别为50.88%、26.29%、24.07%,按年龄分组以大于50岁组院内感染率最高,为44.39%。院内感染部位以下呼吸道感染最高(39.63%),其次为手术伤口感染(29.07%),泌尿道感染(11.58%)。院内感染病医学检查以“G ̄-”杆菌为主(51.5%),真菌感染为33.53%。药敏试验对抗茵素都有不同程度耐药。提示要高度重视院内感染监测,严格控制抗生素应用,重视对手术室、病区环境净化和对病人的保护性措施,以预防和治疗院内感染。  相似文献
3.
本文统计了我院1992年8月—1994年7月两车间医院内感染病原菌的分离结果,分离出病原菌25种758株,其中革兰氏阳性菌163株(占21.51%),革兰氏阴性菌378株(占49.87%),真菌217株(占28.62%)。院感病原菌依次为,白色念珠菌、绿脓假单胞菌表、葡菌、肺炎克雷伯氏菌、酵母菌及大肠艾希氏菌等,显示了真菌及表葡菌在院内感染中已经上升到不可忽略的地位。用18种常用抗生素,对除真菌外的上述病原菌541株做耐药谱测定,并发现除了表葡菌及多数革兰氏阴性菌对喹谱酮类及少数头孢三代抗生素尚属敏感外,大部分均具有越来越广泛的耐药性。  相似文献
4.
目的 了解假单胞菌医院感染状况及对抗菌药物的敏感率。方法 调查1994年7月~1998年6月4年间发生的假单胞菌医院感染332例,分析原发病、诱发因素、临床特点、血白细胞、疾原菌分布及K-B法药敏情况。结果 血液系统疾病、慢性阻塞性肺气肿和外伤患者易引起假单胞菌医院感染,常见感染部位为呼吸道、泌尿道。结论 机体免疫功能受损者易患假单胞菌医院感染,病原菌对环丙沙星、阿米卡星、头胞他啶、多粘菌素B的敏感性较好。  相似文献
5.
构建嗜麦芽寡养单胞菌D2株荧光素样单加氧酶基因表达克隆载体,并进行融合表达。PCR扩增出嗜麦芽寡养单胞菌D2菌株基因组DNA中包含单加氧酶基因约1300bp的核酸片段,将其克隆到T载体pMD-18中进行序列测定,所得序列申请并获得GenBank登记号(GQ122330)。DNA star软件分析发现该基因片段中含有一个996bp的完整开放读码框架(ORF),与GenBank中收录的S.maltophilia R551-3(CP001111/GenomeProject17107)和K279a(AM743169)的MO基因核酸序列同源性分别为90%和89%,氨基酸序列同源性分别为93%和90%。根据该ORF序列设计分别含有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的表达克隆扩增引物,PCR扩增、双酶切后将产物亚克隆到pET32a载体中,经过双酶切验证,证实成功获得了表达重组载体pET32a/MO;将其转化宿主菌E.coli BL21,IPTG诱导后成功表达出54.2ku的MO融合蛋白,为该酶进一步的功能研究和开发奠定了基础。  相似文献
6.
本文调查98例尸体肾移植病例,发现医院内感染术前汉有25例(占25.51%),而术后院内感染则上升到66例,感染率高速67.35%,同时时原发病、住院天数、术前血透腹透情况、感染部位、术后留置导尿管情况以及感染的危险因素进行了分析,发现术前及术后均以呼吸道、泌尿道感染为主,术后泌尿道感染明显增加,与插留置导尿管有关。分离出206株病原菌,以绿脓杆菌、大肠艾希氏菌、肺炎克雷伯氏菌及白色念珠菌为主。并以20种抗菌药物对10类病原菌进行了药物敏感度测定,给抗菌药物的选择应用提供一定的参考。  相似文献
7.
目的:为了探求针灸治疗梅尼埃病的选穴规律,规范针刺治疗梅尼埃病的针灸处方。方法:对针灸临床文献选穴进行整理,使用统计学软件SPSS19.0进行聚类分析。结果:针灸治疗梅尼埃病常用的穴位可以汇聚为三大类。结论:百会穴是治疗梅尼埃病的主穴,风池穴、内关穴、足三里可以加强主穴的疗效。丰隆、太冲、翳风可针对耳性症状。  相似文献
8.
酿酒酵母在发酵生产乙醇的过程中存在的主要问题是前期高浓度底物葡萄糖的抑制和后期高浓度产物乙醇的抑制。功能基因组学技术的发展为从基因组水平上系统研究酿酒酵母乙醇生物合成的调控机理提供可能。本研究模拟工业发酵的条件,对酿酒酵母实验菌株BY4743为遗传背景的116个单基因缺失菌株进行了乙醇发酵试验,以发现基因和乙醇发酵的关系。结果表明乙醇对菌体得率系数高于平均值30%以上的基因缺失株有20株,其中高于50%以上基因缺失株有5株;低于平均值30%以上的基因缺失株有11株,其中低于45%以上的有5株。本研究为从整个酿酒酵母基因组水平上系统研究乙醇生物合成的调控机理建立了研究方法,提供了可行性验证。  相似文献
9.
提高酿酒酵母细胞耐受环境胁迫(高渗透压、高浓度酒精和高温)的能力对酒精工业生产具有重要的意义。对提高酿酒酵母耐受性的研究方法和策略的发展历程进行了综述。基因组学、转录组学和蛋白质组学等现代组学技术在这一领域的研究获得了广泛的应用。这些技术将提供期待的信息,去理性改造并获得更加耐受胁迫的工业酵母菌株。  相似文献
10.
L-苏氨酸与L-赖氨酸是L-天冬氨酸家族氨基酸(AFAAs)中的重要成员,近年来由于其在食品、化妆品、动物饲料添加剂等方面的广泛应用而备受关注,市场需求逐年上升。运用代谢工程手段构建高产菌,可有效地提高L-苏氨酸和L-赖氨酸的生产水平。本文详述了L-苏氨酸与L-赖氨酸的合成途径、调控机制以及两种氨基酸高产菌株的构建策略。  相似文献
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