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酵母基因中断技术是研究酵母基因功能的重要手段,自80年代初诞生以来经历了不断的改进和发展.PCR介导的酵母基因中断技术,大大简化了操作,实现了酵母基因的精确缺失;酵母基因的多重中断技术,可在酵母内实现多个基因的中断;可进行大规模基因中断和功能分析的酵母基因中断技术,适应了在酵母全基因组测序完成的情况下进行功能基因组学研究的要求.酵母基因中断技术对人类基因功能研究也有很大启示作用. 相似文献
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毕赤酵母的密码子用法分析 总被引:135,自引:5,他引:130
通过分析Pichia pastoris的28个蛋白编码基因的同义密码子使用情况并计算该酵母的密码子用法,首次确定出P.pastoris的19个高表达优越密码子。这些结果经与已知的Saccharomyces cerevisiae及Kluyveromyces lactis的密码子用法基本相似,但在氨基酸谷氨酸的密码子选择上截然相反,提示这可能属于P.pastoris所偏爱的密码子用法。 相似文献
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化学合成人纤溶蛋白酶原K5 (pK5 )的编码基因并克隆到毕赤氏酵母表达系统的分泌型载体pPIC9K上 ,将重组质粒经BglⅡ单酶切后电转化PichiapastorisGS115菌株 ,筛选出对G4 18有高抗性和在MM培养基上生长缓慢的转化子。经摇瓶发酵和甲醇诱导后 ,用 15 %SDS PAGE检测发酵上清液 ,表明有重组蛋白pK5的高表达。经CM-Sepherose离子交换柱和Superdex 75分子筛层析两步分离纯化 ,获得了纯度达到 98%的rpK5。用MTT方法检测的结果表明 ,纯化的rpK5可显著地抑制人血管内皮细胞的生长 相似文献
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从酵母基因组测序得到的启示 总被引:1,自引:0,他引:1
从酵母基因组测序得到的启示高向东李育阳(复旦大学遗传学研究所,上海200433)关键词酵母基因组计划孤儿基因基因置换反向遗传学酵母基因组计划从1989年1月开始启动,经历了近七年时间,已于1996年1月测完了酿酒酵母(Saccharomycescer... 相似文献
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基因拷贝数与染色体位置对酵母表达乙肝病毒融合表面抗原SA-28基因的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
应用FLP重组酶介导的染色体定点整合技术,将带有不同拷贝数的乙肝病毒融合表面抗原SA-28基因表达单元的质粒整合在酵母不同的染色体位点,并测定了SA-28基因的表达情况,初步研究了基因拷贝数与染色体位置对酵母表达外源基因的影响。结果表明SA-28基因在HIS3位点整 合时的表达水平随基因拷贝数的增加而提高,遵循基因剂量效应;在某些染色体位点整2合时,插入方向对其表达有不同程度的影响,呈现出明显的染 相似文献
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将乙型肝炎表面抗原基因插入具调控型启动子PH05的乳酸克鲁维酵母表达载体中,构建完成质粒pLSl.转化宿主菌Kluyveromyces lactis CXJ1—7A,ELISA结果表明.其表达水平受无机磷浓度的调控。为了进一步提高表达水平,我们将Pls1中的乙型肝炎表面抗原表达单元插入带完整Pkd1序列的载体Pe1,并将构建成的质粒Pls2转化MW98—8C。在比较了CXJ-7A/Pls1和MW98—8c/Pls2后,我们发现MW98—8c/Pls2的稳定性大大提高.表达量也增加4~8倍。 相似文献