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为建立适合红肉蜜柚发育过程中汁胞蛋白质组学的研究体系,以着色初始时期的红肉蜜柚汁胞为试材,摸索最适合的蛋白质双向电泳体系参数。结果表明,酚提取法比 TCA-丙酮法更适合于红肉蜜柚汁胞总蛋白质的提取,提取得率高,双向电泳图谱清晰。采取18 cm、线性pH 3~10和18 cm、线性pH 4~7相结合的分析策略,可获得更为完整的蛋白质组信息,其第一向等电聚焦最佳参数(总伏小时数)分别为30000 Vhs和43000 Vhs。 相似文献
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针对永泰园艺场果梅立地条件及生长状况,以惯用施肥量(N:P2O5:K2O=1:1.9:1.7,氮磷钾施用量1.83Kg/年/株)为对照,在N.P2O5.K2O比例均为1:0.4:0.6的基础上施用不同肥料组合,研究其对果梅生长.结果的影响。试验初步表明,在N,P2O5,K2O比例为1:0.4:0.6,氮磷钾施用量1.38kg/年/株的基础上添加石灰和硼砂,与对照相比,硬核期后的坐果率提高9.9%,产量增加14.2%,明显促进新梢生长,有机肥的配施到第二年才产生肥效。 相似文献
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铜铁试剂对菜青虫多酚氧化酶的抑制作用 总被引:15,自引:1,他引:14
以菜青虫Pieris rapae (L.)为试材,冰浴匀浆,4℃下6 403 ×g 离心,取上清液,经35%饱和度(NH4)2SO4沉淀,Sephadex G100凝胶过滤柱层析等分离步骤,获得部分纯化的菜青虫多酚氧化酶制剂。研究不同浓度铜离子及铜铁试剂对该酶的影响,结果表明:Cu2+在0~0.100 mmol/L范围内对酶活力表现激活作用;浓度大于0.125 mmol/L时表现抑制作用,其IC50为0.651±0.022 mmol/L;铜铁试剂对该酶抑制作用的IC50为0.100±0.012 mmol/L。抑制动力学研究结果表明:铜铁试剂对该酶表现为可逆抑制效应,为竞争性抑制类型,其抑制常数Ki为0.076±0.013 mmol/L。 相似文献
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棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质 总被引:16,自引:0,他引:16
以棉铃虫Helicoverpa armigera蛹为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、Sephadex G-200分子筛柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰- β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂。纯酶的比活力为2 678.79 U/mg。以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学。结果表明:酶的最适pH为5.63,最适温度为55℃。该酶在pH 4~8区域较稳定,而在pH>8时能迅速失去活力;在50℃以下处理30 min,酶活力仍保持稳定,高于50℃,酶很快失去活力。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.16 mmol/L,最大反应速度Vm为10.73 μmol·L-1·min-1。酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为66.24 kJ/mol。 相似文献
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发现CBZ-Lys·pNP能有效地被菓菠萝蛋白酶(Fruit Bromelain E.C.3.4.22.5)作用,测得Km为4.167×10~(-4)mol/L,k_(cat)为742min~(-1)。以荧光和紫外差示光谱为监测手段,对酶分子构象变化进行研究。酶的荧光强度随胍浓度增大而逐渐下降,4mol/L胍变性时,发射峰自332nm红移到353nm,并在310nm处出现新的发射峰。酶的荧光强度都因SDS存在而下降,SDS浓度大于3.47mmol/L有所回升,并出现红移,同时在315nm处出现新的发射肩;紫外差示光谱显示在236nm有一个较显著的员峰,此峰与β-螺旋结构变化有关,278、286和295nm出现三个负峰,260nm有较小正峰,说明酶分子中Tyr、Trp和Phe的微环境发生了明显的变化。测定酶在不同浓度胍和SDS中的变性和失活速度常数,对酶构象变化及催化活力的关系作了比较研究,酶的失活速度均大于变性速度。 相似文献
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龙眼花芽形成及其调控研究进展(综述) 总被引:6,自引:0,他引:6
龙眼正常的花芽分化和“冲销”的分化过程差异很大。其花芽分化与营养、温度、光照、水分、内源激素的关系密切。应用各种措施进行龙眼花芽形成及产期调控取得了良好的效果,但仍存在诸多问题需要进一步深入研究。 相似文献
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