重组人可溶性B淋巴细胞刺激因子及其突变体的克隆、表达及活性测定

采用RT PCR方法从人外周血白细胞总RNA中钓取人可溶性B淋巴细胞刺激因子 (humansolubleBlym phocytestimulator,hsBLyS)的cDNA片段 ,再运用基因重组手段 ,利用通用型质粒pBV2 2 0构建表达载体pBV2 2 0 /hsBLyS。经测序鉴定后 ,以之为模板使用重叠PCR法扩增得到hsBLyS的两个点突变体hsBY A(Cys14 6→Ala14 6)和hsBY V (Cys14 6→Val14 6)的基因片段 ,构建表达载体 pBV2 2 0 /hsBY A及 pBV2 2 0 /hsBY V。经测序无误后 ,将上述 3种载体分别转化大肠杆菌DH5α并诱导重组蛋白质表达 ,薄层扫描结果显示 3种蛋白质在DH5α中表达量都在 2 0 %～ 30 %之间。再分别运用变性、凝胶过滤层析及复性等手段纯化目的蛋白质 ,最后通过B淋巴细胞增殖实验检测纯化产物促人B细胞增殖的活性。实验结果表明 ,3种重组蛋白质都能明显刺激人B细胞增殖 ;统计学检验显示 ,突变体rhsBY V较野生型rhsBLyS的促人B淋巴细胞增殖活性显著增强。     

细胞因子作为DNA疫苗佐剂的研究进展

细胞因子是机体细胞(主要指免疫细胞)产生的一类具有广泛生物学活性的异质性肽类调节因子,在体内能激活免疫活性细胞,对免疫应答的产生和调节有重要作用。近年来,大量研究表明细胞因子可作为DNA疫苗佐剂来增强疫苗的免疫效果。简要综述了细胞因子作为DNA疫苗免疫佐剂的研究进展。     

芦笋性别决定与性别分化研究进展

从芦笋性别表现及其决定的遗传基础、性别分化途径,性别决定基因的定位以及性别分化特异表达基因的分离与分析等方面来综述芦笋性别决定与性别分化最新研究进展。目前,已构建了围绕芦笋性别决定基因M比较精细的遗传图谱,将M定位在L5染色体着丝点附近的0.63 cM区域内,并构建了含有8个跨叠克隆群的物理图谱,但由于大量重复序列的存在,跨叠克隆之间的空隙不能闭合;同时先后分离得到11个芦笋花器官发育特异表达基因,并通过序列分析和原位杂交等技术对这些基因的功能进行了分析。最后,对今后进一步研究提出了建议。     

rhsBLyS及其突变体对小鼠血清免疫球蛋白分泌及B细胞增殖分化的影响

为了进一步研究所构建的人可溶性B淋巴细胞刺激因子 (hsBLyS)及其突变体hsBY A(Cys14 6→Ala14 6 )和hsBY V(Cys14 6→Val14 6 )在体内的生物活性 ,将 3种重组蛋白注射入BALb C小鼠体内 ,进而分析重组蛋白对小鼠血清免疫球蛋白分泌和脾脏B细胞增殖分化的影响 ,并对 3种蛋白的体内生物活性进行了比较 .结果表明 ,3种蛋白均能促进小鼠血清总IgG和IgM的分泌明显增加 ,统计学检验显示突变体rhsBY V诱导这 2种免疫球蛋白分泌的能力最强 ;3种蛋白还诱导小鼠脾脏增大、脾脏成熟B细胞的相对数量增加 .该高活性突变体hsBY V的获得提示 ,Cys14 6并非BLyS发挥正常功能所必需 ,将Cys14 6突变成Val14 6有可能提高BLyS的生物活性 .     

人工海水胁迫下芦笋品种耐盐性评价的多元统计分析

利用浓度为25%的人工配制海水对25个芦笋品种进行了芽期和苗期的胁迫处理,调查发芽势、发芽指数、活力指数、胚根长、株高、茎数、茎粗、根鲜质量、根干质量以及根体积等10个农艺性状,以各性状耐盐系数作为衡量耐盐性的指标,利用多元统计分析方法对芦笋品种的耐盐性进行了综合评价。结果表明,调查的10个性状指标在品种间差异显著,因子分析将其集约于3个主因子上,即种子活力因子、根部因子和生长因子,主因子累计贡献率达82.2%。基于品种因子得分值进行聚类分析,25个芦笋品种可分为4类,即耐盐品种、较耐盐品种、中度耐盐品种和盐敏感品种。本研究建立的人工海水胁迫处理鉴定芦笋品种耐盐性的综合评价方法,可为芦笋材料耐盐性鉴定和耐盐育种提供理论参考。     

BLyS研究进展

B淋巴细胞刺激因子是新发现的属于TNF超家族成员的细胞因子,它能刺激B细胞增殖,分化并分泌IgG,IgA和IgM等免疫球蛋白,在体液免疫反应中发挥着重要作用,过表达BlyS的转基因小鼠呈现自身免疫性疾病症状。本文对B淋巴细胞刺激因子及受体的基因和蛋白结构、生物学功能,可能的作用机理及临床应用前景进行综述。