扑草净对远志幼苗根系活力及氧化胁迫的影响

以远志(Polygala tenuifolia Willd.)为材料,应用组织化学和生物化学的方法研究不同浓度扑草净(0—400 mg/L)对远志幼苗生长、根系活力、膜脂过氧化、活性氧含量及抗氧化酶活性等的影响。10 mg/L扑草净对远志幼苗根系活力、细胞膜完整性及活性氧的积累几乎无显著影响,而25—400 mg/L扑草净处理则显著增加活性氧的积累,明显抑制根系活力且破坏细胞膜完整性;上述结果进一步被膜脂过氧化、质膜完整性、活性氧产生(O.2-和H2O2)的非损伤组织化学染色所证明。远志幼苗可通过多种抗氧化酶(SOD、POD、CAT、APX等)和非酶抗氧化剂(如脯氨酸)的相互协调作用,清除低浓度扑草净胁迫诱发产生的活性氧,减轻对细胞的伤害。研究结果表明,发芽期是远志对扑草净处理的敏感时期,较为安全的扑草净临界浓度为10 mg/L;25mg/L扑草净处理即引起远志幼苗氧化胁迫和膜脂过氧化,使细胞膜的完整性受到破坏,根系活力下降,抑制了远志幼苗的生长发育。该研究为远志抗除草剂胁迫机制及其栽培过程中除草剂的安全合理使用提供理论依据。     

风沙地菊芋的主要生态学特性

菊芋(Helianthus tuberosus L.)根系发达,抗旱性强,具有重要的防风固沙功能.为了揭示菊芋防风固沙机理及生长适应性,对科尔沁沙地生长的菊芋主要生态学特性进行了研究.结果表明:菊芋的生长发育可分为出苗期、快速生长期和块茎膨大期3个时期;菊芋地上部器官生长与干物质积累8周之内增长缓慢,之后生长迅速,第18周块茎开始进入速生期,块茎干物质积累在第23周达到最大值,平均单株为298.15 g;菊芋的光合性能指标与干物质积累存在密切关系,其中菊芋叶面积指数、光合势均在地上部分生长速生期第9周起开始呈对数式增长,到地下块茎膨大速生期第18周达到最大值,分别为6.55、401016m2·d-1·hm-2;叶片叶绿素相对含量在地上干物质开始向块茎转移时最高,峰值为38.4.     

原代培养大鼠前列腺细胞建立前列腺增生筛药模型

目的建立原代培养大鼠前列腺上皮细胞体外筛药模型。方法无菌状态下取雄性SD大鼠腹侧叶前列腺,称量后,剪成1 mm3小块,经Ⅱ型胶原酶消化1 h后,过滤、离心获取前列腺细胞,接种于24孔板培养并对细胞进行形态学和免疫组织化学鉴定。获取的大鼠前列腺上皮细胞分别接种于96孔板和24孔板培养12 d后给予系列剂量(0.1～1000μmol/L)的他莫昔芬和阳性药物爱普列特处理72 h,利用CCK-8法检测前列腺上皮细胞存活率并计算药物IC50值,并进一步通过Giemsa染色后观察细胞生长及形态变化。结果细胞鉴定结果显示,获取的细胞具典型上皮细胞形态特征,细胞角蛋白和前列腺特异性抗原表达阳性,提示所获细胞为前列腺上皮细胞。爱普列特与前列腺上皮细胞孵育72 h后,CCK-8法检测结果显示能够明显抑制前列腺上皮细胞生长,其IC50值为42.7μM,进一步镜下观察结果显示,爱普列特未明显改变大鼠前列腺上皮细胞形态,但能导致存活细胞数减少。他莫昔芬则对大鼠前列腺上皮细胞生长无明显抑制作用,镜下观察前列腺上皮细胞数量和形态未见明显改变。结论利用原代培养SD大鼠前列腺上皮细胞可以成功建立前列腺增生体外筛选模型。     

大鼠前列腺上皮细胞培养鉴定及体外炎症模型建立初探

目的:在体外培养大鼠前列腺上皮细胞,建立脂多糖和蛇毒诱导的大鼠前列腺上皮细胞的体外炎症模型。方法:采用WAJC404培养基在体外培养大鼠的前列腺上皮细胞,通过免疫细胞化学方法对其进行鉴定,加入脂多糖和蛇毒用以建立体外的前列腺炎症模型。结果:在体外培养了大鼠的前列腺上皮细胞,泛细胞角蛋白染色阳性,脂多糖和蛇毒可损伤体外培养的前列腺上皮细胞,但不影响体外培养的前列腺上皮细胞培养液中细胞因子TNF-α和IL-1β及免疫球蛋白IgG、IgA和IgM的含量。结论:在体外培养了大鼠的前列腺上皮细胞,对大鼠前列腺体外炎症模型的建立进行了初步探索。     

自发性及睾酮诱导犬前列腺增生模型的比较

目的比较自发性及雄激素诱导犬前列腺增生模型的特点,为更好地评价治疗前列腺增生药物奠定方法学基础。方法成年雄性Beagle犬12只,随机分成2组,B超探测符合要求的老年Beagle犬6只,依次设为对照组、睾酮组和老年犬组（即自发性前列腺增生组）。睾酮组动物去势后,经肌肉注射（im）2.5 mg/kg的睾酮,对照组动物给予等体积溶媒,老年犬组动物不给药,连续4周。每周称重一次,最后一次给药24 h后,B超探测前列腺体积,采血,取血清备用。麻醉处死动物,取前列腺,称干湿重,测量前列腺体积,计算前列腺脏器系数,组织切片,HE染色后镜下观察前列腺病理组织学变化,并进一步利用显微图像软件测量前列腺上皮高度及腺腔面积。利用磁酶免和ELISA方法检测血清及前列腺组织中睾酮（T）、双氢睾酮（DHT）、前列腺特异抗原（PSA）和前列腺酸性磷酸酶（PAP）水平。结果①给药后,各组动物体重增长总体呈平稳趋势。②B超结果显示,去势Beagle犬给予睾酮4周,前列腺体积大于对照组（P〈0.01）,老年犬前列腺体积大于成年犬（P〈0.01）。③解剖结果显示,睾酮组和老年犬组实际前列腺体积均明显大于对照组（P〈0.05）,且老年犬前列腺体积大于睾酮组;睾酮组和老年犬组前列腺湿量和脏器系数均大于对照组（P〈0.05）,且老年犬前列腺湿重和脏器系数均大于睾酮组。④病理形态分析显示,睾酮组犬前列腺镜下主要表现为腺体增生,尤其是腺上皮增生,而老年犬则更多表现为间质增生。显微图像分析结果显示,与正常对照组相比,睾酮组前列腺上皮高度增加（P〈0.01）,腺腔面积增大（P〈0.01）;老年Bea-gle犬同样表现为前列腺上皮高度增加（P〈0.01）,腺腔面积增大（P〈0.05）,但上皮高度要低于睾酮组。⑤激素检测结果显示,与对照组相比,睾酮组血清中T、DHT和PAP水平略升高,前列腺组织中T（P〈0.05）、DHT（P〈0.01）、PAP（P〈0.05）和PSA水平升高明显;老年犬血清中T、DHT和PAP水平略升高,前列腺组织中T升高,但DHT、PAP和PSA水平均较正常组为低。结论自发性和睾酮诱导的犬前列腺增生模型均可用于前列腺增生药物评价,但模型间存在一定的差异性。