Expression of cytochrome P4502E1 in human liver: Relationship between genotype and phenotype in Chinese

Polymorphic cytochrome P4502E1 (CYP2E1) plays an important role in the metabolic activation of many carcinogens. We have previously shown that the c1/c1 genotype recognized byRsa I in the 5′-regulatory region of theCYP2E1 may be a susceptibility factor for developing esophageal cancer and lung cancer in Chinese. The present study was to investigate the relationship between theRsa I genotype and the expression of CYP2E1 in human livers. A total of 50 liver specimens were genotyped forCYP2E1 and assayed for CYP2E1 protein contents and functional activity by using specific antibody in immunoblot and a probe substrate,p-nitrophenol. A considerable interindividual variation in CYP2E1 protein (20-fold) and functional activity (56-fold) was observed among these liver samples. However, when they were categorized according to genotype, the mean content of CYP2E1 protein was significantly higher among individuals with the c1/c1 genotype than that among those having c1/c2 or c2/c2 genotype [124.0±83.9 pmol/mg (n = 28) versus 65.5 ±38.9 pmol/mg (n = 22),P<0.01]. The mean activity of CYP2E1 towardsp-nitrophenol for the c1/c1 genotype was also higher than that for the variant genotypes (198.4±27.8 pmol/min/mg versus 101.2 ±18.1 pmol^-1 · min^-1 · mg^-1,P<0.01). Also, the protein levels and functional activity showed a significant correlation (r = 0.68,P<0.01). These results demonstrate an association between theRsa I genotype and the phenotype of CYP2E1 in our samples, and the data are compatible with the assumption thatCYP2E1 c1/c1 genotype is a susceptibility factor for certain cancers in Chinese.     

8—MOP对体外培养人癌细胞的光敏灭活作用

本文根据MTT只能被活的增殖细胞中线粒体切断形成紫色甲(?)的原理,测定了8—甲氧基补骨脂素(8—MOP)对体外培养人癌细胞系HCT、KB和BEL细胞的光敏灭活作用。结果表明,8—MOP和UVA光照对这几种人癌细胞有肯定的灭活作用,该作用与8—MOP剂量和光照时间以及细胞种类有关;MTT法可以作为光敏剂活性检测的一种快捷方法。     

5-羟色胺诱发的主动脉区化学感受性升血压反射中某些区域性血管反应的分析

在15只麻醉开胸犬中,用在体器官恒流灌注法研究了骨胳肌、皮肤、肾和心脏的血管在5-HT 诱发的主动脉区化学感受性升血压反射中的反应,同时还观察了5-HT 对这些器官血管的直接效应。左心房注入5-HT(200μg)后,在动脉血压急剧上升的同时,股薄肌、皮肤(后爪)和肾脏的灌流压明显增加,其增值分别为43±8.47±5和56±27mmHg(P<0.01),而冠脉灌流压无明显改变。用阿托品和/或心得安阻断骨胳肌、皮肤和心脏灌流区域的 m 和同β-受体后,上述效应无进一步变动。向灌流环路直接注入5-HT(10—50μg),可引起皮肤和肾脏的血管收缩,而股薄肌和心肌的血管则扩张;后一效应不被心得安阻断。以上结果提示:1.在5-HT 诱发的主动脉区化学感受性升血压反射中,骨胳肌、皮肤和肾脏呈现明显的交感性缩血管反应,而并不伴有交感性扩血管活动;2.在外周血管可能存在两种不同的5-HT 受体,一种主要分布在皮肤和肾脏,引起缩血管效应;另一种主要分布于骨胳肌和冠状血管,引起扩血管效应。     

基于全基因组关联的中国常见肿瘤遗传病因学研究

肿瘤是基因-环境交互作用引起的复杂性疾病.在同样的环境暴露下,不同遗传背景的个体发生肿瘤的风险有很大差异.研究肿瘤相关遗传因素对理解肿瘤发生发展乃至诊断治疗都有重要意义.近年来发展的全基因组关联研究(genome-wide association study,GWAS)可在全基因组范围内发现与复杂疾病或表型关联的遗传因素,为复杂疾病遗传学研究提供了强有力的手段.欧美研究者运用全基因组关联研究的方法,对各种常见肿瘤进行了研究,获得了重要成果.2010年以来,中国科学家在国际核心期刊发表了一系列高水平的肿瘤全基因组关联研究成果,在中国常见肿瘤的遗传病因学研究方面取得了重要进展.     

二氮嗪再灌注处理通过抑制细胞内ROS信号保护心肌细胞

恢复心肌血流量是目前针对急性心肌梗塞的有效治疗方式,但是在心肌再灌注过程中会进一步引起心肌细胞的坏死和调亡。二氮嗪是一种线粒体ATP敏感型钾离子通道开放剂,研究证明二氮嗪预处理具有心肌保护功能。本研究主要探讨二氮嗪再灌注处理是否具有心肌细胞保护作用并探讨其分子机制。以体外培养的H9c2心肌细胞为研究对象,通过联合缺氧模拟在体心肌缺血复灌损伤,检测细胞凋亡、线粒体膜电位、细胞内活性氧及钙离子各项指标的变化。结果发现,与正常组(control)相比,缺血再灌损伤组(ischemia-reperfusion injury,IRI)细胞活性显著下降,细胞凋亡率显著升高,线粒体跨膜电位(MMP)下降,同时细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)和钙离子大量爆发,二氮嗪在这一过程中通过抑制细胞内ROS的增加、保护线粒体膜电位起到心肌细胞保护作用,并且其保护作用与细胞内另一种重要的第二信使钙离子没有直接关系。     

土壤水分胁迫对设施番茄根系及地上部生长的影响

为了研究土壤水分胁迫对番茄生长的影响,以番茄‘金粉2号’(Jingfen 2)品种为试材,于2013年5—8月间在南京信息工程大学可控试验温室设计正常灌溉(T1)、轻度胁迫(T2)、中度胁迫(T3)、重度胁迫(T4)4个土壤水分处理,观测不同处理番茄植株根系及地上部分的生长状况。结果表明:不同处理的番茄根系生长指标(根系总长度、总表面积、总平均直径、根尖数)的最大值均表现为:T2T3T1T4,比较峰值发现,T2、T3和T4的根系总长度分别为T1的1.8、1.0和0.4倍,总表面积分别为T1的2.3、1.1和0.4倍,总平均直径分别为T1的1.3、1.1和0.6倍,根尖数分别为T1的1.1、1.0和0.5倍;T1、T2和T3处理的番茄根系均集中分布在5—10 cm土层内,而在T4处理下根系集中分布在15—25 cm土层内;番茄的株高、茎粗和叶面积指数大小表现为:T1T2T3T4,T2、T3和T4的番茄株高分别比T1下降11.49%、28.6%和43.98%,茎粗以T4处理最低,为T1的73.57%,T2、T3和T4的叶面积指数分别为T1的81.33%、64.62%和43.37%,各处理间叶面积指数在5%水平下呈现显著性差异。相关分析表明,番茄地上部分和地下部分各项生长指标与土壤体积含水率呈正相关。研究认为轻度土壤水分胁迫对番茄植株地上部分的生长影响不显著,利于根系生长,中、重度土壤水分胁迫明显抑制了番茄植株地上部分的生长,降低根系在土壤中的分布层,研究为设施番茄水分管理提供科学依据。     

致念珠菌性包皮龟头炎白假丝酵母菌对9种抗真菌药物最低抑菌浓度测定

目的检测引起念珠菌性包皮龟头炎的白假丝酵母菌对9种抗真菌药物MIC,为临床治疗念珠菌性包皮龟头炎提供参考依据。方法常规培养分真菌,并鉴定到种,采用最低抑菌浓度法对白假丝酵母菌进行体外药物敏感试验。结果培养分离的12株菌中,白假丝酵母菌占75.00%,白假丝酵母菌生物变种占16.67%,近平滑假丝酵母菌占8.33%;11株白假丝酵母菌耐药率由高到低依次是氟康唑,伊曲康唑,咪康唑,酮康唑,克霉唑,益康唑,5-氟胞嘧啶啶,两性霉素B,制霉菌素,其中6种药物耐药率大于50%。结论白假丝酵母菌仍是造成念珠菌性包皮龟头炎最常见的致病菌,耐多药现象较为普遍,应根据临床实验室的体外药敏试验结果,指导临床合理用药。     

中国人肝脏细胞色素P450 2E1表达——基因型与表型的关系

细胞色素P450(CYP)2E1代谢激活多种致癌物并参与酒精代谢和自由基形成,其基因启动子区RsaⅠ单核苷酸多态与酒精性肝病和某些癌症如食管癌和肺癌的易感性相关.以免疫印迹和特异底物的方法研究了RsaⅠ识别的不同基因型肝脏标本中CYP2E1蛋白含量及其功能活性的差异.结果表明,c1/c1基因型(n=28)的蛋白含量((124.0±83.9)pmol/mg)高于携带至少一个c2等位基因的变异基因型((65.5 ± 38.9)pmol/mg,n=22),差异有极显著性(P<0.01).c1/c1基因型的肝微粒体代谢4-硝基苯酚的活性也同样显著高于变异基因型((198.4 ± 27.8)pmol/(min· mg)比 (101.2 ± 18.1)pmol/(min·mg),P <0.01)).结果证明,CYP2E1表达水平和酶活性的个体差异与RsaⅠ识别的基因多态有关,这与分子流行病学研究发现的c1/c1基因型是某些癌症的遗传易感因素一致.     

Expression of cytochrome P4502E1 in human liver: Relationship between genotype and phenotype in Chinese

Polymorphic cytochrome P4502E1 (CYP2E1) plays an important role in the metabolic activation of many carcinogens. We have previously shown that the c1/c1 genotype recognized by Rsa I in the 5'-regulatory region of the CYP2E1 may be a susceptibility factor for developing eso-phageal cancer and lung cancer in Chinese. The present study was to investigate the relationship between the Rsa I genotype and the expression of CYP2E1 in human livers. A total of 50 liver specimens were genotyped for CYP2E1 and assayed for CYP2E1 protein contents and functional activity by using specific antibody in immunoblot and a probe substrate, p-nitrophenol. A considerable interindividual variation in CYP2E1 protein (20-fold) and functional activity (56-fold) was observed among these liver samples. However, when they were categorized according to genotype, the mean content of CYP2E1 protein was significantly higher among individuals with the c1/c1 genotype than that among those having c1/c2 or c2/c2 genotype [124.0 ±83.9 pmol/     

双峰驼重链抗体组库的基本特征研究

目的:利用二代高通量测序技术,了解双峰骆驼循环B细胞重链抗体(HCAbs)组库的组成和基本特征。方法:通过分离骆驼外周血单核细胞(PBMC),提取m RNA,利用多重PCR和Illumina Mi-seq高通量测序技术对三头双峰骆驼的重链抗体可变区进行深度测序,分析了重链抗体组库V、J基因组成、重排时末端基因删除数和V-J基因配对率,以及CDR3的长度、香农多样性指数(Shannon index)、氨基酸组成分布等基本特征。结果:鉴定出平均每头骆驼130000条有效数据和67561条独特CDR3序列,HCAbs含量较高的V基因为IGHV1S45、IGHV1S50和IGHV1S52,J基因为IGHJ4和IGHJ6,所对应的V-J基因配对含量大于40%;CDR3的长度主要分布在10-30个氨基酸之间,含量较高的氨基酸为丙氨酸、甘氨酸和半胱氨酸;CDR3区域70%以上的平均长度为20个氨基酸长度,其中V基因长度为3 bp,J基因长度分布在1-18 bp。结论:双峰骆驼B细胞重链抗体组库由巨大的、不均匀分布(以少数VJ基因克隆占大多数)的和具有高度多样性的多克隆抗体构成,较长CDR3和富含丙氨酸、甘氨酸和半胱氨酸是HCAbs的重要特征。