伤寒、副伤寒菌的Vi抗原及O抗原复合物生成的电泳研究

1．Vi杭原、O杭原在电泳时各呈均一的肇,前者泳动速度鞍陕,一24．4×10-5厘米2．秒-1．伏-1,后者极慢,一1.0×10-5。但将Vi抗原与。抗原以不同此例混合后立即作电泳剐可见Vi峯减少,O峯消失,出现了泳速较快的1—3个峯,井且随着Vi抗原量的相对增加,它们的泳速也逐渐增加。这是由于生成了不同的复合物之故。 2．在pH 2．0—9．6,离子强度0．05—0．3的范围内,生成的复合物是稳定的,因此,可能不是依靠静电吸引力结合。 3．Vi抗原与伤寒、副伤寒甲乙的冷酚或热酚法制各的。抗原均可生成复合物。冶酚法。抗原再经热酚法除蛋白质二次后可得蛋白含量(Lowry法)低至0．2—0．6％的脂多糖。它仍能与Vi抗原生成复合物。 4．稀醋酸及稀碱处理Vi抗原、O抗原及Vi、O复合物可引起各种降解现象。这种变化与这些抗原及其复合物的牿构及成分有关。 5．对Vi抗原。抗原复合物生成在微生物学、免疫学上的意义加以讨论。     

利用人摄金蛋白(METALLOTHIONEIN)启动子和牛乳突瘤病毒在哺乳动物细胞中表达乙型肝炎表面抗原

用人Metallothioenin-Ⅱ启动子、乙型肝炎表面抗原基因,SV40早期基因的编接位点和多聚A位点构成了表达组件,然后插入到经改造过的BpV-1质粒中。所得质粒pdMTsAg-5转染小鼠C127细胞得到转化克隆。Ausria Ⅱ检测证明13株中有12株能产生HBsAg。对其中一株进行HBsAg收率观察,隔天收获为292.6～525.8μg/升,每天收获为200.9～369.0μg/升,可连续收获60天以上。经重金属离子诱导后,收率增至583～854.4μg/升。培养液经超滤浓缩和两次密梯离心后,可集中为一个狭窄的峰,顶峰的Ausria Ⅱ cpm为1.05×10~7,密度为1.20g/ml。     

制备免疫纯乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的一种综合方法

本文报告包括胃蛋白酶消化、DEAE纤维素离子交换层析、亲和层析、凝肢过滤等四个工序的生产纯HBsAg的综合方法。所得产品经对流电泳、琼脂免疫扩散、免疫电泳等法检查,不含正常人血清蛋白质(HuSP)成份,用来免疫动物可获得不合抗-HuSP高效价的单特异性抗HBs血清,因而证明了它是免疫纯品。本法所需条件一般,而且结果比较稳定。从100毫升HBsAg阳性血清(对流电泳效价1：16)一般可以制得纯HBsAg 13毫升(对流电泳效价1：16,0.3—0.4毫克／毫升),即3．9—5．2毫克。     

马抗乙型肝炎表面抗原的抗体(抗HBs)的性质及制备方法

本文报告用于放射免疫分析、反向被动血凝等高敏感度检测HBsAg试验的纯抗HBs的制备方法。用HBsAg-抗HBs免疫复合物免疫马匹得到抗HBs血清,其抗HBs效价为1：128—1：256,抗正常人血清蛋白抗体效价为1：64—1：128。用半饱和硫酸铵沉淀法制备得球蛋白部分,通过DEAE-纤维素离子交换层析柱(平衡用0．003M磷酸盐缓冲液,起始pH8.0)后,用聚丙烯酰胺凝腋电泳及免疫电泳检测,证实为单一成份的A峰;马的抗HBs及抗正常人血清蛋白抗体(抗HuSP)主要集中在A峰。将A峰通过偶联正常人血清的亲和层析柱,除尽其中的HuSP,即得到纯的抗HBs。对其中的A峰进行分析定位,表明A峰即马的IgGa亚类。     

马抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体的胃蛋白酶消化片段及其性质

在医疗实践中使用动物抗血清作被动免疫已有半个多世纪的历史。早期使用未经提纯的“原制血清”,因此反复注射会引起严重过敏反应。其后,免疫化学家研究了提纯抗体的方法,制出“浓制血清”。1936年发表了胃蛋白酶消化法,制出“精制抗毒素”,大大地减少了过敏反应,因而得以推广并沿用至今。但是在人群中多次使用也还会有人出现过敏反应。近年在国外有减少使用动物抗体,改用高价免疫人血清     

伤寒杆菌内毒素与蛋白质结合的减毒作用

降低内毒素的毒性而保留免疫原性的工作具有重要的实用意义,但至今仍无理想的方法。本文报告一种结合减毒方法。按westpbal的水一盼法制缶的伤塞菌内毒素,经稀碱激活后与10倍量的酪蛋白或八血清白蛋白结合,其毒性(用卡介苗致敏小鼠测定)可降低3—4．5倍;凳度原性(蒙冕凝集素产生能力)在稀破潋活后稽有降 低,与蛋白质结合后仍可恢复到原来水平。以精制破伤风类毒秦代替白蛋白与经激活之内毒秦保温亦可稍降低其毒性。已激活之内毒素’j白蛋白结合后再加入福马林至0.4％,在37℃保温16日,毒性叉可大为降低。在上进结果的基础上,通过进一步的工作,或可提供一种制造毒性较低的伤寒菌苗的方法。此外,通过上述实验,对蛋白质与内毒紊之生物括性的关系,也有进一步的了解。