皮质酮诱导的PC12细胞梯度应激损伤模型的构建及评价*

目的: 建立皮质酮诱导的PC12细胞梯度应激损伤模型,为细胞应激水平的评估和细胞应激损伤调控研究提供实验基础和对象。方法: 通过检测不同浓度皮质酮(0~1 000 μmol/L)在经过不同干预时间(8~48 h)后PC12细胞活力,观察皮质酮对细胞活力的影响,筛选最佳干预条件的细胞模型。分光光度法和微量法检测细胞模型的关键应激指标(MDA、SOD、NADH、LDH),对模型进行评价。结果: 当皮质酮浓度在200 μmol/L以下且干预时间为12 h时,细胞活力在半数失活率以下,可减少各组由于细胞活力下降而产生的混杂因素。 与空白对照组比较,皮质酮浓度依赖性地升高模型组的MDA、NADH和LDH水平,降低SOD水平(P＜0.01),符合梯度应激模型的构建要求。结论: 成功建立了PC12细胞梯度应激损伤模型,在干预时间为12 h的情况下,干预浓度为0 μmol/L、25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、150 μmol/L、200 μmol/L,使得细胞模型应激损伤程度梯度增加,可作为开展细胞应激损伤评估及调控实验的基础和对象。     

槲皮素对甲硫氨酸负载大鼠氨基酸代谢的影响

为探讨槲皮素对甲硫氨酸(Met)负载大鼠氨基酸代谢的影响,将Wistar大鼠24只随机分为3组,即对照组、1％甲硫氨酸组以及1％甲硫氨酸和0.5％槲皮素组,喂养6周后,采用高压液相色谱法测定血清中半胱氨酸含量,全自动氨基酸分析仪测定血清中其他氨基酸含量.结果显示,1％甲硫氨酸干预后除对牛磺酸产生显著影响外,对其他氨基酸没有明显影响.0.5％槲皮素干预后,血清必需氨基酸苏氨酸、缬氨酸含量较1％ Met组显著升高(p＜0.05),牛磺酸、缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸较对照组亦显著升高(p＜0.05),而血清丝氨酸和脯氨酸含量较对照组显著降低(p＜0.05).结果表明,槲皮素可能加强甲硫氨酸转硫化代谢途径.     

束缚应激对大鼠同型半胱氨酸代谢的影响

为了探讨束缚应激对大鼠血清含硫氨基酸代谢的影响,根据同型半胱氨酸(Hcy)水平,将32只雄性Wistar大鼠分为对照组(control)、束缚应激组(RS)、1%蛋氨酸组(1%Met)和1%蛋氨酸+束缚应激组(1%Met+RS)。采用高压液相色谱法检测血清中的Hcy、半胱氨酸(Cys)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,采用全自动氨基酸分析仪测定血清中蛋氨酸(Met)和牛磺酸(Tau)含量。结果显示,RS组大鼠血清Hcy、Cys和GSH含量随着束缚时间延长而降低,且较对照组和1%蛋氨酸组有显著性差异(p<0.05);RS组大鼠血清Met和Tau含量较对照组和1%蛋氨酸组则显著升高(p<0.05)。束缚应激可能降低血清抗氧化能力和总Hcy水平。     

冰川微生物菌群分布的研究概况及其前景

冰川中以耐冷的生物为主,形成一个以微生物为主要生命形式的相对简单的生态系统.冰川中的微生物包括病毒、细菌、放线菌、丝状真菌、酵母菌和藻类.其中一些病毒对人类健康具有潜在的危害性.着重论述了不同区域和不同海拔高度的冰川微生物类群和数量分布特征以及冰芯（深冰川）细菌菌群分布与气候环境的关系.综述结果表明：一些微生物类群广泛存在于各地的冰川上,具有全球分布特性;另一些类群只出现在个别冰川上,为一些地方性冰川微生物.随着海拔高度的增加,冰川上呈现出冰、雪冰和雪环境明显不同的生态条件;微生物类群分布也具有明显的差异性,与冰川上的生态条件和盛行的风向有关.优势类群对冰、雪冰和雪环境具有一定的指示意义.冰川微生物数量分布不仅受到冰川上的水热、光照和营养状况的影响,还与降雪的沉积作用有关.冰芯中的细菌数量与矿物微粒含量具有密切的对应关系.最后指出了冰川微生物研究在基因多样性、气候环境变化、生物地球化学循环、微生物对环境变化的响应机制和星际生命探索中的重要性及其生态学和社会经济意义.     

忍冬属植物的遗传多样性及其种间关系研究

应用RAPD标记技术对甘肃省境内的23种忍冬属(Lonicera Linn．)植物的遗传多样性及其种间关系进行了探讨。从34个随机引物中共选出9个多态性和重复性较好且谱带清晰的引物,这9个引物扩增出的DNA片段大多在300～3000bp之间,所形成的多态性位点数差距较大。POPGENE 1．31软件分析结果表明：甘肃省忍冬属植物具有较为丰富的遗传多样性,其多态性比率为71．93％,Shannon多样性指数与Nei指数分别为0．3230和0．2086。Nei‘s遗传距离和UPGMA分析结果显示,23种忍冬明显地聚为2大类,其下又有较多分支,即隶属于同一亚组或相近亚组的不同种基本归为一类,其种间关系与传统的形态学分类结果基本一致。但也有个别种的归属及种间关系稍有变化,如形态学上差异较大的毛药忍冬和毛花忍冬在本研究中聚在一起。这可能与不同的分类水平有关。     

高蛋氨酸饲料喂养的大鼠高同型半胱氨酸血症模型的实验研究

探讨高蛋氨酸饲料诱导高同型半胱氨酸血症的适应剂量及其对相关代谢的影响.选择质量分数1%、2%和3%蛋氨酸饲料喂饲大鼠,高压液相色谱法测定血清同型半胱氨酸、半胱氨酸和还原形谷胱甘肽含量.结果表明饲料中1%蛋氨酸可以使血清同型半胱氨酸水平升高且无生长抑制等毒副作用,2%和3%蛋氨酸饲料喂养大鼠后出现摄食量减少和生长抑制等毒...     

槲皮素调节大鼠肝细胞谷胱甘肽代谢的机制

目的：探讨60 μmol/L槲皮素调节BRL大鼠肝细胞谷胱甘肽（GSH）代谢的可能机制。方法：采用MTT法测定槲皮素对BRL细胞活力的影响;采用试剂盒法检测细胞内GSH和GSSG的含量,以及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、肝脏谷胱甘肽 S转移酶（GST）、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（γ-GCL）、谷胱甘肽还原酶（GR）的活性;采用实时荧光定量PCR法检测GSH-Px、GST、γ-GCL和GR基因mRNA的表达情况;采用ELISA法测定细胞内的Keap1、总Nrf2、ERK1/2、磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）、JNK、p-JNK,以及细胞核Nrf2的蛋白水平。结果：槲皮素不影响大鼠肝细胞的活力（P>0.05）;与对照组比较,槲皮素组细胞内还原型GSH含量和GSH/GSSG比值（P<0.05）显著降低（P<0.05）,γ-GCL酶活性显著减弱（P<0.05）,GR和GSH-Px的mRNA表达显著减少（P<0.05）,Keap1和JNK蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论：槲皮素可减少BRL大鼠肝细胞还原型GSH的含量,这种作用主要与槲皮素抑制GSH的生成有关。