反刍兽月形单胞菌β-木糖苷酶基因在毕赤酵母中的高效表达及酶学性质

β-木糖苷酶(β-xylosidase,酶编号EC 3.2.1.37)是木聚糖降解酶系中的重要组成部分。本研究以毕赤酵母Pichia pastoris GS115为宿主菌尝试表达反刍兽月形单胞菌Selenomonas ruminantium中的β-木糖苷酶基因Sxa。根据毕赤酵母对密码子的偏爱性、mRNA二级结构、GC含量和稀有密码子,对Sxa基因进行优化;通过基因合成技术获得了全长基因mSxa并构建重组酵母表达载体pPIC9K-mSxa;以BglⅡ酶切重组载体pPIC9K-mSxa,电击转化将m Sxa基因导入毕赤酵母GS115中,获得的转化子经过表型和遗传霉素G418抗性筛选、PCR鉴定,得到表达β-木糖苷酶基因的工程菌GS115-pPIC9K-mSxa;通过活性测定获得高效表达β-木糖苷酶的重组酵母,并对重组β-木糖苷酶的酶学性质进行了初步研究。结果表明,重组β-木糖苷酶的分子量约为66 kDa。在发酵罐水平表达的酶活性达到了287.61 IU/mL。对酶学性质研究显示,该酶在温度为40-60℃,pH为5.0-7.0时较稳定,其最适反应温度和pH分别为55℃和6.0,专一性地作用于β-木糖苷键。Mn~(2+)和Ca~(2+)对该酶具有激活作用,而Fe~(3+)、Cu~(2+)、Co~(2+)、Mg~(2+)、EDTA及SDS抑制其酶活性。本研究首次将反刍兽月形单胞菌的β-木糖苷酶基因转化到毕赤酵母中获得表达,并具有较高活性,为进一步工业化应用奠定了基础。     

密粘褶菌Gloeophyllum trabeum胞外低分子量多肽的分离纯化及其对纤维素生物降解作用

通过HPLC高效液相层析由褐腐真菌中能强烈降解木质纤维素的代表菌株密粘褶菌Gloeo phyllumtrabeum的胞外培养液 ,分离纯化得到一低分子量的活性多肽组分 (Gt因子 ) .Gt因子具有较好热稳定性 ,在pH 2 5～ 6 5范围内保持稳定 .Gt因子分子量在 4 0 0 0左右 ,等电点pI 6 6 .Gt因子具有络合Fe3 + 的能力 ,且能够将Fe3 + 还原为Fe2 + .在O2 存在时 ,能以纤维素物质为电子供体形成羟基自由基HO·.利用循环伏安法 ,观察到Gt因子与纤维素底物之间的氧化还原过程 .研究表明 ,Gt因子极有可能在褐腐菌的纤维素降解初期起着重要的作用 .     

马达加斯加的珍贵动物——狐猴

马达加斯加位于印度洋西部,是一个美丽富饶的岛国。整个岛屿风光优美动人。东部沿海一带种植有椰林、香蕉、咖啡、丁香等。在这里栖息着本地区特有珍贵的动物——狐猴(lemur)。 狐猴的外形不仅有别于一般猿猴。就其本身来说,由于品种不同,外形与毛色也各异。有的像松鼠与猴的混合体,有的像猫与猴的混合体,有的则像狐狸与     

老年腰椎间盘突出症患者术后下肢深静脉血栓形成的影响因素及术前D-D、TM、Leptin联合应用的预测价值

摘要 目的：分析老年腰椎间盘突出症（LDH）患者术后下肢深静脉血栓形成（LDVT）的影响因素并探讨术前D-二聚体（D-D）、血栓调节蛋白（TM）、瘦素（Leptin）联合应用的预测价值。方法：选取2020年1月～2021年12月广州医科大学附属第三医院收治的412例接受腰椎椎间融合术（LIF）老年LDH患者,根据术后是否发生LDVT将其分为LDVT组和非LDVT组。收集老年LDH患者临床资料,采用酶联免疫吸附法检测术前血清D-D、TM、Leptin水平。采用多因素Logistic回归分析老年LDH患者LIF术后LDVT的影响因素,采用受试者工作特征（ROC）曲线分析术前血清D-D、TM、Leptin水平对老年LDH患者LIF术后LDVT的预测价值。结果：412例老年LDH患者LIF术后LDVT发生率为21.12%（87/412）。多因素Logistic回归分析显示,年龄增加、体质指数≥24 kg/m²、卧床时间≥7 d、D-D升高、TM升高、Leptin升高为老年LDH患者LIF术后LDVT的独立危险因素（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,术前血清D-D、TM、Leptin水平单独与联合预测老年LDH患者LIF术后LDVT的曲线下面积分别为0.766、0.760、0.767、0.894,联合预测的曲线下面积大于D-D、TM、Leptin单独预测。结论：老年LDH患者LIF术后LDVT发生与年龄、体质指数、卧床时间和D-D、TM、Leptin有关,术前血清D-D、TM、Leptin水平联合预测老年LDH患者LIF术后LDVT的价值较高。     

贵州乌蒙烟区清甜香烤烟风格形成的农业地质背景特征

在贵州乌蒙烟区109个地点开展野外调查、进行土壤及烟叶样品的采集和测定,从成土母岩类型、成土母质来源、土壤类型与养分、地形地貌4个方面分析了乌蒙清甜香烤烟风格形成的农业地质背景特征。结果表明:典型清甜香烤烟形成的成土母岩类型以碳酸盐岩类沉积岩和碎屑岩类沉积岩为主,清甜香烤烟以碳酸盐岩类沉积岩为主,弱清甜香烤烟以碳酸盐岩类沉积岩和粘土岩类沉积岩为主;影响清甜香烤烟亚型风格形成的成土母质来源和各来源所占比例各不相同,但均以坡积物为主;随着烤烟清甜香风格的增强,土壤类型以黄棕壤为主,土壤质地由粘向砂转变,典型清甜香烤烟风格形成的土壤有机质、速效氮、全钾、水溶性氯含量相对较低,而有效钾含量最高;典型清甜香烤烟形成的地貌类型以高中山地貌为主,清甜香烤烟在高中山地貌和中山地貌的分布比例接近,而弱清甜香烤烟以中山地貌为主。     

黄色粘球菌基于复杂社会性细胞行为的生物被膜

黄色粘球菌具有多样化的细胞行为,具备典型多细胞水平的社会性特征。其形成的生物被膜是目前认知的最为复杂的单种群细菌生物被膜之一。黄色粘球菌的社会性细胞行为主导了其生物被膜形成过程中的关键环节,包括固体介质表面的细胞运动、群体细胞的捕食、亲缘细胞的识别、子实体的发育、粘孢子的分化以及细胞程序性死亡等行为过程。文中将介绍相关领域的研究进展。     

硫代硫酸钠干扰斑马鱼胚胎发育并致畸

硫的衍生物潜在的威胁着胚胎的发育过程.斑马鱼被用于研究不同浓度（1×10-6～1 mol/L）的硫代硫酸钠（sodium thiosulfate, STS）对胚胎发育的影响,在解剖显微镜下实时观察斑马鱼胚胎发育的全过程.采用Western 印迹法检测乙酰化的微管蛋白——α-微管蛋白（acetylated tubulin, α-tubulin）和神经元增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达,分别检测STS暴露后胚胎的运动神经元功能,神经元的增殖状态.发育中的斑马鱼胚胎暴露于0.1～1 mol/L STS,呈现出严重的发育迟缓,并且伴随多脏器畸形;暴露于10 μmol/L～10 mmol/L STS,胚胎呈现循环系统,神经系统以及颌面部畸形.胚胎在48 hpf (hours post fertilization)时,对STS的暴露敏感高于24 hpf和96 hpf.STS可能干扰细胞的增殖及运动神经元的正常分化.STS可能干扰正常的细胞骨架结构,并在胚胎发育晚期影响细胞增殖,对胚胎神经系统、循环系统及颌面部有致畸作用.     

细菌的细胞程序性死亡

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)也称为细胞程序性死亡 (ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ ,ＰＣＤ) ,是由细胞自身的程序性自杀机制激活的细胞死亡现象。在多细胞真核生物中 ,程序性的细胞死亡是由细胞表面的死亡受体介导 ,通过一系列的半胱氨酸蛋白酶 (ｃａｓｐａｓｅｓ)作用而启动[1] ,维系个体结构稳定、功能平衡和生长发育所必需的基本生物学过程。一般存在于个体的发育过程中 ,导致细胞功能和形态学上的改变 ,如蛋白质的水解、ＤＮＡ和ＲＮＡ的降解、细胞的收缩 ,以及细胞碎裂形成凋亡小体 (ａｐｏｐｔｏｔｉｃｂｏｄｉｅｓ)等 …     

纤维堆囊菌生长及限制因素的研究

纤维堆囊菌对可溶性淀粉、木聚糖、纤维素等复杂碳源的利用能力较强,简单碳源中只利用葡萄糖;KNO3、蛋白栋是较好的氮源,大多数氮源都能支持生长,表明该菌营养要求简单,能高效的得用处是里丰富的纤维素资源。堆囊菌的盐耐受能力较低,盐浓度高于1％的培养基中菌体几乎不能生长,Mg^2是生长必须的元素,Ca^2 对生长没有明显的作用,但是子实体的形态发生所必需的。培养基的起始pH为7.0时细胞生长较好,大于8.0或小于5.0不生长。纤维堆囊菌生长具有细胞密度依赖性,低密度的细胞不能生长。固定在滤纸上的细胞淋洗液（纤维素酶降解产物）对细胞生长具有明显促进作用,并能降低细胞生长的密度依赖性。