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目的用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)处理HeLa细胞,检测其NKG2D配体MICA的表达及其对NK92细胞杀伤敏感性的变化。方法不同浓度的5-Fu处理HeLa细胞,在不同时间点用半定量PCR及流式细胞术检测HeLa细胞表面的NKG2D配体MICA在RNA及蛋白水平的表达变化情况,用MTT法检测NKG2D抗体封闭NK92细胞的NKG2D受体前后,NK92细胞对HeLa细胞的杀伤作用。结果不同浓度的5.Fu作用于HeLa细胞后,半定量RT—PCR结果显示MICA表达随5-Fu作用浓度增加逐渐增高。而且40μg/ml5.Fu作用于HeLa细胞后随着作用时间的延长(0、8、16、24h)MICA表达增加,流式细胞术检测结果表明,MICA表达的增加主要依赖于未凋亡细胞的MICA表达。在40μg/ml5-FU作用24h,效靶比为2.5:1,5:1,10:1,20:1时都检测到NK92细胞对HeLa细胞的杀伤增强,杀伤作用可部分被NKG2D抗体抑制。结论5-FU能够上调HeLa细胞表面NKG2D配体MICA的表达,增强HeLa细胞对NK92细胞的敏感性,提示化疗联合NK细胞免疫治疗宫颈癌可产生协同作用,提高治疗效果。 相似文献
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目的:研究一种对蟾蜍心脏功能影响较小的固定方式,适用于蛙心起搏点以及蛙心室舒缩与心电图同步记录观察期前收缩和代偿间歇实验的固定方式。方法:将一定数量的蟾蜍平均分为三组,分别为对照组捣毁大脑和脊髓组、乌拉坦皮下淋巴囊麻醉组。模拟Ⅱ导联分别将麻醉组、捣毁组蟾蜍连接RM6240,进入心电图实验模块,观察并记录两组组蟾蜍的处理前后心电图的变化情况,以及两组蟾蜍经过处理后痛觉、肌张力、呼吸的对比情况。快速游离三组蟾蜍的心脏,4%甲醛固定,30%蔗糖溶液脱水,修剪后冰冻固定,切片,苏木精-伊红(HE)染色,通过光学显微镜观查。结果:①乌拉坦皮下淋巴囊麻醉组蟾蜍的固定效果与捣毁大脑和脊髓组蟾蜍相当。②给药前后麻醉组蟾蜍的心电图变化幅度小于捣毁前后捣毁组蟾蜍的心电图。③与对照组蟾蜍的心肌细胞相比乌拉坦皮下淋巴囊麻醉组蟾蜍的心肌细胞破坏程度小于捣毁大脑和脊髓组蟾蜍。结论:在蛙心起搏点以及蛙心室舒缩与心电图同步记录观察期前收缩和代偿间歇实验中对蟾蜍进行乌拉坦皮下淋巴囊麻醉是一种优于捣毁蟾蜍大脑和脊髓的固定方法。 相似文献
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用双引物法对GI基因进行体外定点突变,构建了突变体Q20L和G247D。含突变基因的重组表达质粒pTKD-GIQ20L及pTKDGIG247D在E.coli K38菌株中表达。纯化的突变酶与野生型酶相比:(1) GIQ20L的最适反应温度下降5℃,热稳定性为野生型酶的78%,对底物的亲和性增强;(2) GIG247D的酶活提高约33%,最适pH下降0.6个单位,但热稳定性降低。初步分析认为,Gln 20位于α0~α1螺旋之间,其亲水侧链被Leu的疏水侧链取代后,分子表面增强的疏水作用,反而不利于蛋白质的稳定,使GIQ20L的热稳定性降低。Gly247是酶活性中心β折叠(242~247aa)的最后一个残基。引入电负性极强的Asp后,可能改变分子的静电场分布,影响了活性部位的电荷传递过程,使GIG247D酶活提高。引入的电荷,可能改变活性中心可解离基团的pKa,使其最适pH下降。另外Asp247的侧链在周围空间结构中显得过于拥挤,易与其他侧链产生排斥,由此影响到β-折叠的稳定性,接近亚基结合面的Asp247,可能进一步影响到亚基间相互作用的稳定性,最终导致酶热稳定性的降低。GI酶活和最适pH的改善更利于工业生产。 相似文献
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目的:分析后腹腔镜下保留肾单位肾部分切除术后患肾肾功能的影响因素。方法:回顾性分析2011年5月~2013年10月本院收治的45例行后腹腔镜下肾部分切除术肾癌患者的临床资料,采用99mTc-DTPA肾核素扫描评估术前及术后3月术侧肾的肾小球滤过率(GFR)。结果:手术时间100~240min,平均(135±33.21)min。肾动脉阻断时间(20.01±7.35)min,肿瘤大小(3.05±1.24)cm。术前及术后3月术肾GFR分别是(46.53±6.35)、(32.22±4.65)ml/min。术侧肾术后GFR下降(15.36±2.36)ml/min,与术前相比下降约34%。经随访1月-2年,无复发及转移病例,患者全部无瘤生存。影响手术前后血肌酐水平变化的相关因素主要为手术时间、阻断时间、气流量、术中失血量(P0.05);影响手术前后GFR水平变化的相关因素主要为阻断时间、气流量、手术时间(P0.01)。术前肾功能情况、缺血时间和肿瘤最大径是术侧肾功能下降程度的独立预测因子;术前肾功能情况和肿瘤最大径是总体肾功能下降程度的独立预测因子。结论:后腹腔镜下保留肾单位肾部分切除术后患肾肾功能的影响因素包括术前肾功能、手术时间、肾动脉阻断时间、气流量、术中失血量、肿瘤大小等。 相似文献
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基于生态恢复和文化回归的梯田景观格局重建--以菲律宾科迪勒拉高山水稻梯田景观复兴为例 总被引:2,自引:0,他引:2
基于菲律宾科迪勒拉梯田景观遭到严重破坏、世界文化遗产受到威胁的现状,通过分析先人建立的"水源涵养林-木涌-聚落-梯田-水系"结构体系以及传统文化对梯田景观格局稳定性的保护和控制,剖析隐含在高山水稻梯田景观背后的生态技术和文化格局,了解和借鉴先人智慧,结合现状生态、社会问题和地区特征,分析梯田景观恢复的需求和挑战,运用景观生态学技术手段和对传统文化的唤醒,进行采伐迹地恢复、梯田景观恢复、灌溉体系修复、对抗外来物种入侵,借鉴传统管理模式建立适应新形势的社区管理和合理的旅游规划体系,重建"森林-木涌-聚落-梯田-水系"的景观生态格局,促进传统文化回归,实现高山梯田景观复兴与世界文化遗产保护。 相似文献
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目的:探讨应用ROC曲线分析钙化点分布及形态特征对乳腺癌诊断的价值。方法:收集由超声影像检查发现钙化点并最终经病理诊断为乳腺癌的198例患者的影像资料,通过ROC曲线分析钙化点分布情况及其形态特征,包括单位面积个数、不同形态钙化的概率、区域平均直径、最长直径的差异等。采用ROC曲线分析数据,了解其对乳腺癌的诊断价值,并确认其最佳临界值。结果:恶性病变组中钙化点分布最佳单位面积个数是34个/m2,区域平均直径22.98mm,长径差异1.41ram,沙砾样钙化率占78.9%,线样分支状钙化率51.2%;ROC曲线下面积各为:0.745、0.756、0.678、0.860、0.900。其中线样分支状钙化率诊断准确率最高。结论:各种钙化分布的特征均有诊断效能,但单一的因素存在局限性,综合检测多项特征能有效的提高准确率。 相似文献
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[目的]从T7噬菌体展示的结核分枝杆菌基因组DNA文库中筛选结核病阳性血清特异结合蛋白。[方法]以饱和硫酸铵法初步纯化的结核病阳性血清为靶分子,对结核分枝杆菌基因组DNA文库进行3轮生物淘选; PCR扩增阳性噬菌体的外源DNA片段,测序后进行BLAST分析;间接ELISA和斑点免疫印迹试验检测阳性噬菌体与结核病阳性血清能否特异结合。[结果]经过3轮生物淘选,与结核病阳性血清特异结合的噬菌体得到明显富集; BLAST结果表明随机挑取的19个阳性噬菌体包括4种不同的序列,其中编码核糖激酶的序列出现次数最多;这些代表性噬菌体均能与结核病阳性血清特异结合。[结论]成功筛选到能与结核病阳性血清特异结合的4种蛋白,其中核糖激酶可能为与结核病阳性血清特异结合的优势抗原。 相似文献
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目的:探讨全程综合护理干预对心肌梗死患者遵医行为及预后的影响.方法:100例心肌梗死患者随机分为对照组及全程综合护理组,每组各50例.对照组实施传统的常规护理,综合护理组患者开展全程综合护理.出院随访1年,1年后复查冠状动脉造影,比较期间服药日比率和心血管事件发生率.结果:全程综合护理干预提高患者服药日比率(81.1±6.2%vs.60.9±5.9%,P<0.05),并减少患者心肌梗死及PCI术后再狭窄等心血管事件的发生(P<0.05).结论:全程综合护理干预可提高心肌梗死患者遵医行为,降低二次心梗和冠状动脉再狭窄等心血管事件发生率,改善了患者的预后,为心梗患者的护理提供了新思路. 相似文献