浙贝母根际土壤总DNA提取和纯化方法的比较

本研究通过对6种土壤总DNA提取方法(CTAB-SDS-冻融法、玻璃珠-SDS-酚氯仿抽提法、玻璃珠-聚乙烯聚吡咯烷酮-SDS法、玻璃珠-聚乙烯聚吡咯烷酮-溶菌酶法、玻璃珠-聚乙烯聚吡咯烷酮-冻融法和UltraClean试剂盒法)和4种纯化方法(改进琼脂糖凝胶电泳法、2%聚乙烯吡咯烷酮-琼脂糖凝胶电泳法、PVPP层析柱法和低熔点琼脂糖电泳法)的比较,证明利用20 mmol/L EDTA(pH 7.5)预处理土壤后,利用CTAB-SDS-冻融法提取土壤总DNA并经改进琼脂糖凝胶电泳法纯化获得的浙贝母根际土壤总DNA的得率和纯度相对较高,达44.00 μg/g±2.65 μg/g土壤,可用于后续基于16S rDNA分析基础上的土壤微生物分子生态学的分析工作.     

盐度和pH对红树根际土壤来源的曲霉属真菌F3的生长及分泌活性物质的影响

本研究考察了一株从中国海南东寨港红树林保护区的红海榄根际土壤中分离得到的曲霉属真茵F3在不同盐度和pH的SDA培养基中的生长和分泌抗茵活性代谢产物的变化.结果显示:高盐环境(3%～9%)及偏碱性条件(pH 8～10)有利于该真菌的生长.在初步优化培养基及培养条件的基础上,通过发酵和有机溶剂萃取的方法获得了该真菌发酵液的乙酸乙酯浸膏,得率为448 mg/L.该浸膏对多种微生物的生长具有明显的抑制作用,其中对细菌Staphylococcusaureus、S.epidermidis,Sarcina lutea、Bacillus subtilis和Escherichia coli的MIC分别为31.3μg/mL、31.3μg/mL、7.8μg/mL、7.8μg/mL和125.0μg/mL;对真菌Candida albicans的MIC为125.0μg/mL.研究同时表明:该乙酸乙酯浸膏还具有明显的细胞毒活性,其对人脐静脉内皮细胞ECV304、人结肠癌细胞Lovo以及肝癌细胞HepG2的IC50分别为3.45μg/mL、4.88μg/mL和14.31 μg/mL.