红海榄根际土壤来源的泡盛曲霉（Aspergillus awamori）F12及其代谢产物的抗菌活性分析

摘要：【目的】鉴定一株来自于红海榄根际土壤并具有分泌抑菌活性代谢产物的真菌菌株F12,并从其发酵液乙酸乙酯浸膏中分离抑菌活性成分。【方法】通过形态学观察以及ITS序列分析方法对菌株F12进行鉴定;利用色谱技术分离发酵液乙酸乙酯浸膏中的次生代谢产物,根据化合物的质谱、氢谱、碳谱以及理化性质确定其结构,并检测它们对细菌生长的抑制作用。【结果】菌株F12被鉴定为Aspergillus awamori strain F12;从其发酵液乙酸乙酯浸膏中分离到3种化合物：1,4-二甲氧基苯（1）、大黄素（2）和3,6-二苯甲基哌嗪-2,5-二酮（3）,其中化合物1属于在本属真菌中首次报道。化合物2对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的生长具有明显的抑制作用,最低抑菌浓度（MIC）分别为16ng/L和32ng/L,化合物1和3对上述菌株的生长无明显的抑制活性。【结论】首次发现从红海榄根际土壤中分离到的泡盛曲霉（Aspergillus awamori）菌株F12具有合成1,4-二甲氧基苯和大黄素的能力,其中后者对微生物的生长具有明显的抑制作用。     

木榄根际土壤来源的曲霉属真菌F5及其抗菌活性代谢产物

将一株分离自木榄根际土壤的菌株F5鉴定为曲霉属环绕组真菌成员,其在形态学特征和ITS序列上与Aspergillus ochraceopetaliformis极为相似。该菌株在改良葡萄糖蛋白胨酵母培养基(GPYM)中28℃下160r/min发酵7d后的产物具有明显的抑菌活性。利用色谱方法从菌株F5的发酵产物中分离鉴定到2种化合物:(R)-(-)-mellein(Ⅰ)和flavacol(Ⅱ),其中,flavacol对枯草芽孢杆菌的生长具有明显的抑制作用,最低抑菌浓度(MIC)为32mg/L,而mellein对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的生长均无明显的抑制活性。     

NF-κB激活在兔急性心肌梗死再灌注后无复流中的意义

目的:观察心肌核因子-κB(NF-κB)在急性心肌梗死(AMI)再灌注后无复流的活化情况,探讨NF-κB促进无复流发生发展的作用机制。方法:24只新西兰大白兔随机分为假手术组(冠状动脉只穿线不结扎)和缺血再灌注组(结扎冠状动脉2小时,再灌注1小时),每组12只。采用凝胶阻滞迁移分析方法(EMSA)检测正常区、缺血区和无复流区心肌组织中NF-κB活性;ELISA法测定不同时点血浆中白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(CRP)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;光镜、电镜观察心肌组织病理变化。结果:(1)与正常区相比,缺血区和无复流区心肌组织中NF-κB活性异常升高(P<0.01)。(2)与结扎前相比结扎后2h、再灌注后1h血浆IL-6、CRP、TNF-α水平呈进行性升高(P均<0.05)。(3)NF-κB的活性与无复流面积、血浆IL-6、CRP以及TNF-α水平呈正相关(分别为r=0.844,P<0.01;r=0.682,P<0.05;r=0.687,P<0.05;r=0.893,P<0.01)。(4)无复流面积与血浆IL-6、CRP以及TNF-α水平呈正相关(分别为r=0.861,P<0.01;...     

微创经皮肾穿刺碎石术（MPCNL）治疗上尿路结石的临床分析

目的：探讨微创经皮肾穿刺碎石术（MPCNL）用于治疗尿路结石的临床效果。方法：选取120例单侧上尿路结石病患者,随机分为两组,每组60人。一组应用微创经皮肾穿刺碎石术（MPCNL）进行一期单通道上尿路取石,另一组采用开放手术治疗。比较并分析两组患者的临床疗效。结果：应用MPCNL治疗的60名患者中,结石清除的有55名,清除率为91．17％,手术时间平均为77分钟,住院时间平均为5-3天。术中平均出血100mL,术后发生大出血者一例,经输血后好转,术后发热者38例,发热比例为63-3％,尿液转清时间平均为2．5天。应用开放式手术的60名患者中,结石清除的有39例,清除率为65．0％,平均手术之间为112分钟,住院时间平均为18．1天,术中平均出血380mL,术后发生大出血者9例,经输血后好转,术后发热者43例,发热比例为71．2％,尿液转清时间平均为8．6天。结论：MPCNL方法治疗上尿路结石的效果明显比开放式手术好,具有清除率高、手术时间短、术后并发症少、术后感染少以及患者恢复快的优点。     

MiR-31转基因小鼠的构建及其在组织器官的表达

目的 构建稳定过表达的miR-31转基因小鼠,检测其主要组织器官中miR-31的表达变化情况并对在体miR-31过表达的应用提供合格的工具鼠。方法 使用Gateway cloning技术构建miR-31过表达载体,使用DNA显微注射技术将构建好的载体注入受精卵内,随后转移至假孕母鼠内,待其自然生产。将新生小鼠提取尾部DNA,PCR及琼脂糖凝胶电泳鉴定miR-31过表达阳性小鼠,筛选阳性小鼠并饲养繁殖。另取阳性小鼠,提取主要组织器官的miRNA并使用RT-PCR检测其miR-31的表达量。同时对比阳性小鼠和野生型小鼠神经系统中Nestin的表达和神经干细胞的数量。结果 成功构建了miR-31过表达转基因小鼠,并在屏障环境下饲养繁殖至14代以上。各主要组织器官miR-31的表达均升高且稳定表达。阳性小鼠Nestin的表达和神经干细胞数量均高于野生型小鼠。结论 通过使用Gateway cloning技术成功构建了miR-31过表达转基因小鼠,且在各代小鼠中miR-31的表达稳定,神经系统内的神经干细胞数量多于野生型小鼠,可为进一步研究miR-31过表达后在体内的功能和神经系统疾病的治疗提供良好的工具小鼠。     

党参、莱菔子提取物与抗性糊精复合配方的辅助通便功能研究

目的：研究党参及莱菔子提取物与抗性糊精复合配方对便秘小鼠模型的肠推进和促进排便作用的影响,并进一步研究复合配方中莱菔子提取物和党参提取物在体外实验条件下对鸦片受体的抑制作用。方法： 采用地芬诺酯灌胃造成小鼠便秘模型,观察受试样品对动物小肠推进的影响;采用地芬诺酯灌胃造成小鼠便秘模型,观察受试样品对动物排便的影响;采用体外细胞模型,观察莱菔子提取物和党参提取物单独或联合作用对鸦片受体的抑制作用。结果 ：单独使用党参及莱菔子提取物（933mg/kg BW）小鼠肠推进和首粒排黑便时间有明显效果,抗性糊精（1 000mg/kg BW） 对首粒排黑便时间、排黑便粒数和总重量有明显作用,二者复合配方（1 933mg/kg）在肠推进、对首粒排黑便时间、排黑便粒数和总重量等方面均有明显作用,表明了二者的体内协同作用。同时,体外实验结果表明,党参提取物（IC50,7.97mg/mL）、莱菔子提取物（IC50,1.95mg/mL）以及二者复合使用（IC50,4.84mg/mL）对鸦片受体的抑制作用显著。结论 ：该复合配方能显著增加小鼠的小肠推进,缩短便秘小鼠排便时间、增加排便次数及便重,具有辅助通便的作用。     

浙贝母内生真菌菌株FTJZZJ09及其抑菌活性成分

根据菌株的形态学特征和ITS序列分析结果,将一株来源于浙贝母新鲜鳞茎的内生真菌菌株FTJZZJ09鉴定为产黄青霉(Penicillium chrysogenum),其在优化后的改良查氏培养基(3g/L麦芽糖,3g/L蛋白胨,0.1g/LK2HPO4,0.05g/LKCl,0.3g/LNaNO3,0.05g/LMgSO4·7H2O,0.001g/LFeSO4·7H2O,pH6.5)中28°C、160r/min振摇培养7d,获得的发酵液具有抑菌活性。利用正相硅胶、SephadexLH-20柱层析以及重结晶等方法,从发酵液乙酸乙酯提取物中分离到3个具有抑菌活性的化合物,利用质谱和核磁共振等技术将其分别鉴定为环(脯氨酸-甘氨酸)、环(脯氨酸-缬氨酸)和2-乙酰基-4(3H)喹唑酮,它们对枯草芽孢杆菌的生长均具有较为明显的抑制作用,MIC分别为0.8、0.8和0.4g/L,但对革兰氏阴性菌的生长无明显的影响。     

NF-κ B激活在兔急性心肌梗死再灌注后无复流中的意义

目的：观察心肌核因子-κB（NF-κB）在急性心肌梗死（AMI）再灌注后无复流的活化情况,探讨NF-κB促进无复流发生发展的作用机制。方法：24只新西兰大白兔随机分为假手术组（冠状动脉只穿线不结扎）和缺血再灌注组（结扎冠状动脉2小时,再灌注1小时）,每组12只。采用凝胶阻滞迁移分析方法（EMSA）检测正常区、缺血区和无复流区心肌组织中NF-κB活性;ELISA法测定不同时点血浆中白细胞介素-6（IL-6）、超敏C反应蛋白（CRP）以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量;光镜、电镜观察心肌组织病理变化。结果：（1）与正常区相比,缺血区和无复流区心肌组织中NF-κB活性异常升高（P〈0.01）。（2）与结扎前相比结扎后2h、再灌注后1h血浆IL-6、CRP、TNF-α水平呈进行性升高（P均〈0.05）。（3）NF-κB的活性与无复流面积、血浆IL-6、CRP以及TNF-α水平呈正相关（分别为r=0.844,P〈0.01;r=0.682,P〈0.05;r=0.687,P〈0.05;r=0.893,P〈0.01）。（4）无复流面积与血浆IL-6、CRP以及TNF-α水平呈正相关（分别为r=0.861,P〈0.01;r=0.806,P〈0.01;r=0.877,P〈0.01）。（5）光镜及电镜结果显示无复流区的心肌组织损伤较缺血区更为严重。结论：急性心肌梗死再灌注后无复流现象的发生可能与局部心肌组织中NF-κB的过度活化有关,活化的NF-κB通过促进IL-6、TNF-α等炎症因子的表达,参与无复流的发生发展过程。     

MiR-31促进人牙髓间充质干细胞增殖和迁移

牙髓炎和根尖周炎是口腔科目前较为常见的2种疾病，现有的治疗方案主要包括根管治疗和牙髓血运重建，能有效控制住炎症进而保存患牙，然而同时也会导致牙髓组织的永久失活，发生结构故障和继发感染。近年来，结合干细胞和生物材料等的组织工程技术使牙髓再生的研究逐渐进入人们的视野，其中从恒牙或乳牙中分离的牙髓间充质干细胞(dental pulp stem cells, DPSCs),因其多向分化和高增殖等特性已成为牙本质或者髓样组织再生的重要的干细胞来源。但是由于干细胞不能高效募集到损伤区域，影响受损区的活细胞数量和存活时间，显著降低了其应用疗效，因此，需要提高牙髓干细胞的迁移和增殖能力，本研究旨在探讨微核糖核酸31(microRNA-31, miR-31)能否有效提高DPSCs的增殖迁移能力。通过组织块酶消化法从牙髓组织中成功分离培养了DPSCs,比较了分别取自健康牙与炎症牙的牙髓组织和DPSCs中miR-31水平的差异，利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测的结果显示，与健康牙比较，炎症牙来源的牙髓组织和DPSCs中miR-31表达水平明显降低(P<0.05)。干扰和过表达DPSCs...