对“小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的观察实验”的拓展探索

以"小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的观察实验"为例,从发现疑问、确定拓展方向、设计拓展方案等方面拓展传统验证性实验项目,使其一般验证性实验具有了综合性和设计性的作用,让学生体会到在小实验中发现大问题的乐趣,进一步激发学生参与实验的积极性。     

活性炭对苦荞幼苗根系和叶片生理特性的影响

以山西省主栽苦荞品种‘黑丰1号’温室盆栽幼苗为材料,设置土壤活性炭含量分别为0(CK)、2.5(B2.5)、5.0(B5.0)、7.5(B7.5)、10(B10)g/kg共5个水平,研究土壤中施加活性炭后对苦荞幼苗根系及碳氮代谢、保护酶活性等指标的影响.结果显示:(1)随着活性炭施用比例的增加,苦荞幼苗根系生长指标和根系活力指标均呈先增后减的趋势,根平均直径呈先减后增的趋势,其中B5.0、B7.5处理的幼苗根系总长度、总表面积、总体积、活跃吸收面积、根尖数均显著高于对照,但B10处理的根系发育减弱.(2)随活性炭施用比例的增加,苦荞幼苗叶片蔗糖酶活性变化呈先增后减的趋势,同一处理水平条件下随苦荞的生长而逐渐下降;B2.5、B5.0处理苦荞幼苗叶片蔗糖酶活性和可溶性糖含量均比CK极显著增加,B7.5处理略有提高,B10处理差异不显著.(3)苦荞幼苗叶片谷氨酰胺合成酶(GS)活性随活性炭的增加基本呈上升趋势,而同一处理水平下随苦荞的生长而下降;叶片GS活性在B5.0、B7.5处理时比CK极显著提高,可溶性蛋白质含量在B7.5处理时也显著提高.(4)叶片保护酶SOD、POD、CAT活性随活性炭浓度的升高呈先升后降的变化趋势,而同一处理水平下各时期间变化不大;B2.5处理叶片的SOD、POD和CAT活性比对照显著增强.研究发现,适量施用活性炭(2.5～7.5g/kg)能有效促进苦荞幼苗碳氮代谢和保护酶活性,增强其根系活力.     

槲皮素对UVB辐射HaCaT细胞膜流动性的影响

目的:基于过量UVB照射角质形成细胞HaCaT所致细胞膜流动性变化,探讨植物单体槲皮素(Qu)对细胞光应激的保护机制.方法:体外培养HaCaT细胞,分别加入25μg/mL、50 μg/mL、100 μg/mL的Qu,孵育后更换培养基,以30mJ/cm2 UVB剂量进行照射,Dio荧光探针标记细胞膜,激光共聚焦显微镜下观察其膜流动性的变化.结果:紫外照射组细胞膜流动性扩散系数D及荧光恢复率R最低;50μg/ml药物组荧光恢复率明显优于25μg/mL药物组,100 μg/mL药物组略优于50 μg/mL药物组,与正常组无显著性差异.结论:一定浓度范围内Qu对UVB所致的细胞膜的流动性损伤具有明显的保护作用(P＜0.05),并与剂量成正相关性.     

在拔尖人才教学中开设斑马鱼原位杂交实验探索

为更好地响应教育部"拔尖人才"计划,四川大学生物科学国家级实验教学示范中心在"拔尖人才"教学中,特引进世界第二大模式生物——斑马鱼,设置了"斑马鱼发育相关基因crip2原位杂交实验",新颖的实验内容激发了学生的积极性,培养了学生的创新能力。     

脐血单个核细胞移植对帕金森病的临床疗效研究

目的观察经寰枕间隙侧方穿刺术移植人脐血单个核细胞（hUCB-MNCs）治疗帕金森病（PD）的临床疗效。 方法选取聊城市人民医院神经内科经寰枕间隙侧方穿刺术移植hUCB-MNCs治疗的31例PD患者，于治疗前及治疗后1、3、6、12个月，采用统一帕金森评估量表（UPDRS）第Ⅱ部分、第Ⅲ部分和帕金森非运动症状评价量表（NMSS）、匹兹堡睡眠质量指数量表（PSOI）对患者进行评分，并记录左旋多巴等效剂量（LED）。采用重复测量资料方差分析对治疗前后多个时间点的评分及左旋多巴等效剂量进行比较，两两比较采用Bonferroni检验。 结果（1）与治疗前比较，治疗后3、6、12个月UPDRS Ⅱ评分[（17.75±6.81）分比（13.67±5.62）分、（12.54±4.39）分、（10.41±4.31）分]均降低；治疗后3、6、12个月UPDRS Ⅲ评分[（28.53±14.75）分比（21.65±10.11）分、（19.37±9.26）分、（16.12±7.44）分]亦均降低，差异有统计学意义（P < 0.05）。（2）与治疗前比较，治疗后1、3、6、12个月NMSS评分[（58.94±35.74）分比（50.27±31.06）分、（41.38±28.25）分、（38.42±25.73）分、（36.15±24.56）分]均降低，差异有统计学意义（P < 0.05）。PSOI评分亦有相同变化趋势。（3）与治疗前比较，治疗后6、12个月LED[（629.57±205.33）mg/d比（435.54±160.62）mg/d、（300.71±135.83） mg/ d]下降，差异有统计学意义（P < 0.05）。 结论经寰枕间隙侧方穿刺术移植hUCB-MNCs治疗能改善PD患者的运动及非运动症状，延缓病情的进展。     

生物数据库建立与应用的研究

生物信息学是一门在生命科学的研究中计算机科学与生物学及应用数学等多学科相互交叉而形成的综合性学科。主要介绍了生物信息学数据库的分类和生物信息学数据库的特点及其应用,同时对生物信息学数据库的未来发展作了进一步的展望。     

红球菌低分子量型腈水合酶的异源激活及激活子的结构域功能

腈水合酶激活子具有亚基自身交换伴随子或者金属离子伴随子的功能,能够辅助腈水合酶摄取金属离子,对于腈水合酶的活性表达必不可少。与腈水合酶自身相比,激活子的序列保守性低,研究其激活作用的特点,探索其结构与功能之间的关系,对于理解腈水合酶的成熟机制具有重要意义。将红球菌Rhodococcus rhodochrous J1低分子量型腈水合酶L-NHase分别与4种异源激活子组合共表达,测定异源激活子对L-NHase的激活作用,进一步对激活子进行序列分析和结构模拟,并研究关键结构域的功能。结果表明,4种异源激活子均能激活L-NHase,但激活后L-NHase的比酶活存在差异,激活子A对L-NHase的激活程度最高,激活后的L-NHase比酶活为出发酶的97.79%;激活子G对L-NHase的激活程度最低,激活后的L-NHase比酶活为出发酶的23.94%。激活子E和激活子G具有保守结构域TIGR03889,缺失其中部分序列会使两者的激活作用基本丧失。将激活子G的N端序列替换为激活子E的N端序列,并将激活子E的C端序列添加至激活子G的C端,能够使L-NHase的比酶活提高178.40%。激活子的激活作用具有普遍性和特异性,其保守结构域对激活作用至关重要,同时N端结构域和C端结构域也对激活作用产生重要影响。     

间充质干细胞外泌体对海马星形胶质细胞活化的抑制作用研究

目的探讨间充质干细胞外泌体 (MSC-Exo)对海马星形胶质细胞活化的抑制作用。方法实验通过超速离心法提取脐带MSC-Exo,并使用PKH-26染料标记;MSC-Exo预处理原代海马星形胶质细胞后使用脂多糖 (LPS)诱导细胞活化,并分为对照组、LPS组和LPS+MSC-Exo组,进而行免疫细胞化学检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、C3的表达、免疫印迹实验检测C3、GFAP的蛋白表达,以及酶联免疫吸附测定炎症因子白介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平,分别检测各组细胞的抗原表达、表型变化和炎症反应。统计采用单因素方差分析 (ANOVA)及最小显著性差异法 (LSD)检验。结果实验提取的MSC-Exo符合外泌体的一般生物学特性,且能迁移到星形胶质细胞胞体和突起。海马星形胶质细胞经LPS诱导后,其标记性抗原GFAP (1.47±0.15比0.95±0.17,P < 0.01)、A1型标记物C3 (1.32±0.23比0.87±0.16,P < 0.05)、IL-1β[(282.90±5.13)pg/ mL比 (252.53±5.51)pg/mL,P < 0.05]、TNF-α[(128.26±1.89) pg/ mL比(111.86±2.84)pg/mL,P < 0.01]和IL-6[(180.95±3.16) pg/ mL比(163.95±3.71)pg/mL,P < 0.05]的表达较正常组明显升高;MSC-Exo预处理后,GFAP(0.97±0.16 比1.47±0.15,P < 0.01)、C3 (0.83±0.12比1.32±0.23,P < 0.01)、IL-1β[(262.20±2.64)pg/mL比(282.90±5.13) pg/mL,P < 0.05]和TNF-α[(120.79±0.42)pg/mL比(128.26±1.89)pg/mL,P < 0.05]的表达较LPS组明显降低,IL-6[(187.25±0.64)pg/mL比(180.95±3.16)pg/mL,P > 0.05]的表达未见明显变化。结论 MSC-Exo对海马星形胶质细胞活化具有明显的抑制作用。     

拔尖创新人才分子生物学实验教学的探索与实践

为适应国家和社会的发展,当下高校提倡拔尖创新人才培养机制,培养各学科领域的高层次人才。四川大学生物科学实验教学中心对分子生物学实验教学中实验内容、教学方法和学生评价体系进行改革实践,探索拔尖创新人才的实验教学模式,以期对培养拔尖创新人才的综合素质和创新精神有所帮助。