九州虫草菌丝体多糖Ck1-A的纯化及其性质研究*

九州虫草Cordyceps kyushuensis 菌丝体粗多糖经酶法结合Sevag法除蛋白、H₂O₂法脱色、透析、乙醇分部沉淀得到Ck₁,Ck₁经DE-23柱层析得到多糖Ck₁-A。经紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sepharose 4B柱层析等方法检测确定Ck₁-A为均一组分。苯酚-硫酸法测得Ck₁-A的含糖量为86.1%,硫酸-咔唑法测得Ck₁-A含有微量的葡萄糖醛酸。Sepharose 4B柱层析测得Ck₁-A的分子量为927 kDa。红外光谱和核磁共振氢谱的结果均显示Ck₁-A含有α-型糖苷键。体内实验表明Ck₁-A对小鼠肉瘤S180有明显的抑制作用。     

黄檗（Phellodendron amuranse）叶片总RNA提取方法研究

以黄檗(Phellodendron amuranse Rupr.)叶片为材料,分别利用改进的盐酸胍法、Trizol法、CTAB法提取黄檗叶片总RNA,通过RNA产率、纯度、电泳图谱等分析,确立了1种从黄檗叶片中快速分离总RNA的方法。研究结果表明,改进盐酸胍法所提取的总RNA的A₂₆₀/A₂₈₀为1.928,28S和18S条带清晰谱图完整性好,而且具有产率高、时间短、成本低的特点,所提取的总RNA适用于mRNA分离、cDNA文库的建立、Northern杂交等分析。     

原子力显微镜在植物学研究中的应用

原子力显微镜（AFM）是一种探测样品表面信息的有力工具,它可以在空气和接近样品生理条件下成像,同时也可以在皮牛（pico-Newton,10^-12N）至微牛（micro—Newton,10^-6N）水平上测量力的大小。本文主要介绍了自AFM发明以来,其在植物大分子、细胞器、细胞、叶片等方面的应用,并列举了目前AFM存在的几点不足。     

干旱胁迫下黄檗幼苗cDNA消减文库的构建和分析

以干旱胁迫下的黄檗幼苗cDNA 为tester, 正常生长的黄檗幼苗cDNA为driver, 利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH)构建了干旱胁迫下黄檗幼苗的消减文库并对其进行了EST序列分析。从消减文库中随机挑取20个阳性克隆, 提取质粒进行酶切和PCR鉴定, 显示文库克隆的重组率大于95%, 插入片段大小大部分集中在300~800bp之间。随机挑取816个克隆进行测序, 得到265个基因。将其进行同源性分析, 划分为16类。获得了热激蛋白70、脱水响应蛋白(RD22)、通用胁迫蛋白、金属硫蛋白(MTII), 晚期胚胎丰富蛋白(LEA14)等44种与干旱胁迫相关的基因,它们涉及了植物的渗透调节、信号传递、转录调控、活性氧清除等方面。本研究为抗逆基因克隆和系统研究干旱胁迫下黄檗基因的表达奠定了重要的理论基础。     

九州虫草菌丝体多糖Ck1-A的纯化及其性质研究

九州虫草Cordyceps kyushuensis菌丝体粗多糖经酶法结合Sevag法除蛋白、H2O2法脱色、透析、乙醇分部沉淀得到Ck1,Ck1经DE-23柱层析得到多糖Ck1-A.经紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sepharose 4B柱层析等方法检测确定Ck1-A为均一组分.苯酚-硫酸法测得Ck1-A的含糖量为86.1%,硫酸-咔唑法测得Ck1-A含有微量的葡萄糖醛酸.Sepharose 4B柱层析测得Ck1-A的分子量为927 kDa.红外光谱和核磁共振氢谱的结果均显示Ck1-A含有α-型糖苷键.体内实验表明Ck1-A对小鼠肉瘤S180有明显的抑制作用.     

黄檗(Phellodendron amuranse)叶片总RNA提取方法研究

以黄檗(Phellodendron amuranseRupr.)叶片为材料,分别利用改进的盐酸胍法、Trizol法、CTAB法提取黄檗叶片总RNA,通过RNA产率、纯度、电泳图谱等分析,确立了1种从黄檗叶片中快速分离总RNA的方法。研究结果表明,改进盐酸胍法所提取的总RNA的A260/A280为1.928,28S和18S条带清晰谱图完整性好,而且具有产率高、时间短、成本低的特点,所提取的总RNA适用于mRNA分离、cDNA文库的建立、Northern杂交等分析。     

鲜茶叶中表没食子儿茶素没食子酸酯的高效提取技术研究

采用鲜磨匀浆提取、负压空化混悬组合技术对新鲜老龄茶叶中的没食子酸酯(EGCG)进行了高效提取,并与干燥老龄茶叶的传统提取工艺进行了对比。结果表明：组合工艺的最佳提取条件为新鲜老龄茶叶高温杀青后,再经常温水匀浆萃取,固液比为1:10,匀浆萃取时间为1 min,滤渣再经负压空化混悬固液提取,固液比为1:10,空化时间为15 min,空化提取2次。新鲜老龄茶叶最佳组合工艺的EGCG提取量为502.85 mg,优于传统干燥老龄茶叶工艺。     

原子力显微镜在植物学研究中的应用

原子力显微镜(AFM)是一种探测样品表面信息的有力工具, 它可以在空气和接近样品生理条件下成像, 同时也可以在皮牛(pico-Newton, 10-12 N)至微牛(micro-Newton, 10-6 N)水平上测量力的大小。本文主要介绍了自AFM发明以来, 其在植物大分子、细胞器、细胞、叶片等方面的应用, 并列举了目前 AFM存在的几点不足。     

九州虫草菌丝体多糖Ck１-A的纯化及其性质研究

九州虫草 Cordyceps byushuensis 菌丝体粗多糖经酶法结合 Sevag 法除蛋白、H2O2 法脱色、透析、乙醇分部沉淀得到 Ck1,Ck1 经 DE-23 柱层析得到多糖 Ck1-A。经紫外扫描、聚丙烯酰胺凝胶电泳、Sepharose 4B 柱层析等方法检测确定 Ck1-A 为均一组分。苯酚-硫酸法测得 Ck1-A 的含糖量为 86.1％,硫酸-咔唑法测得 Ck1-A 含有微量的葡萄糖醛酸。Sepharose 4B 柱层析测得 Ck1-A 的分子量为 927 kDa。红外光谱和核磁共振氢谱的结果均显示 Ckl－A 含有a-型糖苷键。体内实验表明 Ck-1A 对小鼠肉瘤 S180 有明显的抑制作用。     

干旱胁迫下黄檗幼苗cDNA消减文库的构建和分析

以干旱胁迫下的黄檗幼苗cDNA 为tester, 正常生长的黄檗幼苗cDNA为driver, 利用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization, SSH)构建了干旱胁迫下黄檗幼苗的消减文库并对其进行了EST序列分析。从消减文库中随机挑取20个阳性克隆, 提取质粒进行酶切和PCR鉴定, 显示文库克隆的重组率大于95%, 插入片段大小大部分集中在300~800bp之间。随机挑取816个克隆进行测序, 得到265个基因。将其进行同源性分析, 划分为16类。获得了热激蛋白70、脱水响应蛋白(RD22)、通用胁迫蛋白、金属硫蛋白(MTII), 晚期胚胎丰富蛋白(LEA14)等44种与干旱胁迫相关的基因,它们涉及了植物的渗透调节、信号传递、转录调控、活性氧清除等方面。本研究为抗逆基因克隆和系统研究干旱胁迫下黄檗基因的表达奠定了重要的理论基础。