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正交设计优化缩叶藓属植物的ISSR-PCR反应体系 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立缩叶藓属(Ptychomitrium)植物ISSR-PCR反应的最佳体系。方法:利用正交设计实验的方法,采用引物562,10号材料Ptychomitrium gardneri为模板对缩叶藓属植物的ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(Mg2+d、NTPs、引物、模板量、Taq酶量)在4个水平上进行体系优化。结果:确定了缩叶藓属(Ptychomitrium)植物ISSR-PCR反应的最佳体系(25μl)为:Mg2+浓度为3.2mmol/L、dNTPs浓度为0.96mmol/L、引物浓度为1.04μmol/L、模板量10ng、Taq酶量1.5U。利用该体系,采用引物564在16个材料中能有效扩增。结论:这一优化体系的建立为以后缩叶藓属植物的ISSR遗传多样性的分析奠定了基础。 相似文献
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东亚砂藓(Rhacomitrum canescens)RNA提取方法的比较和改进 总被引:1,自引:0,他引:1
方法:以东亚砂藓为材料,用CTAB法、热硼酸盐法和改良的SDS/酸酚法提取东亚砂藓总RNA,并采用3种方法进行沉淀,从提取RNA的纯度、完整性、产量、耗时和RT-PCR效果等分析确定适用于东亚砂藓总RNA提取的方法。结果:研究表明:CTAB法提取的RNA 28S rRNA明显缺失,泳道模糊不清,杂质多,热硼酸法和改良的SDS/酸酚法提取RNA 28S rRNA,18S rRNA条带清晰,OD260/OD280都在1.7以上,纯度高,但热硼酸法提取出的RNA有DNA污染,RNA的含量(15.68~35.2μg.g-1)低于SDS/酸酚法提取RNA的含量(46.5~51.9μg.g-1)3种沉淀方法比较认为无水乙醇配合LiCl沉淀RNA节省时间,反转录和RT-PCR效果好。结论:改良的SDS/酸酚法适合东亚砂藓RNA的提取。 相似文献
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中国东北产6种藓类植物的染色体观察 总被引:2,自引:0,他引:2
苔藓植物细胞学研究始于 2 0世纪 [1 ] 。我国有关这方面的研究自 1 988年开始 ,据 1 998年周云龙统计 ,国内学者共报道了 94种苔藓植物的染色体数目 ,其中苔类有 1 6科、1 9属、2 3种 ,5种为首次报道 ;藓类有 2 1科、37属、71种 ,2 7种为首次报道[2 ] 。这些研究为苔藓植物的系统学、生态学、遗传学等提供了直接或间接的资料和证据。1 材料和方法将采集的苔藓植物培养在室内北窗台上。取生长旺盛的茎尖用对二氯苯饱和水溶液预处理 5~ 7h,卡诺固定液 (纯酒精∶冰醋酸 =3∶ 1 )固定 ,95%酒精∶盐酸 ( 1∶ 1 )离析1 0~ 2 0 min后剥离茎尖… 相似文献
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