安徽皇埔山大型真菌区系地理成分分析

为了解安徽皇埔山自然保护区大型真菌区系多样性,对该地区的大型真菌区系地理成分进行了分析.结果表明:该地区共有大型真菌103种,分属于24科48属,其中优势科为Tricholomataceae(14种,占13.59％)、Russulaceae(11种,占10.68％)、Cortinariaceae(10种,占9.71％)和Polyporaceae(10种,占9.71％);优势属为Lactarius(8种,占7.77％)、Psathyrella(6种,占5.83％)、Cortinarius(5种,占4.85％)和Marasmius(5种,占4.85％);从属的区系地理成分上初步划分为世界广布成分(58.33％)、泛热带成分(29.17％)、北温带成分(10.42％)和热带-亚热带成分(2.08％);从种的地理成分上划分为:世界广布种(45种,占43.69％)、热带-亚热带分布种(31种,30.1％)、北温带分布种(24种,23.3％)及欧亚-北美-澳大利亚分布种(3种,2.91％)等分布型;皇埔山大型真菌的区系地理成分主要是以世界广布种为主,其次是热带-亚热带成分和北温带成分.     

3种菊花病毒/类病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的构建与准确性评价

菊花容易受到病毒感染而造成品质下降,目前国内对菊花病毒的检测主要根据外观表现或者定性PCR检测,无法准确判定病毒载量。为构建一种可同时用于检测菊花B病毒(Chrysanthemum virus B,CVB)、番茄不孕病毒(Tomato aspermy virus,TAV)和菊花褪绿斑驳类病毒(Chrysanthemum chloritic mottle viroid,CChMVd)的实时荧光定量RT-PCR检测方法,本研究分别以保守区域作为靶标设计相应的引物探针,通过优化扩增体系中CVB、TAV、CChMVd 3种病毒/类病毒探针浓度、引物浓度、Mg²⁺浓度、dNTPs浓度,摸索扩增程序中反转录时间、退火温度和扩增循环数,构建了一种可同时用于CVB、TAV、CChMVd的3重实时荧光定量RT-PCR检测体系,优化后的扩扩增体系中CVB、TAV和CChMVd的探针浓度分别为100 nmol/L、120 nmol/L和80 nmol/L,引物浓度分别为200 nmol/L、240 nmol/L和160 nmol/L,Mg²⁺浓度为3.0 mmol/L;dNTPs浓度200μmol/L;最适反转录时间为25 min,退火温度为60℃,循环数为40。敏感性实验结果表明,该反应体系对3种病毒/类病毒的敏感性为1.0×¹⁰3拷贝/mL,敏感性好;定量线性范围为1.0×¹⁰3拷贝/mL~1.0×¹⁰10拷贝/mL,线性范围宽;特异性好,对菊花矮化类病毒、烟草花叶病毒和黄瓜花叶病毒核酸检测结果为阴性;对1.0×¹⁰4拷贝/mL的低浓度参考品平行检测10次,定量结果lg值偏差(CV%)为4.81%,重复性好。在南京农业大学"中国菊花种质资源保存中心"基地随机选择菊花20株进行本研究试剂检测,检出6例CVB病毒株和4例TAV病毒株,其病毒载量为2.5×¹⁰4拷贝/mL~5.5×¹⁰7拷贝/mL,随机选择1株CVB病毒株定量PCR,产物进行TA克隆后经测序与NCBI Blast比对,其与MH678704.1的同源性为100%。因此,本研究建立了一种能同时检测CVB、TAV、CChMVd 3种菊花常见病毒/类病毒的灵敏、快速、可定量的检测方法。     

10种植物乙醇提取物对金银花蚜虫的生物活性研究

采用微量滴定法测定了10种植物乙醇提取物对金银花蚜虫的生物活性.结果表明,10种植物乙醇提取物对金银花蚜虫均有一定的驱避活性和毒杀作用.在10 mg/mL的浓度下,臭椿、曼陀罗和桂花的提取物对金银花蚜虫的驱避作用较强,其在12 h的驱避率分别为78.74％、77.54％、75.11％;夏枯草提取物的驱避效果最弱,12 h的驱避率为58.53％.随着处理时间的延长,各植物提取物的驱避效果均呈下降趋势;印楝提取物的毒杀活性最强,72 h后的校正死亡率达68.30％;曼陀罗和苦瓜的作用次之,72 h后的校正死亡率分别为66.41％和63.70％;夏枯草提取物的作用最低,72 h后的校正死亡率仅为26.47％.进一步的毒力分析表明,印楝提取物对金银花蚜虫的毒力较强,24h的Lc.值为11.0836 mg,/mL.     

金银花尺蠖发育起点温度和有效积温的研究

利用光照培养箱,在16、19、22、25、28、31和34℃7个恒温条件下饲养金银花尺蠖Heterolocha jinyinhuaphaga Chu,对其各虫态的发育历期、发育起点温度和有效积温进行了研究。结果表明,该虫在16～34℃的温度范围内均能正常生长发育,但各虫态的发育历期随温度变化而变化,在31℃以下的温度时,发育历期随温度的升高而缩短,超过31℃时,发育速度反而减慢,发育历期则逐渐延长;卵、幼虫、蛹、产卵前期和整个世代的发育起点温度分别为9.42、11.44、5.42、13.98和9.74℃,有效积温分别为122.64、303.15、195.95、39.15和673.03日.度;根据有效积温法则预测该虫在滁州市1年的理论发生代数为3.07代,这与实际发生情况基本相符合。     

青檀叶片内生和附生真菌组成及生态分布

对我国古老特有植物青檀叶片进行内生和附生真菌的研究,以了解青檀叶片内生和附生真菌的组成特点和探讨内生和附生真菌菌群之间的可能联系,为研究真菌资源多样性、植物附生和内生真菌的相互演化关系及真菌与宿主植物协同进化等提供有益参考资料。研究结果表明,从健康的青檀叶片获得可培养内生真菌839株,附生真菌1857株,共计2696株,鉴定其分属于4目,5科,43属。在目的分类水平上,内生和附生真菌均以丛梗孢目Moniliales为优势菌群,分别占90.23%和92.51%;在科的水平上,内生真菌以暗梗孢科Dematiaceae和丛梗孢科Moniliaceae为优势菌群,分别占47.56%和42.67%,附生真菌以丛梗孢科Moniliaceae和暗梗孢科Dematiaceae为优势菌群,分别占67.04%和25.47%;在属的水平上,内生真菌以黑团孢属Periconia和青霉属Penicillium为优势菌群,分别占31.47%和10.73%,附生真菌以小球霉属Glomerularia、膝葡孢属Gonatobotrys和青霉属Penicillium为优势菌群,分别占20.03%、13.95%和12.22%。青檀叶片内生真菌和附生真菌均存在的菌群数量达到23个属,占53.49%。内生真菌特有的属有6个,共分离19株,占0.70%,附生真菌特有的属有14个,共分离120株,占4.45%。内生真菌的Shannon-Wiener index(H')多样性指数(2.44)和Margalef index(R)丰富度指数(2.88)分别小于附生真菌ShannonWiener index(H')多样性指数(2.57)和Margalef index(R)丰富度指数(3.32),但两者的Evenness index(E)均匀度指数几乎相等。青檀叶片内生和附生真菌菌群组成具有较高的相似性,相似性系数达0.70。通过Fisher's exact test分析表明青檀叶片内生和附生真菌菌群组成无明显差异(P=0.072)。     

温度对金银花尺蠖存活和繁殖的影响

在室内7个恒温(16、19、22、25、28、31和34℃)条件下研究了温度对金银花尺蠖Heterolocha jinyinhuaphaga Chu生长发育、存活、成虫寿命及繁殖等生物学特性的影响。结果表明,温度对其有显著的影响,金银花尺蠖各虫态的发育历期随温度升高而明显缩短,当温度继续升高到34℃,发育历期反而延长,各虫态发育历期同温度之间呈抛物线变化;25℃时金银花尺蠖各虫态的存活率最高,均达到90%以上,在高温和低温下,存活率则明显下降;低温条件下,金银花尺蠖的雌性比率大于雄性的比率,随着温度的升高,雌性比率在不断的下降;成虫寿命与温度成负相关,随着温度的升高而缩短;平均单雌产卵量在25℃时最高,为232.34粒,高温和低温下,则明显下降。     

牛蛙神经冲动产生和传导的低温效应

在5℃和15℃温度条件下,用牛蛙(Rana catesbeiana)离体坐骨神经标本测定0、24、48、96、120、144、168、192、216 h 9个时段的动作电位波幅和传导速度.结果表明:两个温度下离体坐骨神经的动作电位幅度在0 h和24 h差异均不显著,0 h时相对高温(15℃)下动作电位传导速度大于相对低温(5℃),24 h时两个温度下动作电位的传导速度差异不显著,相对高温下48 h时坐骨神经的兴奋性为零.相对低温条件下,坐骨神经兴奋性能维持7 d时间.     

安徽琅琊山大型真菌区系多样性

对安徽省琅琊山自然保护区大型真菌区系多样性进行了分析.结果表明该地区共有大型真菌107种,分属于25科56属,其中优势科为多孔菌科Polyporaceae(20种,占18.69％)、口蘑科Tricholomataceae(14种,占13.08％)、丝膜菌科Cortinariaceae(11种,占10.28％)、红菇科Russulaceae(10种,占9.35％),以上4科仅占琅琊山大型真菌总科数的16％,而种数占全部种数的51.4％;优势属有鹅膏属Amanita(8种,占7.48％)、栓菌属Trametes(7种,占6.54％)、乳菇属Lactarius(5种,占4.67％)、小皮伞属Marasmius(5种,占4.67％)、红菇属Russula(5种,占4.67％),共包括30种,占全部种数的28.04％.从属的区系地理成分上可分为:世界性分布成分(66.07％)、泛热带分布成分(19.64％)、北温带分布成分(10.71％)、东亚分布成分(1.79％).琅琊山大型真菌主要是以世界广布成分为主,其次是泛热带成分和北温带成分,这种分布状况可能与该地区的气候、地理和植被等自然条件的特征有着密切的关系.从种的组成上可划分为世界性分布种(70.09％)、温带分布种(14.95％)、热带-亚热带分布种(14.02％)及中国-日本共有种(0.93％)等4个分布类型,表现出一定的热带向温带过渡的区系特征.