利用减法AFLP有效标记小麦中的外源染色体片段

为解决AFLP中样品间共同片段对多态性片段识别的干扰,作者建立了一种“减法AFLP”标记技术,并运用这种技术成功对小麦中的外源染色体片段进行了标记,运用该技术,样品间的共同扩增片段显著减少,在非变性聚丙烯酰胺凝胶上带型差异十分明显。多态性片段很容易分辨,其真实性通过将其中两条成功转换成外源染色体片段特异的SCAR标记得到了验证,减法AFLP标记技术的建立为标记作物中的外源染色体片段提供了一种有效手段。     

一种适于PCR扩增的小麦基因组DNA快速提取法

许多小麦分子生物学研究需要对大量的小麦样品进行PCR检测,因此,建立一种快速提取小麦基因组DNA的方法十分必要。根据国外报道的一种快速提取水稻和玉米基因组DNA的方法,我们对部分提取步骤进行变动后,在小麦上进行了尝试,长度为1．5kb的片段能得到稳定的扩增。该方法样品研磨在1.5ml的离心管内进行,后续操作不用酚、氯仿、CTAB、SDS和巯基乙醇,整个提取过程不需要使用通风橱,操作步骤简单,花费时间少,而且提取的小麦基因组DNA完整性好,量也较可观。一个DNA样品可供50～100次PCR反应使用,适用于小麦遗传多样性、分子标记辅助选择、转基因后代检测以及引物筛选、分子标记定位等多种研究。     

利用减法AFLP有效标记小麦中的外源染色体片段

利用减法AFLP有效标记小麦中的外源染色体片段 柴建芳 吴志明 赵 和 王海波