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1.
该研究以美洲黑杨杂种优良无性系NL895杨(Populus deltoides×Populus euramericana cv.)组培苗叶片和茎段为研究对象,对NL895杨叶片细胞壁蛋白(cell wall proteins,CWPs)和茎段质外体蛋白(apoplastic proteins,APPs)的提取、分离和双向电泳等技术进行了系统研究。结果表明:10g以上叶片、超声波破碎10min、CaCl2法提取的细胞壁蛋白效果较好,经G-6-PDH酶活性检测,提取的细胞壁蛋白胞质污染率较低;真空渗透法提取的茎段质外体蛋白胞质污染率较前者高,但在允许范围之内。TCA/丙酮沉淀法纯化提取的细胞壁蛋白、pH 4~7的24cm胶条、上样量为500μg的双向电泳体系,其蛋白电泳图谱中的斑点多而清晰,斑点数达550多个,是叶片细胞壁蛋白电泳分析较适合的体系;pH 3~10胶条对茎段质外体蛋白的电泳分离效果较好。该研究初步建立了杨树胞外蛋白的提取、分离及2-DE电泳体系,为木本植物胞外蛋白的研究奠定了基础。  相似文献   
2.
目的:研究重组人脑利钠肽联合多巴胺对心肾综合征伴低血压的疗效及对血清NT-proBNP水平的影响。方法:收集2015年4月至2016年4月我院的90例心肾综合征伴低血压患者,按抽签法分为实验组和对照组,每组45例。对照组用多巴胺治疗,实验组在对照组基础上加用重组人脑利钠肽。观察两组治疗疗效,治疗前后血压、心率、心动图指标每搏输出量(SV)、左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末内径(LVEDD),N末端前体脑钠肽(NT-proBNP)、血肌酐(SCr)、胱抑素C(Cys C)水平的变化。结果:治疗后,实验组总有效率为93.33%,显著高于对照组(68.88%,P0.05);SBP、DBP、MAP、SV、LVEF均显著高于对照组(P0.05),HR、血清NT-proBNP、SCr水平显著低于对照组(P0.05);两组LVEDD比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:重组人脑利钠肽联合多巴胺对心肾综合征伴低血压的疗效显著,可缓解心脏负荷,改善心肾功能,降低NT-proBNP水平,提高治疗安全性。  相似文献   
3.
根据植物偏爱密码子优化设计、合成纳豆激酶基因sNK,利用重叠延伸PCR法在其中插入番茄果实特异性表达基因E8的第一内含子构成sNKi基因,通过农杆菌渗透法将这两种基因渗入到烟草NC89叶片中并实现瞬时表达。通过RT-qPCR法将两种基因在烟草叶片中转录水平的表达量进行比较,结果表明两种基因在烟草叶片中均表达,且sNKi基因的表达量显著高于sNK基因;通过纤维蛋白平板法在两种基因的瞬时表达样品中均能检测到纤溶酶活性,表明目的基因在烟草叶片中可正常翻译并表现出溶栓活性,且sNKi基因在翻译水平的表达量显著高于sNK基因。表明内含子对人工合成的纳豆激酶基因的瞬时表达具有显著的促进作用。  相似文献   
4.
摘要 目的:检测腺苷脱氨酶(ADA)及其同工酶在自身免疫病患者血清中的变化,探讨其诊断和病情监测作用。方法:收集70例系统性红斑狼疮(SLE)、114例类风湿性关节炎(RA)、55例强直性脊柱炎(AS)、及其年龄性别对应的健康血清标本。测定血清总ADA(tADA)、ADA1及ADA2活性。ROC曲线分析其诊断价值。结果:与健康对照相比,ADA活性在SLE患者血清中显著升高[tADA:15(12,20)vs 8(7,10)U/L;ADA1:3.5(2,5)vs 3(2,3)U/L;ADA2:11(8,15)vs 6(5,7)U/L;P<0.01)]。与健康对照相比,RA患者血清中tADA和ADA1活性无显著变化(P>0.05),ADA2活性水平升高[8(5.25,10)vs 7(5,9)U/L,P<0.05)];与健康对照相比,AS患者血清中tADA和ADA1活性无显著变化(P>0.05),ADA2活性升高[7(5,9)vs 6(5,7)U/L,P<0.05)]。ROC分析显示tADA及ADA2对SLE具有较好诊断价值(tADA:88.6%特异性、77.1%敏感性;ADA2:92.9%特异性、68.6%敏感性)。ADA活性对RA及AS患者无诊断价值。spearman相关性分析显示,tADA活性与SLE患者疾病活动度有一定正相关性(r=0.303,P=0.011)。结论:血清tADA活性检测可作为SLE辅助诊断和病情监测指标。  相似文献   
5.
目的:克隆玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因(Srt)使其在大肠杆菌XL10-Gold中高效表达,并对重组酶的酶学特性进行研究。方法:利用PCR技术从玫瑰链霉菌中克隆到一段长1 704bp的海藻糖合成酶基因(Srt),构建重组表达质粒pSE380-Srt-treS,将其转化大肠杆菌XL10-Gold中诱导表达,对重组纯酶进行SDS-PAGE分析及酶学特性测定。结果:SDS-PAGE显示在65kDa处有明显单一蛋白条带。该酶可催化麦芽糖和海藻糖之间的可逆反应,海藻糖得率达82%,且含有很低的副产物葡萄糖(5%左右)。最适反应温度和pH分别为30℃、7.5,Cu2+、Zn2+和Tris能明显抑制酶活力。该酶还可催化蔗糖生成一种无龋齿,适合糖尿病患者食用的糖类-海藻酮糖。结论:成功克隆表达了一个海藻糖合成酶基因,该酶转化率高,副产物较少,为工业酶法生产海藻糖奠定基础。  相似文献   
6.
自噬及其在细胞代谢和疾病中的作用   总被引:7,自引:0,他引:7  
自噬是真核细胞中广泛存在的降解/再循环系统. 自噬在氨基酸和激素的调控下对蛋白质等大分子和细胞器进行降解,降解产物可作为新合成蛋白质和细胞器的原料. 作为Ⅱ型程序性细胞死亡,自噬与凋亡相互作用,参与维持机体的自稳态,在生物体正常发育及对某些环境胁迫的响应极为关键. 对自噬在生物体发育、老化以及在肿瘤、神经退行性病变、肌病和抵御微生物侵染中的作用进行了综述.  相似文献   
7.
致胰腺泛黄鸭1型甲肝病毒全基因组分子特征   总被引:3,自引:0,他引:3  
【目的】揭示致胰腺泛黄鸭1型甲肝病毒(duck hepatitis A virus 1,DHAV-1)全基因组的分子特征。【方法】运用RT-PCR技术,扩增出致胰腺泛黄DHAV-1 MPZJ1206株全基因组序列,并与鸭甲肝病毒参考毒株基因组序列进行比对分析。【结果】致胰腺泛黄DHAV-1 MPZJ1206株基因组全长为7703 nt,(G+C)%为43.05%,包含一个大的开放阅读框,编码2249个氨基酸残基的多聚蛋白,基因组结构与其他DHAV-1参考毒株一致。序列比对结果显示,MPZJ1206株全基因组序列与GenBank数据库中DHAV-1参考毒株核苷酸序列同源性在93.5%-99.6%之间,氨基酸同源性在97.9%-99.6%之间,遗传距离均低于7%;分子系统进化分析显示与2011年分离的2株DHAV-1(Du/CH/LGD/111238和Du/CH/LGD/111239)亲缘关系最近。【结论】尽管MPZJ1206毒株感染雏番鸭引起的临床病变与传统DHAV-1差异明显,但其基因组分子特征与传统的DHAV-1毒株相似,病毒致病型的改变可能与其组织嗜性改变相关。  相似文献   
8.
目的观察Wnt/β-catenin信号通路是否在体外以外源性Wnt3a持续作用小鼠胚胎干细胞后被激活,并进一步调控该通路下游基因的表达。方法应用外源性Wnt3a持续作用ES-E14TG2a小鼠胚胎干细胞21d,通过细胞免疫荧光及Western Blotting检测细胞内β-catenin蛋白,以观察该蛋白的胞内积聚情况;同时QRT-PCR检测WNT下游靶标基因的表达量,采用完全随机F检验并用LSD法进行两两比较,来确定经典WNT/β-catenin信号通路是否被激活。结果ES-E14TG2a小鼠胚胎干细胞经Wnt3a连续培养21d后,β-catenin蛋白的细胞荧光明显较强,而对照组中的荧光强度较弱,说明细胞内β-catenin蛋白没有被降解而是在胞内大量积累;Western Blotting检测结果显示Wnt3a连续培养21d后ES-E14TG2a细胞内β-catenin蛋白条带明显比空白对照的蛋白条带粗;ES—E14TG2a细胞经wnt3a培养后Pitx2、Frizzled、Sox17的表达量均持续上升,Pitx2在培养7d、14d、21d分别为4.17±0.20、7.27±0.35、8.59±0.21(F=222.757,P=0.000);Frizzled在培养7d、14d、21d分别为1.01±0.06、2.93±0.22、5.44±0.30(F=302.703,P=0.000);Sox17在培养7d、14d、21d分别为8.45±0.41、18.35±0.17、34.93±0.16(F=7217.083,P=0.000);Oct4培养到7d、14d的表达量持续增加分别为1.22±0.21、1.56±0.04,而连续培养21d后Oct4基因的表达量下降为1.15±0.07(F=8.827,P=0.016)。结论Wnt3a持续作用可激活Wnt/β-catenin信号通路,并调控下游基因的表达。  相似文献   
9.
目的对糖尿病住院患者泌尿道感染病原菌的分布特点及耐药性进行调查,为临床合理用药提供参考。方法对解放军第44医院临床收治的149例糖尿病住院患者尿培养结果进行统计分析。结果149例患者中段尿标本共培养出病原菌162株,感染病原菌以大肠埃希菌居首位(38.9%),其次为肠球菌(15.4%)、凝固酶阴性葡萄球菌(8.0%)及奇异变形杆菌(8.0%)。病原菌对抗菌药物产生了不同程度的耐药性,革兰阴性杆菌对亚胺培南耐药率最低,革兰阳性球菌对万古霉素100%敏感。结论糖尿病住院患者泌尿道感染病原菌构成多样,病原菌对抗菌药物耐药较为严重,临床应根据药敏结果合理选择抗菌药物  相似文献   
10.
在文献检索的基础上,运用样地调查法和踏查法调查野生、人工种植蒙古黄芪的资源分布、生境特点、生长状况,探寻影响蒙古黄芪生长的生态因子,结合中药材产地适宜性分析地理信息系统,区划蒙古黄芪在内蒙古地区的适宜产地.结果表明: 栽培蒙古黄芪生产区域主要分布在武川县、固阳县等15个旗县,其生态特征为海拔高于1000 m,土壤类型为沙土、砂砾土和钙土.野生蒙古黄芪覆盖内蒙古中东部地区,生于向阳处,喜冷凉干燥气候,适宜沙壤土或砂砾土,忌阴湿黏重土壤.应用TCMGIS-Ⅱ分析得到内蒙古境内野生蒙古黄芪生态因子相似系数>95%的生态适宜区为43个县区,面积为94460.30 km2;栽培蒙古黄芪生态适宜区为32个县区,面积为76013.93 km2.  相似文献   
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