新诱变剂甲基丙烯酸环氧丙酯作用的酶谱分析

我们前已报告,甲基丙烯酸环氧丙酯(Glycidyl Methacrylate,GMA)系一强化学诱变剂,能产生很强的遗传毒作用。为了研究其诱变机理,我们在体外系统使GMA与质粒PBR322进行反应,由吸收光谱移动法及其他方法证明了两者发生了以共价键为主要键型的     

烟草头孢霉汞还原酶特性的研究

经检测,抗汞真菌烟草头孢霉(Cephalosporium tabacinum)F2菌株中具有汞五原酶活性。该酶是一种胞内酶,需NADH作为电子供体,催化Hg2+还原成为元素汞(Hgo)。该酶促反应还需硫氢基化合物,反应最适温度为30℃,最适pH范围为7．0-8.0。在25—30℃保温40分钟或在pH7．0保温2小时,酶活力均是稳定的。金属离子Ag+,Co2+,Cu2+,Zn2+,Mn2+和Ni2+在浓变为0．2-1．0mmol／L的范围内,对酶活力有不同程度的抑制作用,一定浓度的乙酸苯汞和铁氰化钾对酶活力也有部分抑制作用。     

棒状杆菌腈水合酶的形成条件

本文研究了棒状杆菌(cORYNEBACTERIUM)ZBB-2l腈水合酶形成的最适条件。在培养基中加入Fe2+、维生素B1和L-谷氨酸等,并以n-丁腈做诱导物,可明显促进该菌腈水合酶的生物合成。ZBB-21菌在选定的培养基中,于28℃培养64小时,其腈水合酶比活力可达83．1u／mg,而酰胺酶的比活力只有1．1u／mg。腈水合酶比活力比以前报道的提高9倍。     

珊瑚色诺卡氏菌No．11降解丙烯腈活力的诱导形成

珊瑚色诺卡氏菌No. 11能利用丙烯腈、正一丁腈、二甲氨基丙腈以及乙酰胺和丙烯酰胺作为生长的碳源和氮源,而其它腈化物如乙腈、苯乙腩、β一β氧二丙腈和2一羟基丙腈只能作为菌生长的氮源。呼吸试验表明,在丙烯肮基顾中,经丙烯腈诱导的适应细胞的耗氧量比未适应细胞高6—7倍。适应细晦对丙烯酰胺或丙烯酸的耗氧虽也比未适应细胞高得多,推坝4这些化合物可能是丙烯脯代谢的中间产物。在其它脯化物中适应细胞的耗氧盈均低于丙烯鹪,由此可见,耗氧量的挝高是由于诱导的皇lli粜。适应细胞述可耐受商浓度的丙烯腈,当丙烯脯浓度高达20,00毫克／升时,耗氧量才有明显降低。     

3-氰基吡啶水合酶产生菌的筛选及其酶形成条件

应用富集培养和梯度底物浓度定向筛选技术,从长期被腈化物污染的土壤中筛选到一株产 3-氰基吡啶水合酶(3-cyanopyridine hydratase)活性较高的马红球菌(Rhodococcus e-qui)SHB-121.研究了该菌3-氰基吡啶水合酶的最适形成条件.在最适条件下,酶的比活力达5.3u/mg干细胞,比在初筛条件下的酶活力提高95倍,而在其细胞内共存的尼克酰胺(烟酰胺)水解酶活力很低.     

3-氰基吡啶水合酶的纯化及性质

马红球菌(Rhodococcus equi)SHB-121胞内3-氰基吡啶水合酶经硫酸铵分级沉淀、DEAE-cellulose DE52和羟基磷灰石柱层析并经过Sephadex G-25处理,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的3-氰基吡啶水合酶,纯化了31倍。该酶由一条肽链组成,其分子量为30kD,等电点为4.1。3-氰基吡啶水合酶能催化3-氰基吡啶水合生成尼克酰胺。酶反应最适pH为8.0,最适温度为30℃。Ag~+、Hg~(2+)、Cu~(2+)及NH_4~+对酶活力有强烈抑制作用。当以3-氰基吡啶为底物时,其K_m为0.1mol/L。NaCN为该酶反竞争性抑制剂,其K_I为5mmol/L。     

腈水合酶转化反应的影响因子

棒状杆菌(corynebactcrium sp.)ZBB-21腈水合酶能高效地将丙烯腈转化为丙烯酰胺,其转化反应的最遣PH为8．0,最适转化反应温度为25℃。反应体系中加入微量的K+、Na+、Mg2+和Fe3+对酶的转化反应有明显的促进作用。过量丙烯腈(浓度为0．3mol／L以上)对酶活性有抑制作用,转化产物丙烯酰胺及其结构类似物丙烯酸是腈水合酶的竞争性抑制剂,其抑制常数K．分别为0．06mol／L和0．70mol,L,游离氰离子(CN-)的存在严重抑制丙烯酰胺的形成(K;=1．25 x 10-3mol／L)。     

弗氏柠檬酸细菌TNT降解酶及其调节

在弗氏柠檬酸细菌(Citrobacter freusdii)TNT降解酶中,同时检出需NAD(P)H的TNT还原酶和需NAP(P)+的TNT脱氢酶。研究了酶形成的时闻过程和辅酶在TNT酶促降解反应中的行为。     

产氢紫色非硫光合细菌的分离与筛选

从不同来源的样品中分离到5株紫色非硫光合细菌,从中筛选出2株产氢量较高的菌株——菌株D和菌株H。对其产氢动力学研究表明,在含有20mmol/L谷氨酸钠和50mmol/L D,L-苹果酸培养基中,两株菌可连续稳定产氢5—8d,其产氢速率分别为10.18和20.61μ/h·mg细胞干重。     

微生物转化丙烯腈生产丙烯酰胺I．菌种筛选及丙烯腈的微生物转化

从长期被睛化物污染的土壤及含腈废水中筛选到9 7株腈化物的同化菌,其中丁腈同化菌ZBB-21休眠细胞显示了很高的丙烯酰胺形成活性,经鉴定该菌为棒状杆菌(Corynebacrerium sp．)。研究了该菌的最适生长条件,及其休眠细胞的最适水合反应条件。在选定条件下,连续反应4.5h,反应液中积累丙烯酰胺达270g／L,并且未检测出丙烯酸的生成。丙烯腈转化率和丙烯酰胺形成选择性均接近100％。