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通过DEAE-纤维素阴离子交换层析、30%~80%(NH3)2SO3盐析、Sepharose CL-6B凝胶过滤层析和Mono Q HR5/5阴离子交换层析,从毁灭枉孢菌培养液中部分纯化出一种能够水解人参皂苷Rb,的β-葡萄糖苷酶F-I。F—I具有较好的pH稳定性和热稳定性,在pH4.0~11.0范围内和55℃以下表现出良好的β-葡萄糖苷酶活性,其最适pH为5.0,最适温度为55℃。EDTA、Cu^2+和Zn^2+对该酶活性有较强的抑制作用。底物专一性分析表明,F—I能高特异性水解人工合成的底物pNPG,还能水解β-葡萄糖苷键连接的二糖如纤维二糖和龙胆二糖,说明此酶为一种β-葡萄糖苷酶。F—I对人参皂苷Rb1表现了较强的水解活性,而对人参皂苷Rb2和Rc的水解活性较低。该酶水解人参皂苷Rb1的路径为Rb1→Rd→F2→C—K。F—I对人参皂苷Rb1的这种高效水解为稀有人参皂苷的工业制备奠定了基础。 相似文献
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