Lowicryl K4M 低温包埋显示甲状腺球蛋白的免疫电镜法

免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体 ,能显示抗原或抗体在细胞微细结构水平的定位 ,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。目前透射电镜观察的样本制备中 ,为保存良好超微结构的需要一般采用戊二醛、锇酸两种固定液 ;为使超薄切片有一定硬度采用的包埋剂如环氧树脂 6 18、 812需高温聚合 ,这些实验条件均可使多种抗原活性减低或丧失。因此 ,探索既能保持超微结构又能保存抗原性的电镜包埋剂及其应用很有必要。已知ＬｏｗｉｃｒｙｌＫ4Ｍ等低温包埋剂系列可能符合以上要求 ,为此我们进行了有关实验。材料和方法1.材料1 1…     

抗HBcAg人源性单链抗体细胞内表达及其抗病毒复制的实验研究

应用人源性抗HBcAg单链抗体细胞内表达技术,探讨抗HBV复制基因治疗的应用价值.应用噬菌体展示和基因重组技术,从HBV感染的外周血淋巴细胞克隆了人源性抗HBcAg单链抗体,并重组至逆转录病毒载体.以人肝癌细胞smmc-7721和PLC/PRF/5为靶细胞进行基因共转染,分别测定实验组细胞上清中的HBsAg和HBeAg,与对照组做比较,观察抗HBcAg单链抗体细胞内表达的抗病毒治疗作用.结果显示,在急性HBV感染的细胞株中,抑制病毒复制效率为49%～61%,在慢性病毒感染细胞,抑制率为41%～54%.实验结果表明,应用单链抗体细胞内表达技术,在抗病毒治疗研究中具有潜在的应用价值.应对HBV的4个开放阅读框架编码产物进行全面的对比研究,以发现抑制效率高、实用价值大的靶基因.     

重庆秀山褐飞虱田间种群动态及其应用

分析23年(1984~2006)重庆市秀山县褐飞虱Nilaparvata lugens(Stal)观测圃与田间的系统调查资料,揭示出该虫年度间和年度内的田间种群发生动态规律。褐飞虱在观测圃条件下,2000年前常是大发生以上,2000年以来发生程度变轻,常是中等偏重以下,但近3年来又有回升的势头,各年均呈比大田发生偏重的趋势。年度间主害期呈推迟的趋势。年度内,稻苗移栽后即可见虫,一直到收获;前期虫量较小,中期增多,后期较大,主害期在后期。观测圃的褐飞虱发生高峰期比大田早5d左右。观测圃虫量在水稻前期与大田相当,中、后期有差异,特别是后期差异较大,是大田的2~10倍。观测圃的天敌种类主要是蜘蛛、黑肩绿肓蝽、螯蜂、隐翅虫和稻红瓢虫;天敌数量在水稻中期和后期分别比大田多30%和40%以上,对褐飞虱有一定的控制作用。还讨论褐飞虱田间种群动态研究在生产上的应用。     

胞外脂酶活力的检测法

介绍一种含一定浓度的橄榄油和Rhodamine B的琼脂平板脂酶检测法。该方法适用于筛选产脂酶的微生物菌种、检测菌体发酵液中脂酶活力以及其它样品中脂酶活力的大小。在该平板上,产脂酶菌体的菌落外围有微红色水解带。脂酶溶液浓度的对数与水解圈直径呈很好的线性关系。与滴定法及比色法相比较,该平板检测法简便、可靠、灵敏。     

乳腺癌p53蛋白过度表达和雌激素受体免疫组化检测及意义

应用免疫组化方法,对３２例乳腺癌组织中肿瘤抑制基因ｐ５３蛋白的表达和雌激素受体的状态分别进行了检测。结果３２例中ｐ５３蛋白阳性１８例,阳性率５６．３％,１８例伴有同侧腋下淋巴结转移者阳性１３例（７２．２％）３而１４例无转移者阳性５例（３５．７％）二组阳性率差异显著（ＰＭＯ．０５）。３２例中雌激素受体阳性１７例,１８例伴转移者阳性８例（４４．４％）;１４例无转移者阳性９例（６４．３％）。结果表明,ｐ５３蛋白的异常表达与乳腺癌的浸润转移有关,结合雌激素受体的检查,可作为临床预后判断一个有价值的标志。     

RNA干扰

RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是一种古老的生物抗病毒机制,能介导序列特异性的mRNA降解,是基因功能研究和蛋白组学的有效工具,在药物靶基因的筛选、抗病毒、肿瘤基因治疗等领域有很好的发展前景。     

用PCR技术对原发性肝癌4号染色体标记的分析

应用聚合酶链反应扩增后变性聚丙烯酞胺凝胶电泳,分析了45例原发性肝癌第4号染色体长臂10个微小卫星多态性基因标记,以探讨等位基因变化与原发性肝癌发生的关系．结果显示,等位基因的杂合型丢失存在于45例中的12例肿瘤组织,10个基因标志中7个出现杂合型丢失,但丢失的频率较低,占杂合型的31-12.9%．结果表明,第4号染色体的等位基因改变与原发性肝癌的发生有关,但特征性不明显,提示原发性肝癌的发生可能是一个多基因变化、多步骤的过程．     

SR-G-AB显示胶原、网状纤维和粘液的复合染色法

在组织细胞的染色中,为了证明双重纤维和粘液物质,通过分别选用和组合的天狼星红(Sirius)苦味酸、Comori和阿尔辛蓝(Alcian blue)醋酸染色试剂,已能够显示鼠肺组织中胶原纤维呈红色,网状纤维呈黑色,粘液物质呈绿蓝色,背景呈黄色。对比清晰,色彩鲜艳,是较为理想的复合染色方法。     

江苏沿江棉区3代棉铃虫对棉花的为害及经济阈值

通过人工接虫为害,研究了3代棉铃虫对蕾铃脱落及结铃的影响,观察了不同年份棉铃虫卵和各龄幼虫的自然存活率及棉花蕾、幼铃的成铃率。结果表明,蕾铃的虫害脱落率对结铃的影响最大,直接通径系数达－0.8917,虫量和蕾铃脱落数主要通过接虫期间的虫害脱落率影响棉花结铃,其间接通径系数分别为－0.8894和-0.891,接虫期间的自然脱落率对结铃的直接和间接通径系数均很小,表明33代棉铃虫为害时棉花4的补偿能力已基本丧失,各龄幼虫的为害量观察表明,1－6龄幼虫的单虫为害当量分别为0.02、0.14、0.31、0.47、0.84和1.54个大铃,根据防治的直接和间接收益,得出3代棉铃虫的防治指标为百株累计卵量26粒。