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胎儿肺脏来源间充质干细胞的鉴定与损伤修复的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :为研究胎儿肺脏来源间充质干细胞的生物学性状 ,表型和多向分化能力。方法 :取胎龄为 4~ 5个月水囊引产胎儿 ,将肺脏细胞在SF(含 2 %FBS)培养基中培养。测定生长曲线、利用流式细胞仪对培养细胞进行表型测定 ,细胞周期分析 ,体外诱导分化实验。NOD SCID鼠放射损伤后 ,尾静脉输入经PKH2 6染色的间充质干细胞 ,两个月后检测外源细胞在肺脏的定植情况。结果 :从胎儿肺脏可培养出间充质干细胞 ,并可诱导成骨、软骨和脂肪细胞分化 ;移植两个月后可以检测到外源细胞在肺脏的定植。结论 :从胎儿肺脏可分离培养出间充质干细胞 ,在体外有效扩增且保持其低分化状态 ;间充质干细胞可以在肺脏长时间定植。 相似文献
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采用硝普钠为NO供体,造成大鼠胰岛β细胞RIN-m的损伤,通过检测细胞活力、细胞内丙二醛(MAD)含量、总谷胱甘肽(GSH)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活性,探讨石参总黄酮的保护作用和机制。结果显示,石参总黄酮能明显提高损伤细胞的活力,降低细胞内MDA的含量、提高总GSH含量和SOD活力,表明石参总黄酮对NO所致RIN-m细胞的损伤具有保护作用,其机制可能与提高细胞内GSH含量与SOD活力有关。 相似文献
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臭氧胁迫对大豆叶片抗坏血酸-谷胱甘肽循环的影响 总被引:4,自引:1,他引:3
由于城市化的加剧导致近地面臭氧(O3)浓度日益增加,对植物生长和生态系统的功能产生了显著影响,因此准确评估近地层O3浓度升高对植物的影响具有重要意义。本文利用开顶式气室(OTCs),系统探讨了模拟O3胁迫下大豆抗氧化系统抗坏血酸(AsA)-谷胱甘肽(GSH)循环清除活性氧(ROS)的机制及其对植株生长发育的影响。结果表明,在整个生育期内,与对照相比, 80?10 nL?L-1和110?10 nL?L-1 O3可以使大豆叶片丙二醛(MDA)含量、相对电导率增大,超氧阴离子(O2 )产生速率、过氧化氢(H2O2)含量升高,超氧化物歧化酶(SOD)活性减弱; AsA-GSH循环中的AsA、GSH含量减少,脱氢抗坏血酸(DHA)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量增加,过氧化物酶(APX)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性呈现出前期增强后期减弱趋势,而脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性呈现出增强-减弱-增强的趋势。以上结果说明,O3浓度升高促进了大豆叶片ROS的代谢速率,降低了AsA-GSH循环效率,表明抗氧化系统不能长时间忍受高浓度O3带来的氧化伤害,从而使膜脂过氧化程度加重,对大豆表现为伤害效应。 相似文献
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O3浓度升高和UV-B辐射增强对大豆叶片叶绿素含量和活性氧代谢的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
以大豆栽培品种铁丰29为试验材料,利用开顶式气室研究O3浓度升高和UV-B辐射增强复合胁迫对大豆叶片叶绿素(Chl)含量、膜脂过氧化程度、活性氧产生速率、抗氧化酶活性和籽粒产量的影响.结果表明:在大豆整个生育期内,与对照相比,O3和UV-B单一胁迫及其复合胁迫下的大豆叶片Chl(a+b)、Chl a和Chl b含量均呈下降趋势;相对电导率、丙二醛含量增大,活性氧产生速率和H2O2含量增加,超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性下降,产量降低.O2和UV-B复合胁迫加剧了大豆叶片膜脂过氧化程度,促进大豆体内活性氧自由基的产生,使大豆抗氧化能力减弱,叶绿素含量降低,对大豆表现为协同效应.O3胁迫对大豆叶片的影响与复合胁迫更相近,其原因可能是在复合胁迫中臭氧起主要作用. 相似文献
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摘要 目的:探讨在上皮性卵巢癌中TFA2A对hTERT表达的调节和作用机制。方法:采用免疫组织化学方法检测TFAP2A和hTERT蛋白在卵巢正常、交界及上皮性卵巢癌组织中的表达,采用Western Blot和qRT-PCR技术检测hTERT在敲减TFAP2A基因的SKOV3、CAOV3细胞中的表达水平、检测hTERT在过表达TFAP2A基因的HO8910细胞中的表达水平。在干扰TFAP2A的CAOV3细胞中或过表达TFAP2A的HO8910细胞中分别加入PI3K/AKT信号通路激动剂740-YP或抑制剂LY294002,检测相关蛋白表达变化,探讨TFAP2A、hTERT与PI3K/AKT信号通路的关系。结果:TFAP2A在71.88%的上皮性卵巢癌组织中呈高表达,hTERT在78.12%的上皮性卵巢癌组织中呈高表达; 将hTERT 和TFAP2A的免疫组化评分行Pearson相关性分析,两者间相关系数r=0.78,P<0.001。Western Blot和qRT-PCR的结果均显示,在SKOV3和CAOV3卵巢癌细胞中,敲减TFAP2A后,hTERT的表达均明显下降,而在HO8910卵巢癌细胞中,增强TFAP2A基因表达后,hTERT的表达均明显上升。在CAOV3和HO8910处理细胞中,分别使用PI3K/AKT信号通路激动剂740-YP 或阻滞剂LY294002处理后,Western Blot 检验hTERT和PI3K/AKT通路蛋白的表达,发现激动剂740-YP 或阻滞剂LY294002可以逆转敲减或过表达TFAP2A引发的PI3K/AKT通路蛋白表达下调或上调,但不能逆转hTERT蛋白表达下调或上调。结论:在卵巢肿瘤组织中,TFAP2A和hTERT在上皮性卵巢癌组织中均呈高表达,且hTERT的表达和TFAP2A成正相关,在上皮性卵巢癌细胞中TFAP2A可调节hTERT的表达,且TFAP2A对hTERT的表达的调节不经由PI3K/AKT通路。 相似文献
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体外实验业已证明shh基因的启动子受HNF3β蛋白直接调控。为研究斑马鱼shh启动子在体内的作用模式,构建了由538bp斑马鱼shh启动子(包含两个HNF3β结合位点)与绿色荧光蛋白EGFP组成的表达载体,命名为pShh-EGFP。将pShh-EGFP注射到斑马鱼1-细胞期内的受精卵中,定期在倒置荧光显微镜下观察GFP的表达。GFP在原肠作用期就开始表达,主要发生在中轴下胚层中;在体节形成期,GFP在脊索细胞中表达,但未发现在神经底板细胞中表达。由此可见,含两个HNF3β结合区域的538bp的斑马鱼shh启动子具有脊索表达活性。 相似文献
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作为一个胞内蛋白激酶,PKA在中枢神经系统、眼睛和肢体等形态发生中担任了重要角色,并参与多种细胞行为,但其在肾脏发育中的作用却不十分清楚。以斑马鱼为模式动物,采用原位杂交和冰冻切片技术检测PKA在斑马鱼中的表达情况;通过显微注射反义吗啉环寡核苷酸的方式,抑制内源性PKA的表达;通过免疫荧光技术,检测斑马鱼前肾的微观结构。结果显示:编码斑马鱼PKA催化亚基的prkaa1和编码调节亚基的prkab1b均为母源基因,并且在肾管上皮细胞中有特异性表达;分别抑制内源性prkaa1或prkab1b的表达,胚胎于第3天呈现高比例的心脏水肿(分别为54.4%和77.3%)和体轴弯曲(分别为48.5%和72.6%)以及极低比例的多囊肾表型(5%);进一步检测发现,抑制PKA会导致肾管上皮细胞迁移缺陷,尤其是阻碍肾管多纤毛细胞迁移,继而引起肾管前中部不同程度肿大,并最终导致胚胎死亡。该研究表明,PKA可能通过调控斑马鱼肾管上皮细胞迁移从而在肾脏发育中发挥作用。 相似文献
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菠菜(2n=2x=12)是研究雌雄异株植物性别分化的一种理想材料。本研究利用SRAP (sequence re-lated amplified polymorphism)分子标记方法,采用256对引物组合对菠菜雌、雄基因池进行筛选,后利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳进行检测。结果表明,经过对256对引物组合进行筛选,其中20对引物组合扩增效果较好,共获得47个雌性特异片段和29个雄性特异片段,其多态性达到19.9%;在这20对引物组合中,引物对em11+me14、em10+me10经琼脂糖凝胶电泳验证扩增效果最好,可以扩增出菠菜雄、雌稳定的分子标记。本研究获得的性别特异标记可以用于菠菜幼苗期性别鉴定,同时为菠菜性别相关基因的克隆奠定了基础。 相似文献
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收集rhbFGF工程菌菌体,包涵体纯化后经凝胶过滤柱复性,所得复性后bFGF通过肝素亲和柱纯化并测活。各种复性方案中复性后bFGF比活最高为2.5×105U/mg,得率最高为74%。复性液中的变性剂浓度及是否含有还原剂,柱流速及柱体积都会影响复性后bFGF的得率和活性。 相似文献