外泌体分离与鉴定方法的研究进展

外泌体是一种由细胞分泌的膜性囊泡小体,存在于多种体液、分泌物和排泄物中,形成一种特殊的细胞间信息传递系统或病理表征,其携带的m RNA、mi RNA和蛋白质等生物分子可作为疾病诊断的新型标志物。建立稳定而成熟的外泌体分离与鉴定方法是进行外泌体及其生物医学意义研究的前提。目前的外泌体分离技术包括离心、沉淀、超滤、免疫亲和及微流控等技术。鉴定技术主要基于电子显微形态学、颗粒大小及浓度的纳米示踪、蛋白质免疫印迹、流式细胞术等。现对这些技术进展进行综述,这将有助于研究者结合自身条件选择合适的方法获取外泌体,以开展相关研究。     

饲料蛋白水平对湘华鲮幼鱼生长性能、体成分及血清生化指标的影响

为研究饲料中不同蛋白水平对湘华鲮[Sinilabeo decorus Tungting (Nichols)]幼鱼形体指标、体成分及血清生化指标的影响, 配制蛋白水平为32.57%、37.58%、42.76%、47.83%和52.22%的5种等脂饲料。选取初始质量为(14.40±1.08) g的湘华鲮幼鱼450尾, 随机分成5组, 每组3个重复, 每个重复30尾, 进行为期60d的饲养实验。结果表明: (1)饲料不同蛋白水平对湘华鲮的成活率和饲料系数无显著影响(P>0.05); 蛋白质效率随饲料蛋白水平的升高显著降低(P<0.05); 52.22%蛋白组的增重率和特定生长率均显著低于32.57%和42.76%蛋白组(P<0.05)。(2)随着饲料蛋白水平升高, 湘华鲮肥满度呈降低趋势, 且52.22%蛋白组显著低于其他组(P<0.05); 肝体比呈先降后升的趋势, 且37.58%蛋白组显著低于32.57%、47.83%和52.22%蛋白组(P<0.05); 肠体比呈降低趋势, 且52.22%蛋白组显著低于32.57%蛋白组(P<0.05)。(3)湘华鲮肌肉粗蛋白质含量随着饲料蛋白水平升高而增大, 且52.22%蛋白组显著大于32.57%和37.58%蛋白组(P<0.05), 42.76%蛋白组显著大于32.57%蛋白组(P<0.05); 饲料蛋白水平对全鱼的水分、粗脂肪、粗蛋白质、灰分及肌肉的水分和粗脂肪含量没有显著影响(P>0.05)。(4)肌肉中均检测出17种氨基酸(除色氨酸), 其中52.22%蛋白组的必需氨基酸总和(ΣEAA)、非必需氨基酸总和(ΣNEAA)、鲜味氨基酸总和(ΣDAA)及氨基酸总和(ΣTAA)显著大于32.57%蛋白组(P<0.05)。(5)不同蛋白组间甘油三酯(TG)和极低密度脂蛋白(VLDL)水平均表现为37.58%<32.57%<42.76%<47.83%<52.22%, 且52.22%蛋白组显著高于37.58%蛋白组(P<0.05)。综合生长性能、形体指标、体成分及血清生化指标, 初步认定湘华鲮幼鱼最适蛋白质水平为37.58%—42.76%。通过特定生长率(SGR)和饲料蛋白水平的折线法分析表明, 湘华鲮幼鱼达到最大生长时饲料蛋白质水平为42.91%。