芍药乙烯受体PlETR1基因过表达载体的构建及烟草转化

芍药是乙烯敏感型花卉,乙烯受体感知并传导乙烯信号,在乙烯信号转导途径中发挥重要作用。芍药PlETR1基因cDNA全长序列已分离,为了鉴定芍药PlETR1基因的功能,本研究基于PlETR1基因和表达载体序列,应用Primer Premier 5.0软件设计了一对特异性PCR引物,采用RT-PCR技术扩增出了PlETR1编码区片段,进一步构建了芍药PlETR1基因过表达载体。基于优化的模式植物烟草的组培体系和筛选出的潮霉素抗性浓度,应用农杆菌介导的叶盘法开展了芍药PlETR1基因转化烟草的研究,对转基因抗性烟草植株进行了PCR检测,结果表明HPT基因和芍药PlETR1基因已导入到烟草基因组中,且芍药PlETR1基因转录表达成功,为下一步鉴定芍药PlETR1基因的功能提供科学依据。     

中国陆小粪蝇属新种和一新纪录种(双翅目,小粪蝇科)

记述中国陆小粪蝇属Terrilimosina Rohacek 2种,其中产自广西猫儿山的1新种:羊角陆小粪蝇T.capricornis Su et Liu,sp.nov.和采自辽西的1新纪录种:短陆小粪蝇T.nana Hayashi,1992.新种模式标本和检查标本均保存于沈阳大学.     

菜心中SDS-PAGE向负极泳动的富含苯丙氨酸的蛋白的发现

在提取乙醇酸氧化酶同工酶的过程中, 发现了一种在SDS变性下向负极泳动的富含苯丙氨酸的碱性蛋白.在3次重复实验中, 均可以从SDS-PAGE后的负极缓冲液中获得这种蛋白, 其碱性与酸性氨基酸残基的比例分别高达1.46、1.28和0.89,而苯丙氨酸含量分别高达为60.00%、65.62%和62.30%.其余氨基酸残基的含量则和普通蛋白的相近似.由于该富含苯丙氨酸的碱性蛋白是水溶性的, 碱性氨基酸残基应主要分布在蛋白的表面,而苯丙氨酸则组成一个强疏水内核.     

血管内皮细胞生长因子基因-2578C/A多态性与中国北方汉族人群银屑病易感性的相关性研究

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)基因-2578 C/A单核苷酸多态性位点与中国北方地区银屑病易感性的相关性.方法:随机收集2005年10月至2007年5月在哈尔滨医科大学附属一、二院皮肤科门诊就诊的246例寻常型银屑病患者(实验组)和271名正常对照个体(对照组)的外周静脉血,使用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分析VEGF-2578 C/A多态位点基因型,并进行统计学分析.结果:在实验组中,VEGF-2578 C/A等位基因频率分别为74.80％、25.20％;在正常对照组中,VEGF-2578 C/A等位基因频率分别为76,59％、23.41％,两组VEGF-2578 C/A多态位点基因型的分布差异无统计学意义(P＞0.05).结论:VEGF基因-2578 C/A的多态性与中国北方汉族人群银屑病的易感性无明显相关性.     

17β-雌二醇对剑尾鱼卵黄蛋白原的诱导研究

目的研究17β-雌二醇(E2)暴露对雄性剑尾鱼(Xiphophorus helleri)卵黄蛋白原(vitellogenin,Vtg)诱导作用作为环境风险评价(ERA)的有效生物学标记的可行性。方法以E2诱导的剑尾鱼雄性个体的整体匀浆液为材料,采用Sephacryl S-300凝胶过滤层析柱和QSepharose阴离子交换柱从剑尾鱼体内提纯Vtg。结果确定了被纯化的剑尾鱼Vtg在4%~7.5%Native PAGE电泳中相对分子质量为540×103。4%~7.5%Native PAGE电泳后的凝胶分别利用苏丹黑B进行脂蛋白染色、高碘酸-Schiff试剂进行糖蛋白染色和甲基绿进行磷蛋白染色,表明剑尾鱼Vtg是一种富含糖、脂、磷的蛋白。结论表明雄性剑尾鱼卵黄蛋白原的诱导变化可作为环境风险评价(ERA)的有效生物学标记。     

結晶胰島素的全合成

結晶的牛胰島素已經合成,它的生物活力,結晶形状都与天然胰島素的相同,因而标志着世界上第一个蛋白质的人工合成。在人工合成的A及B鏈分別都能和其对应的天然鏈組合成功并都得到半合成結晶胰島素的基础上,人工合成的A及B鏈組合所得的具有1.25—2.5%胰島素活力的氧化产物,經过两次酸性仲丁醇抽提,比活力上升到天然胰島素50%左右,在含有丙酮及鋅离子的pH6.2的檸檬酸緩冲液中、即得人工合成的牛胰島素結晶。除了用小白鼠惊厥法和兎血糖降低法所测定的生物活力以及其結晶形状均与天然胰島素完全一致以外,人工合成的結晶牛胰島素的电泳,层析行为都与天然胰島素相同,酶水解物的电泳层析双向图譜也与天然牛胰島素的一致。人工合成的結晶牛胰島素能和抗天然牛胰島素血清产生沉淀反应,其在琼脂双扩散皿上所产生的沉淀条紋与天然結晶牛胰島素和該抗血清所产生的条紋汇合。它与豚鼠抗天然胰島素血清中和后,生物活力即丧失,这說明在免疫化学性质上也和天然胰島素相同。     

基于遥感的灌溉耕地制图方法研究进展

准确的灌溉耕地位置分布信息是地球系统科学和气候变化等研究领域的基础, 它关乎我们国家的粮食安全和水资源安全, 对水循环、能量循环研究具有重要的意义。遥感灌溉耕地制图研究主要分为局地研究、区域研究和全球研究三类。目前, 基于遥感的灌溉耕地制图研究大多数都集中在局地尺度上, 其中, 目视解译法和数字图像分类法是在局地尺度研究中最常见的方法; 在区域尺度上, 最常见的手段是使用中等分辨率的卫星图像进行多时段的时间序列分析, 从而实现灌区地图的绘制; 当前全球尺度的灌溉位置分布研究工作, 由于在数据获取方面受到的的客观限制, 使其在灌溉分类结果上存在较大的不确定性。近年来, 国际国内出现了一些灌溉产品, 由于各种原因, 这些灌溉产品存在精度不高、分类不可靠等问题。然而, 由于技术的进步, 数据融合技术、微波遥感技术及大量其他辅助数据在大区域绘制灌溉地图方面提供了更大的可能性。为此, 极有必要系统回顾灌溉耕地识别制图研究的发展历程, 总结当前研究的现状及存在的不足, 为进一步开展灌溉耕地制图方法研究和提高灌溉识别精度提供参考。     

奥美拉唑联合法莫替丁治疗反流性食管炎的临床效果分析

目的：观察并分析奥关拉唑联合法莫替丁治疗反流性食管炎的临床效果。方法：选取2008年5月至2012年5月在本院确诊并治疗的反流性食管炎患者45例,随机平均分为三组。联合用药组（15例）：每日早餐前口服20mg奥关拉唑,睡前口服20mg法莫替丁;奥关拉唑组（15例）：每日口服两次奥美拉唑,每次20mg;法莫替丁组（15例）：每日口服两次法莫替丁,每次20mg。每组的治疗时间均为8周。在内镜指导下观察并比较三组患者的胸痛、反酸和烧心等主要病征的改善情况,综合评价三种治疗方法的临床疗效。结果：联合用药组较其他两组获得的疗效更明显,患者的症状得到较好的改善,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：奥美拉唑联合法莫替丁能够有效地抑制胃酸的分泌,对于反流性食管炎的,临床治疗具有良好的效果。     

菜心和水稻绿叶中不同等电点的乙醇酸氧化酶

The proteins with glycolate oxidase activity from B.parachinensis Bailey and rice( Oryza sativa )green leaves were prepared respectively.From the second protein peak on DEAE\|Cellulose column,two glycolate oxidases,expressed as B.parachinensis Bailey GO Ⅲ(specific activity natove 13 2 U·mg -1 ·min -1 )and rice GOⅢ(specific activity 8 8 U·mg -1 ·min -1 ),could not migrate anywhere in 4%～20% native\|PAGE under a pH8.3 buffer system.GOⅢ's p I was about pH8.3. The protein containing B.parachinensis Bailey GOⅢ showed 67±2,43±2,and 38±2 kD in SDS PAGE,band 43±2 kD was the subunit of B.parachinensis Bailey GOⅢ.From the two proteins above,another group of glycolate oxidases,expressed as B.parachinensis Beiley GOⅠ(specific activity 5 U·mg -1 ·min -1 )and rice GOⅠ(specific activity 1 2 U·mg -1 ·min -1 ),showed only one 43±2 kD band in SDS\|PAGE,and was purified on the Sepharose\|6B column which migrated towards anode in the same native\|PAGE showing the M r about 420 kD,or 460 kD and 260 kD respectively.GOⅠ's p I was smaller than pH8.3.Antibody against B.parachinensis Bailey GOⅠ was prepared and its efficacy was about 1/1600 in ELISA.By native\|PAGE,Western blot and rocket immunoelectrophoresis,the third group of glycolate oxidases,expressed as B.parachinensis Bailey GOⅡ and rice G0Ⅱ,were confirmed in crude protein of green leaves and migrated towards cathode under the same native\|PAGE,so GOⅡ's p I was higher than pH8.3.The M r of B.parachinensis Bailey GOⅡ was about 669 kD determined by native\|PAGE Western blot.Rice GOⅠ,rice GOⅢ and rice GOⅡ showed different quantitation under different physiological conditions.Rice GOⅡ could be induced by glycolate.