人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)基因克隆

粒细胞集落刺激因子G-CSF是能使中性粒细胞系(lineage)造血细胞增殖、分化和活化的一种细胞因子。本课题首先用人胚胎cDNA为模板进行PCR,扩增出G-CSF全长的编码序列。再进行琼脂糖凝胶电泳,胶回收试剂盒回收目的片段,连接PMD18载体,然后转入DH5α感受态细胞中,在LB固体培养基和液体培养基中培养,从LB液体培养基中的菌液提取质粒,最后进行酶切和PCR鉴定。经过电泳检测确定通过PCR成功扩增了G-CSF全长645bp的编码序列,转入感受态细胞后,在固体和液体培养基中均生长良好,酶切和PCR鉴定结果明显。由PCR成功扩增了全长的G-CSF编码序列,经酶切和PCR鉴定,对结果进行分析得知成功完成对G-CSFcDNA的克隆。     

益生菌早期肠内营养对重型颅脑损伤机械通气患者营养状况和炎症因子的影响及呼吸机相关性肺炎的相关因素分析

摘要 目的：探讨益生菌早期肠内营养对重型颅脑损伤（SCCI）机械通气患者营养状况和炎症因子的影响,并分析呼吸机相关性肺炎（VAP）的影响因素。方法：选取我院2021年2月~2022年4月期间收治的SCCI患者102例,根据随机数字表法将患者分为对照组（n=51）和研究组（n=51）,在常规治疗的基础上,对照组给予早期肠内营养支持治疗,研究组给予益生菌结合早期肠内营养支持治疗。对比两组机械通气时间和住院时间、营养状况及炎症因子变化情况,记录两组治疗期间VAP的发生情况。根据是否发生VAP将所有患者分为VAP组和无VAP组,应用单因素及多因素Logistic回归分析SCCI机械通气患者VAP发生的影响因素。结果：研究组的机械通气时间和住院时间短于对照组,VAP发生率低于对照组（P<0.05）。两组治疗后白蛋白（ALB）、转铁蛋白（TF）、血红蛋白（Hb）升高,且研究组高于对照组（P<0.05）。两组治疗后白介素-6（IL-6）、 C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、降钙素原（PCT）下降,且研究组低于对照组（P<0.05）。单因素分析结果显示：VAP发生与年龄、建立人工气道方式、日均吸痰次数、口腔护理次数、日均气道湿化次数、手术次数、合并复合伤、误吸、术前GCS评分、机械通气时间有关（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：年龄≥60岁、术前GCS评分偏高、建立人工气道方式为气管切开、手术次数为2次、日均气道湿化次数<3次、误吸、机械通气时间偏长均是SCCI机械通气患者VAP发生的危险因素（P<0.05）。结论：益生菌早期肠内营养可缩短SCCI患者机械通气时间和住院时间,促进营养状况改善,降低炎症因子水平。同时,SCCI患者术后VAP的发生率较高,年龄、术前GCS评分、建立人工气道方式、手术次数、日均气道湿化次数、误吸、机械通气时间均是SCCI机械通气患者VAP发生的影响因素。