外体和病毒感染

外体(exosome)是源自细胞内体的小囊泡,可由多种哺乳动物细胞分泌释放,其组分包括蛋白质、脂质、mRNA和microRNA,是细胞间"通讯"交互的工具之一。我们以介绍外体的组成和生物发生为基础,综述了近年来其在病毒感染致病中的研究成果,以期为病毒感染致病机理的研究提供新的切入点。     

外泌体miR-338对骨质疏松大鼠骨代谢水平、骨小梁微结构和骨生物力学的影响

摘要 目的：探讨外泌体miR-338对骨质疏松大鼠骨代谢水平、骨小梁微结构和骨生物力的影响。方法：采用健康成年SPF级SD雄性大鼠进行骨髓间充质干细胞（BMSCs）分离。采用双侧卵巢摘除手术方法构建了骨质疏松大鼠模型。采用qRT-PCR法检测miR-338的表达水平;检测大鼠的骨密度,骨小梁微结构和骨生物力学指标。结果：与空白对照组相比,OP模型组、OP+ ExoBMSCs、抑制组和过表达组miR-338的表达水平明显更高（P＜0.05）;抑制组的miR-338的表达水平低于OP模型组、OP+ExoBMSCs和过表达组（P＜0.05）;与空白对照组相比,OP模型组、OP+ ExoBMSCs、抑制组和过表达组OC、PINP、BALP的表达水平明显更低（P＜0.05）;抑制组的OC、PINP、BALP的表达水平明显高于OP模型组、OP+ ExoBMSCs和过表达组（P＜0.05）;与空白对照组相比,OP模型组、OP+ ExoBMSCs、抑制组和过表达组BV/TV、Th.N、Tb.Th、Conn.D水平更低,而Tb.Sp、SMI明显更高（P＜0.05）;抑制组组的BV/TV、Th.N、Tb.Th、Conn.D水平明显高于OP模型组、OP+ ExoBMSCs和过表达组,而Tb.Sp、SMI更低（P＜0.05）;与空白对照组相比,OP模型组、OP+ ExoBMSCs、抑制组和过表达组BMD、最大荷载、最大应力、最大位移、刚度水平更低（P＜0.05）;抑制组的BMD、最大荷载、最大应力、最大位移、刚度水平高于OP模型组、OP+ExoBMSCs和过表达组（P＜0.05）。结论：BMSCs源性的miR-338可影响骨质疏松大鼠骨代谢、骨小梁微结构和骨生物力学状态。     

结直肠癌围术期营养干预对患者术后营养指标、T淋巴细胞亚群及并发症的影响

目的:探讨结直肠癌围术期营养干预对患者术后营养指标、T淋巴细胞亚群及并发症的影响。方法:选取2017年3月～2019年3月期间我院收治的结直肠癌患者103例,根据随机数字表法将患者分为对照组(n=51)和研究组(n=52),对照组给予常规方案干预,研究组给予营养支持方案干预。比较两组围术期指标、营养指标、T淋巴细胞亚群及并发症。结果:研究组患者的排便时间、首次肛门排气时间、住院时间均短于对照组(P0.05)。对照组术后1 d、术后7 d的CD3+、CD4~+、CD4~+/CD8~+均低于入院时,CD8~+则高于入院时(P0.05);研究组术后1 d、术后7 d的CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+呈先降低后升高趋势,CD8~+呈先升高后降低趋势(P0.05);研究组术后1 d、术后7 d的CD3+、CD4~+、CD4~+/CD8~+高于对照组,CD8~+则低于对照组(P0.05)。两组术后1 d、术后7 d血清前清蛋白(PA)、血红蛋白(Hb)、总蛋白(TP)、转铁蛋白(TF)水平均呈先下降后升高趋势(P0.05);研究组术后1 d、术后7 d血清PA、Hb、TP、TF水平均高于对照组(P0.05)。两组并发症发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:结直肠癌围术期给予营养支持方案干预,可有效改善患者营养状态,提高免疫功能,且不增加并发症发生率,具有一定的临床应用价值。     

酿酒酵母的"组学"技术研究进展及其在工程菌株构建中的应用

酿酒酵母是真核模式生物,已被广泛用于 "组学"水平的研究。"组学"技术主要由基因组学、转录组学、蛋白质组学及代谢组学构成。综述了酵母菌"组学"的研究进展,并论述了酵母菌"组学"技术在酵母菌菌株改造中的应用,包括酒类及生物燃料乙醇工业生产菌株的基因工程改造等。     

肝纤维化过程中Toll样受体4在肝脏的表达分布及意义

目的动态观察大鼠肝纤维化过程中Toll样受体4（Toll-like receptor4,TLR4）蛋白在肝脏的表达,探讨TLR4与肝纤维化发生发展的关系。方法以四氯化碳皮下注射复制大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组和模型1周组、2周组、4周组、6周组。常规HE染色和天狼猩红胶原染色观察肝脏病变;检测肝组织羟脯氨酸和血浆内毒素含量;免疫组化和Western blot检测TLR4在肝组织中的表达,检测α-SMA观察活化的肝星状细胞（HSCs）。结果与正常对照组比较,CCl4作用2周时,肝组织羟脯氨酸含量开始明显增多（P〈0.01）;模型组各组血浆内毒素含量呈梯度上升（P〈0.01）,且与肝组织羟脯氨酸含量呈显著正相关关系（P〈0.01）;CCl4作用1周后肝组织TLR4的表达即明显增强（P〈0.01）,4周时和6周时有所下降（与2周组相比,P〈0.05）,但仍高于正常对照组（P〈0.01）。TLR4阳性细胞包括枯否细胞、活化的HSCs及少量的肝细胞和内皮细胞。结论内毒素及其受体TLR4的改变可能在肝纤维化中起重要作用。     

不同干扰背景下农业景观异质性——以巩义市为例

景观异质性包括景观组成和构型的异质性,而人为干扰是形成异质性景观的主要影响因素。以河南省巩义市为例,在以建成区、农田、丘陵和山地为主体的景观中各选取一个4km×4km的样区,采用移动窗口算法,以100、250、500、1000、1250m和1500m为移动窗口半径,借用蔓延度(CONT)和均匀度(SHEI)指数,分析了不同干扰背景下景观异质性的空间变化特征。结果表明:随着移动窗口半径的增大,各景观类型的蔓延度和均匀度指数的最大值逐渐递减,最小值逐渐递增(建成区除外);建成区和农田景观蔓延度指数的平均值均大于丘陵和山地景观,均匀度指数的平均值则相反;4种类型景观的均匀度指数和蔓延度指数都呈显著相关关系,除建成区1000m及以上移动窗口半径外,R2都大于0.9;拟合曲线的β值基本呈递增趋势。文中对于人为干扰强度的差异性和景观异质性的尺度依赖性分析,为构建合理的景观格局提供了理论依据。     

TRB3基因敲除减轻糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化的研究

摘要 目的：探讨TRB3基因敲除对糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化的影响。方法：选择30只TRB3敲除（TRB3-/-）小鼠和30只C57/BL6J小鼠，随机分为4组，包括TRB3基因敲除糖尿病模型组（A组）、TRB3基因敲除正常对照组（B组）、普通对照组（C组）和糖尿病模型组（D组）。正常对照组小鼠喂养标准大鼠饲料，糖尿病模型小鼠使用腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立糖尿病小鼠模型。进行前肢握力测试、悬栅试验、肌肉功能试验，同时测定骨微结构各指标水平、抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平、萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平。结果：A组、B组、D组小鼠前肢握力显著低于C组，其中D组小鼠前肢握力最低（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠悬栅试验倒挂时间显著低于C组，其中D组小鼠悬栅试验倒挂时间最短（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠肌肉功能CSA值显著低于C组，其中D组小鼠肌肉功能CSA值最低（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠骨微结构指标BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th值显著小于C组，其中D组数值最低（P<0.05）；而Tb.Sp和SMI值显著大于C组，其中D组数值最高（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平显著高于C组，其中D组抗I型胶原蛋白和抗III型胶原蛋白水平最高（P<0.05）；A组、B组、D组小鼠萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平显著高于C组，其中D组萎缩基因MuRF1和Atrogin-1水平最高（P<0.05）。结论：TRB3基因敲除可显著减轻糖尿病小鼠中骨骼肌萎缩和纤维化，增加骨强度。     

枯草芽孢杆菌C-D6对辣椒炭疽菌附着胞形成的抑制作用研究

【目的】研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) C-D6菌株对辣椒炭疽菌(Colletotrichum capsici)附着胞形成的抑制作用,探索炭疽病生物防治的新途径。【方法】通过对峙培养测定C-D6菌株的抗菌活性,应用摇瓶培养结合生物测定筛选产生抗菌活性成分的最适培养基,采用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-75凝胶柱层析和阴离子交换层析对抗菌蛋白进行分离纯化,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白分子量。【结果】C-D6菌株在PDA平板上对辣椒炭疽菌显示明显的抑制作用,其YPD培养液能完全抑制该菌的附着胞形成。摇瓶培养的结果显示C-D6菌株产生抗菌活性物质的最适培养基为YPD培养基。C-D6菌株在该培养基中培养14 h后,所形成的活性物质可完全抑制辣椒炭疽菌的附着胞形成。从该菌的YPD培养液中分离获得一个分子量为32 kD,能明显抑制辣椒炭疽菌附着胞形成的抗菌蛋白。【结论】C-D6菌株的生防特征显示该菌株对防治辣椒炭疽菌引起的炭疽病具有潜在的应用价值。     

代谢工程与全基因组重组构建酿酒酵母抗逆高产乙醇菌株

将酿酒酵母海藻糖代谢工程与全基因组重组技术相结合,改良工业酿酒酵母菌株的抗逆性和乙醇发酵性能。对来源于二倍体出发菌株Zd4的两株优良单倍体Z1和Z2菌株进行杂交获得基因组重组菌株Z12,并对Z1和Z2先进行(1)过表达海藻糖-6-磷酸合成酶基因 (TPS1) ,(2)敲除海藻糖水解酶基因 (ATH1), (3)同时过表达 TPS1和敲除ATH1, 经此三种基因工程操作后再进行杂交获得代谢工程菌株的全基因组重组菌株Z12ptps1、Z12 Δath1和Z12pTΔA。与亲株Zd4相比,Z12及结合代谢工程获得的菌株在高糖、高乙醇浓度与高温条件下生长与乙醇发酵性能都有不同程度的改进。对比研究结果表明:在高糖发酵条件下,同时过表达 TPS1和敲除ATH1 的双基因操作工程菌株胞内海藻糖积累、乙醇主发酵速率和乙醇产量相对于亲株的提高幅度要大于只过表达 TPS1,或敲除ATH1 的工程菌。结合了全基因组重组后获得的二倍体工程菌株Z12pTΔA,与原始出发菌株Zd4及重组子Z12相比,主发酵速率分别提高11.4%和6.3%,乙醇产量提高7.0%和4.1%,与其胞内海藻糖含量高于其它菌株、在胁迫条件下具有更强耐逆境能力相一致。结果证明,海藻糖代谢工程与杂交介导的全基因组重组相结合,是提高酿酒酵母抗逆生长与乙醇发酵性能的有效策略与技术途径。     

糖尿病对射血分数保留心力衰竭患者血生化指标、心脏指标及生活质量的影响

摘要 目的：探讨糖尿病（DM）对射血分数保留心力衰竭（HFpEF）患者血生化指标、心脏指标及生活质量的影响。方法：选取2017年1月-2019年5月我院收治的246例HFpEF患者作为研究对象,根据是否并发DM分为DM-HFpEF组（n=98）和NDM-HFpEF组（n=148）,比较两组患者基线资料、血生化指标,采用超声心动图检测心功能参数,采用明尼苏达心力衰竭生活质量调查表（MLHFQ）评价患者的生活质量。结果：两组患者体重、收缩压、合并冠心病比例、合并高血压比例相比较,差异有统计学意义（P＜0.05);与NDM-HFpEF组患者相比,DM-HFpEF组患者白细胞计数（WBC）、中性粒细胞计数（N）、血肌酐（Scr）、甘油三酯（TG）、空腹血糖（FBG）、餐后两小时血糖（2hPBG）、K⁺水平升高,血红蛋白（Hb）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平降低（P＜0.05);DM- HFpEF组舒张末期左心室容积指数（LVEDVI）低于NDM-HFpEF组患者,室间隔厚度(IVS)、左心室后壁厚度（PWTD）、E峰、E/e''高于NDM-HFpEF组患者,差异有统计学意义（P＜0.05);DM- HFpEF组患者MLHFQ中体力限制、社会限制、情绪、经济维度评分及总分高于NDM-HFpEF组患者,差异有统计学意义（P＜0.05)。结论：DM促进了HFpEF患者IVS、PWTD的增厚,降低了心脏舒张功能和患者的生活质量,且明显加重了HFpEF患者血糖血脂的代谢紊乱。