流式细胞术在水体微型生物研究中的应用

综述了流式细胞术（flow cytometry)在水体微型生物研究中的应用。包括微型生物的识别、记数和生物量研究,微型生物的细胞周期分析以及生态与生理学研究。讨论了FCM在淡水微型生物和环境生物学中的应用。FCM技术与食品的改进将促进水体微型生物的研究,从而有助于对水生生态系统的深入认识。     

流式细胞术在水体微型生物分子生物学研究中的应用

流式细胞术(FCM)是利用流式细胞仪对微小生物颗粒物的多种物理、生物学特性进行定量,并对特定细胞群体进行分选的分析测量技术。流式细胞仪是当代激光、流体力学、光学和电子计算机等学科技术高度发展的产物,是生命科学研究领域中先进的仪器之一。FCM最早应用于海洋生物学是在80年代中期,特别是1988年发现原绿球藻后[1],FCM成为研究水生微型生物(包括超微型生物)的重要手段。近年来,该领域的有关研究已成为海洋生命科学的研究热点,并从最初区分、记数不同微型浮游植物种群,发展到现在DNA分析和以荧光分子探针为辅助手段的系统发育分析…     

热带假丝酵母脂肪醛脱氢酶基因CtAld1和CtAld2的功能评价

【目的】热带假丝酵母是发酵法生产二元酸的重要工业菌株,具有较高的ω-氧化活性。脂肪醛脱氢酶在ω-氧化途径中起重要作用,催化脂肪醛生成脂肪酸,但其具体催化功能及对细胞生理影响还未被系统研究。本文通过删除脂肪醛脱氢酶基因CtAld1和CtAld2鉴定了其在ω-氧化途径中的功能。【方法】通过基因组信息挖掘获得热带假丝酵母脂肪醛脱氢酶基因CtAld1和CtAld2序列,在此基础上,通过同源重组敲除CtAld1和CtAld2基因。考察突变株的生长和胞内脂肪醛脱氢酶活性变化,并评价CtAld1和CtAld2基因敲除对细胞二元酸合成能力的影响。【结果】分别获得了热带假丝酵母突变株XZX-1(ΔCtAld1/ΔCtAld1)、XZX-2(ΔCtAld2/ΔCtAld2)和XZX-12(ΔCtAld1/ΔCtAld1,ΔCtAld2/ΔCtAld2)。在以十二烷为唯一碳源的培养基中,敲除CtAld2基因显著抑制细胞的生长,胞内脂肪醛脱氢酶活性降低为出发菌株的30%;敲除CtAld1基因尽管会使细胞损失一部分醛脱氢酶活性,但能够一定程度地提升细胞在十二烷中的生长性能。敲除CtAld1或CtAld2会降低菌株二元酸产量,组合敲除CtAld1和CtAld2严重削弱菌株十二碳二元酸的合成能力。【结论】CtAld2对热带假丝酵母细胞的生长和十二碳二元酸的合成具有重要作用,缺失CtAld1或CtAld2基因降低细胞的二元酸合成能力。CtAld1和CtAld2可作为热带假丝酵母ω-氧化途径代谢工程改造的潜在靶点。     

光照和营养盐磷对微型及微微型浮游植物生长的影响

2004年9月,在长江口及邻近水域通过在培养水体中添加不同量的磷酸盐和改变光照强度进行现场受控培养实验,对光照和营养盐磷耦合培养作用下浮游植物生长及对磷营养盐的吸收变化进行了研究,结果表明：高光照条件下（100﹪自然光照）,磷酸盐浓度在高磷水平（0.60μmol/L）培养水体中下降速率明显比中磷（0.41μmol/L）、低磷水平（0.25μmol/L）快,浮游植物生长存在着显著的磷限制性,微型浮游植物（nanophytoplankton,简称Nano,2～20μm）在高磷水平下的生长明显得到促进,聚球藻（Synechococcus sp.,简称Syn,＜2μm）密度在培养初期有小幅度增加,而微微型真核浮游植物（picoeukaryote,简称Euk,＜2μm）在低磷水平下生长较快;在低光照条件下（50﹪自然光照）,磷酸盐浓度在高磷水平培养水体中的下降是受到抑制的,Nano和Syn也都更宜在中磷水平培养水体中生长,Euk在高磷水平下的生长也是受到抑制的,且在中磷水平培养水体中,三类浮游植物的生长周期都得到延长;无光照暗环境培养条件下磷酸盐浓度在不同磷水平下始终保持着增加趋势,三类浮游植物也都无法生长,磷酸盐浓度随培养时间呈线性增加趋势,浮游植物细胞密度则呈指数下降趋势,且磷酸盐的添加对其本身的释放速率和浮游植物衰减速率都没有影响.     

miR-21在非小细胞肺癌中的研究进展

肺癌是我国最常见的恶性肿瘤,发病率高且预后差。mi R-21可通过转录后调控机制调节多种与细胞增殖、血管生成和侵袭迁移相关的肿瘤抑制因子的表达,在肿瘤的发生发展及转移中发挥重要作用。mi R-21在非小细胞肺癌中高表达,与非小细胞肺癌细胞增殖、血管生成、侵袭和转移密切相关,是一个潜在的肺癌诊断与转移的分子靶标。     

花椰菜幼苗下胚轴诱导再生植株

植物名称:花椰菜(Brassica oleracea varbotrytis)80天结球栽培品种。材料类别:无菌苗下胚轴。无菌苗培养:种子经70％酒精浸泡30秒钟后,转移到0.1％昇汞溶液灭菌20分钟,再用无菌水冲洗三次,接种于MS培养基上。培养温度为25—28℃;光强为散射光,约100 lux;每天照光12小时。培养8—10天时幼苗高约3—4厘米,子叶绿色,于无菌条件下先切除胚根、子叶和茎生长点。再把下胚轴切成约1厘米左右长的切段作为外植体进行诱导培养。     

流式细胞仪在微型浮游植物生态学中的应用

微型浮游植物是水域生态系统中的初级生产者 ,是海洋生态系统存在的基础。习惯上浮游植物根据其粒径大小有分为小型浮游植物 (ｍｉｃｒｏ - ｐｈｙｔｏｐｌａｎｋｔｏｎ ,>2 0ｕｍ) ,微型浮游植物 (ｎａｎｏ - ｐｈｙｔｏｐｌａｎｋ ｔｏｎ ,<2 0ｕｍ ,>2ｕｍ )和超微型浮游植物( ｐｉｃｏ - ｐｈｙｔｏｐｌａｎｋｔｏｎ ,<2ｕｍ )三类[13 ] 。本文将后两类统称为微型浮游植物。在早期的多数研究中 ,检测技术和方法落后 :譬如测定水域中的生物量和叶绿素ａ含量常用的拖网方法 ,几乎丢失了所有的微型浮游植物 ;即使是实验室内常用 0 .45ｕｍ…     

化学发光法测定葡萄糖

葡萄糖在葡萄糖氧化酶作用下氧化生成葡萄糖酸和过氧化氢,用化学发光法可以测定生成的过氧化氢,从而知道葡萄糖的含量。本法所需样品量少,快速方便,灵敏度较比色法高,适用于大量样品的分析,如血糖,也可用于测定葡萄糖氧化酶、过氧化物酶、过氧化氢以及金属离子等。测定方法包括葡萄糖的氧化和发光强度的测量两个步骤。     

应用化学发光法测定过氧化物酶的活性

在氧化还原反应的化学过程中产生的化学能激发了受激分子因而发光的现象称为化学发光。鲁米诺(luminol,3-胺基苯二甲酰肼)是常用的化学发