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γ-谷氨酰转肽酶活性电泳染色新方法 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:建立一种新的电泳活性染色方法,以快速地对活性电泳中γ-谷氨酰转肽酶(GGT)进行显色,从而准确鉴定和定位该酶,并可用于该酶的电泳法纯化制备。方法:低温下,样品活性电泳结束后立即将浸有γ-L-谷氨酰-α-萘氨和双甘肽混合底物溶液的滤纸贴在胶面上反应5min,然后再用浸有对氨基苯磺酸和亚硝酸钠混合显色液的滤纸覆盖在基质滤纸上显色。结果:在滤纸上很快显示出一条红色条带,经切胶酶促反应检验确定为GGT,经电泳法和高效液相色谱法确定GGT达到了电泳纯。结论:该法快速、灵敏、简单、直观,为GGT的鉴定和纯化提供了一条新思路。 相似文献
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染料木素是表皮生长因子受体酪氨酸激酶结构域(EGFR-TK)高度特异的非竞争性抑制剂.本研究采用AUTODOCK3.05分子对接软件包对EGFR-TK与染料木素进行了模拟对接研究,探究了二者的相互作用机制,为染料木素的抗肿瘤机制提供理论依据.对接结果表明,染料木素结合在EGFR-TK的活性腔中,与EGFR-TK发生了强烈的相互作用,结合自由能△G为-31.2 kJ/mol;染料木素通过干扰TK催化活性结构中Lys721/Glu738离子对的形成而抑制了EGFR-TK的活性,属于非竞争性结合和抑制作用;在结合中,疏水力和氢键发挥了重要作用. 相似文献
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本研究首次发现冬虫夏草发酵菌丝体含有较高活力的γ-谷氨酰转肽酶(简称CSGT),并且通过硫酸铵分级沉淀、疏水层析、凝胶过滤层析、阴离子交换层析和制备电泳的提取纯化程序,将CSGT纯化了2300倍,然后对CSGT的基本酶学性质进行了研究。CSGT的稳定pH范围和温度范围分别为pH8-11和0-20℃, 当pH 9-10 、30℃并且以L-谷氨酸-对-硝基苯胺(简称GpNA)和双甘肽为底物时CSGT的活力达到最大值。几种还原剂均能激活CSGT,说明其活性中心含有巯基。Zn2+, Cu2+, Hg2+ , Mn2+ 等金属离子均强烈抑制CSGT活性,而K+, Ca2+, Mg2+ 和Na+等对CSGT活性没有影响。 相似文献
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