胞外ATP对AlCl3诱导的细胞死亡过程中胞内H2O2和Ca2+水平的影响及其生理机制分析

该实验以烟草悬浮细胞 BY 2 为材料,在烟草悬浮细胞中分别加入0.05、0.10、0.15、0.20 mmol·L^-1AlCl₃,以等体积去离子水处理的悬浮细胞液为对照,并依据前述实验结果选择0.15 mmol·L^-1 AlCl₃,分别添加5 mmol·L^-1 DMTU(H₂O₂ 抑制剂)、20 μmol·L^-1CaCl₂、15 μmol·L^-1 LaCl₃(Ca²⁺通道抑制剂)和50 μmol·L^-1 ATP设计多项处理,分析胞外ATP(eATP)对铝离子(Al³⁺)胁迫引起的植物细胞死亡及其胞内H₂O₂、Ca²⁺的影响,以揭示Al³⁺胁迫下植物调节细胞死亡的可能机制,进一步扩展对eATP功能的认知。结果显示：(1)随着 AlCl₃ 胁迫浓度的提高,细胞死亡水平和胞内H₂O₂水平上升,而胞内Ca²⁺和eATP水平则逐渐降低。(2)外援施加H₂O₂抑制剂 DMTU(二甲基硫脲)和Ca²⁺能够有效缓解AlCl₃诱导的细胞死亡水平的上升;而Ca²⁺通道抑制剂LaCl₃(三氯化镧)则加剧了AlCl₃胁迫下的细胞死亡。(3)在AlCl₃胁迫下对细胞添加外源ATP,能够缓解AlCl₃胁迫下胞内H₂O₂水平上升和Ca²⁺水平下降的同时,并显著降低AlCl₃胁迫导致的细胞死亡。研究表明, Al³⁺以剂量依赖的模式提升细胞死亡和细胞内H₂O₂的水平并降低胞内Ca²⁺和eATP水平,AlCl₃诱导的细胞死亡受到H₂O₂和Ca²⁺水平变化的调节,eATP可以通过调节H₂O₂与Ca²⁺水平缓解AlCl₃诱导的细胞死亡。推测Al³⁺胁迫可能通过抑制钙离子通道而破坏了细胞内H₂O₂和Ca²⁺之间的协同关系,外源ATP对Al³⁺诱导H₂O₂上升的缓解作用可能是由于其提升了细胞的抗氧化能力。     

我国典型湿热地区变质烟用香精中腐败微生物的多样性分析

【背景】烟用香精是卷烟生产中的重要辅料,有些香精,特别是剩余的加料香精在运输和储存等过程中可能污染微生物,引起腐败变质发生。【目的】分析变质烟用香精中腐败微生物的群落多样性,确定引起加料香精变质的主要腐败微生物。【方法】采用稀释平板法,对我国典型湿热地区云南、福建和广西三地变质加料香精样品中的污染细菌、霉菌或酵母进行分离,分析其16S rRNA、ITS或26S rRNA基因序列,并通过反证试验确定引起变质的主要腐败微生物。【结果】所考察3个典型湿热地区变质加料香精存在不同程度的细菌、霉菌或酵母污染,其中细菌污染最为普遍。分离的76株污染细菌分布在2门4纲5目10科15属,细菌的群落多样性比较丰富,其中雷尔氏菌属(Ralstonia)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、肠杆菌属(Enterobacter)及芽孢杆菌属(Bacillus)是优势菌群;9株霉菌分布在子囊菌门(Ascomycota)的3纲6属,每个属分离到1-2株霉菌;42株酵母分布在子囊菌门的6个属,其中毕赤酵母属(Pichia)、细枝钩酵母菌属(Wickerhamomyces)及酵母菌属(Saccharomyces)是优势菌群。云南和福建两地样品的细菌菌群组成明显多于广西,广西样品的霉菌菌群组成以及福建样品的酵母菌群组成均分别多于其余两地。反证试验结果显示,柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、芽孢杆菌属、雷尔氏菌属和毕赤酵母属是引起烟用加料香精变质的主要腐败微生物。【结论】变质加料香精中污染微生物菌群组成及腐败微生物确定的研究将有助于我国湿热地区香精香料中污染微生物的控制和腐败变质的预防。     

蛇伤溃疡的诊治及预防措施

蛇伤溃疡是国内外蛇伤防治领域的一个研究热点,也是临床外科多年来的研究课题.治疗毒蛇咬伤,不仅要抢救生命,还要认真保护肢体的完整及功能.蛇伤后伤口感染或化脓,组织坏死,溃疡久治不愈引起的肢体畸形、残废,目前在国内外还是比较棘手的一大难题.我院经过多年的潜心研究,制成蛇创溃疡散.该药用于治疗376例蛇伤溃疡患者,治愈率达91.5%,总有效率为97.6%[1].由于该药的应用,使我院蛇伤后残肢率明显下降,使许多患者免除了截肢(终身残废)的痛苦.蛇创溃疡散的科研成果已被中国中医药学会、中国中医研究院确认,为此谨就蛇伤溃疡的诊断,治疗和预防等有关问题概述如下.     

iCare眼压计测量小鼠眼压值与真实眼压的相关性研究

目的:通过前房插管技术调节小鼠眼压,研究iCare眼压计测量小鼠眼压值与小鼠真实眼压之间的相关性。方法:取20只12周龄的C57BL/6J小鼠,麻醉后行前房穿刺置管,通过改变BSS液瓶高度调节其眼压。使用iCare眼压计测量其眼压值。采用SPSS软件分析iCare眼压计测量值和小鼠真实眼压之间的相关性。结果:iCare眼压计测量值与真实眼压之间相差较大,较真实眼压低约54%-71%,然而两者之间遵循如下线性回归方程:真实眼压(mmHg)=3.3988×(iCare眼压计测量值)-5.6292,rZ=0.9506,P<0.05。结论:iCare眼压计测量值较小鼠真实眼压低,然而在应用线性回归公式的情况下,iCare眼压计的测量修正值可以反映小鼠实际眼压值。     

精制抗蛇毒血清救治孕妇毒蛇咬伤的临床研究

目的 观察蛇毒毒素（神经毒、血循毒、混合毒）、抗蛇毒血清制品对孕妇和胎儿有影响。方法 对6种不同毒蛇咬伤的12例孕妇,采用精制抗蛇毒血清治疗,配合抗生素、中医中药等。结果 12例患者中治愈10例,占83．3％;好转2例,占16．7％,总有效率达100％。出生后新生儿全部存活,无畸形,发育正常。结论 抗蛇毒血清治疗孕妇毒蛇咬伤有显著疗效,使用过程中无明显的过敏反应,也无流产、早产及胎儿致畸现象。研究表明,胎盘的屏障作用完全可以抵御蛇毒素、抗蛇毒血清制品对胎儿的损害,关键是要尽早使用足量的抗蛇毒血清。     

高糖通过诱导自噬障碍促进心肌细胞H9c2凋亡

目的探讨自噬对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2凋亡的影响。方法 MTT法检测H9c2细胞活力;hoechst33258染色法检测凋亡细胞;Western Blot检测H9c2细胞促凋亡蛋白Bax和自噬相关蛋白(Beclin-1和P62)的表达。各组的OD值和蛋白条带灰度值均采用析因设计的方差分析,各组间差异用单因素ANOVA分析。结果 HG能诱导H9c2细胞活力降低:12、24、48 mmol/L的HG细胞活力分别为Control组(100﹪)的[(79.5±2.23)﹪](t=3.143,P=0.043)、[(54.6±3.08)﹪](t=12.425,P=0.000)和[(37.2±2.59)﹪](t=13.761, P=0.000);与Control组(100﹪)比较,甘露醇等渗对照组的细胞活力值为[(101.0±1.27)﹪](t=0.012,P=0.094)。HG诱导H9c2细胞hoechst33258阳性细胞增加,且能诱导促凋亡蛋白Bax表达增加:与Control组比较,12、24、48 mmol/L的HG处理组凋亡蛋白Bax/β-actin灰度值分别为(1.29±0.25,t=2.32,P=0.045)、(1.42±0.23,t=10.247,P=0.000)和(1.81±0.29,t=16.324,P=0.000)。HG诱导自噬障碍:与Control组比较,自噬相关蛋白Beclin-1/β-actin灰度值分别为(0.82±0.16,t=4.243,P=0.032)、(0.78±0.19,t=11.341,P=0.000)和(0.62±0.11,t=13.455,P=0.000),P62蛋白/β-actin蛋白灰度值分别为(1.29±0.25,t=4.442,P=0.014)、(1.42±0.23,t=13.341,P=0.000)和(1.81±0.29,t=15.851,P=0.000)。自噬诱导剂雷帕霉素可逆转HG诱导的hoechst33258阳性细胞增加,且逆转HG诱导的Bax表达升高:与Control组比较,HG组、HG和雷帕霉素共处理组、雷帕霉素组的Bax/β-actin灰度值分别为(1.51±0.31,t=14.342,P=0.000)、(1.42±0.23,t=9.621,P=0.004)和(1.81±0.12,t=0.172,P=0.124)。结论 HG可促进心肌细胞H9c2凋亡,且能诱导自噬障碍,自噬诱导剂的运用逆转了HG对H9c2细胞的凋亡作用,表明自噬障碍是HG诱导H9c2细胞凋亡的重要机制。     

海马拔毒散治疗蛇伤创口溃烂104例

海马拔毒散是安徽省名老中医魏化民传授的经验方,专门用来治疗创口溃烂长期不愈者.近七年多来,笔者用于治疗毒蛇咬伤后创口溃烂104例,临床疗效满意,现介绍如下.     

毒蛇咬伤的急救治疗和临床观察

毒蛇咬伤是一种危害人类生命的急性损伤 ,如不及时治疗 ,可引起多器官功能障碍或衰竭。 1 984年以来 ,我院先后用糜蛋白酶套式封闭和伤口周围浸润性注射。配合抗生素、激素、疏通微循环等药物 ,治疗各种毒蛇咬伤 1 1 2例。现将结果报告如下。1　临床资料1 .1　一般资料　本组 1 1 2例中 ,男 73例 ,女 39例 ;成年人 85例 ,少年 2 7例 ;农民 93例 ,其他职业 1 9例。 (1 )咬伤月份 :6月 2 1例 ,7月 32例 ,8月 33例 ,9月 2 6例。 (2 )咬伤部位 :手部 41例 ,足部 67例 ,头部 3例 ,外阴部 1例。 (3)咬伤时间 :白天 55例 ,晚上 57例。 (4)咬伤距就…     

带教学生重在引导

中国医药学是一个伟大的宝库,也是中华民族的宝贵财富。它历史悠久,内容丰富,是劳动人民长期同疾病作斗争的智慧和结晶,值得继承发扬壮大。在党和政府的关怀下,中医药事业蓬勃发展。在现代,对中医药学研究的深度和方法上均超过历史任何时期。因此,培养和造就一支医德高尚,精通中医学理论和具有丰富临床经验的高水平中医药队伍,已成为振兴中医事业的当务之急。下面就作者多年来带教学生的体会简述如下。