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1.
木糖的乙醇发酵一直被视为木质纤维原料生物转化产生乙醇的关键因素,休哈塔假丝酵母(Candidashehatae)是木糖发酵性能较好的天然酵母之一。对Candida shehatae HDYXHT-01进行了氦氖激光诱变和NTG诱变,力求选育出发酵木糖产乙醇能力强的菌株。氦氖激光诱变得到的突变株HN-3乙醇产量为17.03g/L,乙醇得率达到0.3393g/g,相比原始菌株提高20.36%。再对HN-3进行NTG诱变,得到的突变株NTG-2乙醇产量为24.20g/L,相比HN-3提高42.10%。进而对NTG-2菌株进行了摇瓶48h连续发酵试验,测得其乙醇产量、木糖利用率、乙醇得率和乙醇产率分别达到24.16g/L,69.26%,0.4360g/g和0.7075g/(L·h)。  相似文献   
2.
木糖醇脱氢酶(xylitol dehydrogenase, XDH)可以氧化木糖醇生成木酮糖,处于木糖代谢的节点位置。利用PCR方法克隆得到了休哈塔假丝酵母(Candida shehatae) 20335的木糖醇脱氢酶基因、质粒pKT0150的ADH1终止子序列和G418抗性基因(KanR),以及酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) W5特定的2.2 kb的rDNA片段。以酿酒酵母整合载体p406ADH1为骨架,利用基因工程手段构建一个多拷贝整合表达载体pLX-AGRX。将重组载体pLX-AGRX线性化转入到酿酒酵母W5后,通过高浓度G418筛选和PCR双重鉴定,证实重组载体pLX-AGRX已整合到酿酒酵母W5基因组上,测定木糖醇脱氢酶酶活可达65.957 4 U/mg。  相似文献   
3.
大肠杆菌合成1,2,4-丁三醇的途径优化   总被引:1,自引:0,他引:1  
1,2,4-丁三醇(BT)是一种在工业中有多种用途的重要的非天然化合物。文中通过将外源基因xdh和mdlC导入大肠杆菌BW25113表达,并敲除了xylA、xylB、yagE、yjhH、yiaE和ycdW等木糖和中间产物代谢旁路基因,构建了能够将D-木糖转化为BT的重组菌株。为优化BT合成途径,针对BT合成途径中的限速步骤——3-脱氧-D-甘油-戊酮糖酸的脱羧反应,进行了新酶的筛选和评价,获得了可显著提高反应效率的新的2-酮酸脱羧酶——KivD,并构建了表达该酶的重组菌株BW-025。在此基础上,通过初步条件优化,将BT产量提高至2.38g/L;进一步调节途径中各个酶的表达量,探究了它们对BW-025合成BT的影响,最终获得了BT产量较BW-025提高了48.62%的重组菌株BW-074。  相似文献   
4.
从大庆油田土壤中分离得到1株可降解二苯并噻吩(DBT)的脱硫微生物HDBS-1,对该微生物的种属地位进行了鉴定并通过诱变手段提高了该菌株的脱硫能力。经过形态观察、生理生化特征分析及16S rDNA序列测定发现该微生物为坂崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii),该菌种可以按特异性脱硫途径(简称4S途径)将DBT转化为2-羟基联苯(2-HBP)。利用紫外线(UV)、硫酸二乙酯(DES)和UV+DES对该菌株复合诱变后,得到菌株HDBS-4,其降解DBT生成2-HBP的能力得到了极大的提高,发酵液中2-HBP生成含量(2.574 mg/L)较原始菌株(0.434 mg/L)提高了5.93倍。  相似文献   
5.
休哈塔假丝酵母HDYXHT-01利用木糖生产乙醇的发酵工艺优化   总被引:1,自引:1,他引:0  
采用Plackett-Burman (PB) 方法和中心组合设计 (Ccentral composit design,CCD) 对休哈塔假丝酵母Candida shehataeHDYXHT-01利用木糖发酵生产乙醇的工艺进行优化。PB试验设计与分析结果表明:硫酸铵、磷酸二氢钾、酵母粉和接种量是影响木糖乙醇发酵的4个关键因素,以乙醇产量为响应目标,采用CCD和响应面分析法 (Response surface methodology,RSM),确定了木糖乙醇发酵的最佳工艺为:硫酸铵1.73 g/L、磷酸二氢钾3.56 g/L、酵母粉2.62 g/L和接种量5.66%,其他发酵条件为:木糖80 g/L,MgSO4·7H2O 0.1 g/L,pH 5.0,培养温度30 ℃,装液量100 mL/250 mL,摇床转速140 r/min,发酵时间48 h,在该条件下发酵液中乙醇产量可以达到26.18 g/L,比未优化前提高了1.15倍。  相似文献   
6.
目的探讨Identifiler Plus Kit直接扩增血样的方法,并应用于DNA数据库建设。方法 60份血样分别打孔于8连管中,用56℃ddH2O分别孵育0min、5min、10min、15min,离心弃上清,相应加入Identifiler Plus Kit与Identifiler Direct Kit PCR反应液,电泳并比较检测结果;同一血样按上述方法重复3次,比较检测结果的可重复性;对10000余份血样直接扩增并统计分析其成功率。结果 0min与5min ddH2O孵育的血样Identifiler Plus Kit与Identifiler Direct Kit扩增想比较,分析峰值均衡性及RFU其效果相当;同一份血样检测结果表明具有良好的重复性;对10000余份血样检测完整的遗传图谱成功率98.5%。结论 Identifiler Plus Kit可用于大规模的DNA数据库建设。  相似文献   
7.
Genome shuffling(基因组改组)作为一种新型的菌种选育方法,与常见的育种方法相比,具有快速有效、简单易行和实用性强等特点,近年来不断应用于各种工业微生物菌种的改良研究中。论述了Genome shuf-fling的产生与原理、技术过程及其在酿酒酵母中的应用和发展前景。  相似文献   
8.
陕西南郑、湖南桃源早奥陶世的两种海林檎化石   总被引:1,自引:1,他引:0       下载免费PDF全文
前言海林檎纲(Cystoidea)属棘皮动物门,硬体由腕、萼、茎三部分组成。萼部常保存为化石,其形态呈梨形、椭球形或球形,外表由数目不等和形状不定的萼板缝合而成,其腹面具口、肛门、水孔、生殖孔等构造,成为鉴定特征的主要标志。这类动物化石发现于北美、欧洲、亚洲奥陶纪至泥盆纪地层中,尤以奥陶系最多。我国以前仅在云南、贵州奥陶系中发现,有过正式报道(Reed, 1917; Sun Y.C.,1937)。  相似文献   
9.
使用异源表达系统直接分泌表达具有活性的微生物谷氨酰胺转氨酶(Microbial transglutaminase,MTG)是目前最具前景的MTG生产方法之一,但由于产量较低无法实现工业化生产.毕赤酵母是近年来发展出的高效蛋白表达系统.通过采用pro序列与成熟MTG基因共表达的策略,成功地实现了用重组毕赤酵母分泌表达具有活性的茂原链霉菌Streptomyces mobaraense MTG.进一步通过对pro序列和MTG基因拷贝数以及重组酵母培养条件的优化,最终使得MTG在1L发酵罐中高密度发酵的酶活达到7.3 U/mL,为MTG的工业化生产奠定了基础.  相似文献   
10.
用稀硫酸对玉米芯半纤维素进行水解是一种常用的方法,但是玉米芯半纤维素在水解成木糖等还原糖的同时还产生了糠醛、乙酸和酚类等抑制水解液发酵的毒物。以混合脱毒法为基础,研究活性炭在脱毒过程中的作用。结果表明,有脱毒效果的活性炭种类是GH-13和GH-15,随着活性炭添加量的增大,脱毒效果增强,但木糖损失也随之增多。其中采用5%GH-15时的脱毒效果最佳,该条件下乙酸去除率为24.60%,糠醛去除率达100%,酚类化合物去除效率R280值0.009,而木糖的损失率为23.70%。  相似文献   
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