大豆两个C2H2型转录因子基因序列特征及表达分析

干旱气候已严重影响需水作物大豆的产量,而植物中C2H2型转录因子在应答非生物逆境中起到重要作用,因此充分挖掘优异抗旱大豆种质的基因资源及功能研究,为利用基因工程手段获得抗旱大豆种质奠定理论基础。本研究从大豆叶片中克隆到2个基因,分别命名为GmZAT9-like和GmZAT5-like。序列特征分析表明二者都属于C2H2型转录因子,均包含典型双锌指结构域和EAR保守基序,且氨基酸同源性低于其他物种同源基因。分子进化树分析表明,2个基因分别与拟南芥AtZAT9和ATZAT5基因划分为一类。基于荧光实时定量PCR技术检测到2个基因分别在叶片和根部组织特异性表达。通过半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析大豆幼苗在PEG、SA、ABA、NaCl和4℃胁迫处理条件下2个基因的表达模式。结果表明,在PEG和SA胁迫条件下,叶片中GmZAT9-like基因表达在处理后期有升高趋势,而根部GmZAT5-like基因在处理早期受到诱导表达;ABA胁迫条件下,2个基因均在处理初期呈现表达升高趋势而后下降;盐和冷胁迫条件下,叶片中GmZAT9-like基因表达受到抑制,而根部GmZAT5-like基因表达在冷胁迫处理初期呈现升高趋势。因此推测这两个基因与大豆非生物胁迫响应相关。     

影响一品红再生系统建立的因素

本试验以一品红“旗帜”和“福星”两个品种的茎段和叶片为试验材料,研究了影响建立一品红再生系统的因素。筛选出一品红初代培养的适宜培养基。     

30个枣树种质资源遗传多样性的ISSR分析

取30个枣树品种进行ISSR分子标记分析,其扩增条带分别进行琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,以期获得不同产地品种之间的遗传多态性。从100条选择扩增的ISSR引物中筛选出17条扩增清晰、重复性和稳定性好的引物,选取其中8条扩增条带多态性强的引物进行遗传聚类分析。结果表明：（1）1％琼脂糖凝胶电泳和5％聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增总条带数分别为72和127条,其中多态性条带分别为51条和113条,多态性条带比率（PPB）分别为70．8％和88．9％。（2）基于UPGMA软件对30个品种的遗传差异性分析表明,8个ISSR引物可以将枣树品种之间遗传差异明显区分开来。两种电泳检测方法相比较,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测可获得较为精细的枣树品种间遗传图谱。其遗传相似系数范围在0．56～1．00之间,以0．62为最低遗传相似系数,可将30个枣树品种分成3个大类,6个亚类,为进一步研究枣树品种间分类、起源进化关系和分子辅助育种奠定基础。     

植物激素对褐斑伽蓝叶片分化的影响

首次以景天科多肉植物褐斑伽蓝叶片为外植体进行组织培养.建立植株再生系统后,研究了不同植物激素及其不同浓度配比对叶片分化的影响.试验结果表明:褐斑伽蓝叶片分化方式特殊,初代培养时外植体叶片分化困难,仅在附加6-BA(6-苄基腺嘌呤) 1.5 mg/L、IBA(吲哚丁酸) 0.5 mg/L的MS培养基上分化出绿色球状体.试管苗叶片与外植体叶片分化方式不同,在单独附加6-BA 1.0～2.5 mg/L或(萘乙酸)NAA 0.1～1.0 mg/L,以及6-BA与NAA不同浓度配比的培养基上出现了根、芽及愈伤组织等多种器官分化方式,且分化出的器官生长情况差异很大,可以根据不同的培养目的筛选不同的培养途径和适宜的培养基.     

奇花神药话芦荟

芦荟是百合科芦荟属的多年生肉质多浆植物,叶片肥厚多汁,多披针形,叶缘有齿或刺。圆锥形总状花序,小花筒状,鲜红或橙红色,也偶有白色者。花期４－６月或秋冬至春。芦荟种类繁多,同属植物约３１０种以上,其中２７５种生长在非洲大陆,其它如马达加斯加岛、西印度群岛、加那利群岛、阿拉伯等地也有分布。我国目前引种栽培的芦荟有十多种,一般高不过１米左右。实际上,千姿百态的芦苔家族成员,既有高达２０多米的芦荟树,也有密丛生长的１—２米高的芦荟灌木丛,甚至还有不满５厘米的小型芦荟。叶片也多种多样,既有肥大的,也有细小…     

褐斑伽蓝的组织培养与快速繁殖

1植物名称褐斑伽蓝(Kalanchoe tomentosa). 2材料类别叶片. 3培养条件以MS为基本培养基.诱导无菌培养物培养基:(1)MS 6-BA 1.0 mg·L-1(单位下同) NAA 0.5,(2)MS 6-BA 1.5 IBA 0.5,(3)MS 6-BA1.0 IBA 0.5;继代培养基:(4)MS 6-BA 0.1 NAA0.05.生根培养基:(5)1/2MS IBA 1.0.上述培养基均附加30 g·L-1蔗糖、6 g·L-1琼脂,pH 5.8.培养温度28～30℃,光照时间12 h·d-1,光照度3 000 lx.     

梨果实愈伤组织褐腐病菌侵染过程cDNA-SRAP差异分析

梨果实褐腐病危害果实,可造成果实运输和储藏过程中严重的经济损失。本研究构建了褐腐病菌侵染梨果实愈伤组织离体系统,对梨褐腐病菌侵染其果实愈伤组织不同时期进行细胞学观察分析,基于cDNA-SRAP技术,分析该过程中差异基因表达,以期分离克隆与梨果实抗病反应过程相关的防卫基因。结果表明：与未侵染的梨果实愈伤组织相比,侵染12～60h过程中梨果实褐腐病菌从表面逐渐深入到内部细胞;30个SRAP引物组合共扩增出457条带,其中差异回收条带数为16条,差异比率为3.5%。最终获得5条差异基因表达条带。核酸序列同源性分析表明,其中1条差异基因片段未搜索到任何同源蛋白,2条差异基因片段经序列比对,序列相似度一致,与苹果属的肉桂醇乙酰脱氢酶（CAD）同源性为96%;其他2条差异基因片段分别与DNA结合蛋白（DBP）和寡肽转运蛋白（OPT）基因序列同源,其同源性为85%和78%,因此暂将这3个基因命名为PbCAD、PbDBP和PbOPT。荧光定量PCR结果表明,PbCAD基因在褐腐病菌侵染梨果实愈伤组织12和24h时相对表达量最高,为对照的2.94和2.66倍;PbOPT基因在褐腐病菌侵染梨果实愈伤组织12～36h时相对表达量明显升高,为对照的2.17～2.46倍,而其他时期表达量均与对照接近;PbDBP基因表达量在整个侵染时期均与对照接近。因此我们推测PbCAD和PbOPT基因可能为梨褐腐病菌侵染梨果实愈伤组织响应的相关防卫基因。     

苦荞突变体库构建与突变体中芦丁合成相关基因表达分析

苦荞是重要的小杂粮作物之一,营养物质丰富,是天然芦丁的重要来源。突破苦荞育种难题,创制苦荞新种质是目前研究的重要方面。本试验利用甲基磺酸乙酯(EMS)构建了黑丰1号苦荞突变体库,明确了当EMS浓度为1.2%时,诱变效果较好。通过对M1突变株表型观察统计,共获得叶色、叶型、株型、粒型变异单株102株,突变率为3.85%;高效液相色谱技术(HPLC)测定1000株M3材料,获得高芦丁含量突变株系2个和低芦丁突变体株系5个;qRT-PCR对芦丁含量突变体株系中芦丁代谢关键酶基因(CHS、F3H、4CL、FLS、UFGT)进行表达量分析,发现不同株系中上述基因的表达量与芦丁含量相关性不明显,但个别基因如FtFLS基因表达量在高芦丁含量突变体中达到对照的4.55倍。通过突变体的筛选丰富了苦荞基因资源,创新了苦荞新种质,也为苦荞芦丁代谢的分子基础研究提供了材料保证与技术支持。