拟穴青蟹两种新C-型凝集素基因的克隆与表达分析

为研究拟穴青蟹(Scylla paramamosain)中C-型凝集素(C-lectin)的功能,从其肝胰腺中克隆获得全长858 bp和598 bp的两个C-型凝集素分子,分别命名为Sp-lectin3和Sp-lectin4,其推导的氨基酸序列含有信号肽和一个CRD,其中Sp-lectin4还具有糖类结合的特征性基序"QPD"。Sp-lectin3和Sp-lectin4的开放阅读框分别由5个和4个外显子编码。在正常养殖青蟹的肝胰腺中该两个基因表达量最高,其次是射精管(Sp-lectin3)或肠(Sp-lectin4);除脑和储精囊外的所检测组织/器官中,Sp-lectin4表达量均高于Sp-lectin3。随着胚胎的发育,该两个基因表达量逐渐升高,峰期为溞状幼体,而大眼幼体期的表达量急剧下降,仔蟹期再回升;在胚胎发育阶段除囊胚期外,Sp-lectin4表达量极显著高于Sp-lectin3(P0.01),相反,在胚后发育阶段除大眼幼体II期外,Sp-lectin3表达量却极显著高于Sp-lectin4(P0.01)。副溶血弧菌(Vibrio parahemolyticus)人工感染,可诱导Sp-lectin3在储精囊和射精管中的表达,分别在感染后12h和6h显著上调(P0.05);同时,可诱导Sp-lectin4在肝胰腺中的表达,并在感染后12h和18h显著上调(P0.05)。结果表明,Sp-lectin3和Sp-lectin4可能参与拟穴青蟹的抗细菌感染免疫反应,Sp-lectin3侧重于生殖系统如射精管和储精囊中发挥作用,而Sp-lectin4侧重于在肝胰腺。     

塔玛亚历山大藻藻际细菌溶藻过程

海洋微藻在生长过程中向周围环境分泌多种胞外产物,形成细菌自由生长的藻际环境,藻际细菌对微藻的生长有一定的调控作用。在指数生长期的塔玛亚历山大藻培养液中加入φ为1%的2216E培养基,在加入2216E后16h内藻细胞全部裂解。用数码显微镜记录了藻细胞形态变化,分别用DAPI法和荧光模拟底物法测定了细菌数量、胞外酶活性变化,结果表明:在溶藻过程中细菌数量、胞外酶活性在第6小时到第10小时增加了50～100倍。塔玛亚历山大藻藻际细菌主要分布在藻细胞表面,其群落结构改变和数量剧增是溶藻的主要原因,细菌分泌的β-葡萄糖苷酶和几丁质酶可能在溶藻过程中起重要作用。