交联酶聚集体制备中钙离子的结构调控作用

以葡萄糖氧化酶(GOx)为研究对象,系统地研究了钙离子对交联酶聚集体(CLEA)粒子尺寸和微观结构的调控作用以及酶催化性能和实用性的影响。研究结果表明,GOx酶沉淀过程中引入钙离子可显著降低CLEA粒子尺寸并导致粒子内纳米孔道结构逐步消失。在0.1 mmol/L钙离子浓度下,GOx酶的CLEA仍保有清晰的纳米孔道结构。以葡萄糖为底物的GOx酶CLEA催化结果显示,该CLEA粒子的酶活性为对照CLEA粒子的2.69倍。即便1.0 mmol/L钙离子浓度下制备的CLEA粒子的GOx酶活性仍高出对照CLEA粒子约42%。此外,0.1 mmol/L钙离子浓度下制备的CLEA不仅具有更高的底物转化速率和很好的操作稳定性,而且CLEA中GOx酶的最大反应速度显著提高。这些实验结果明确了钙离子对CLEA粒子尺寸和微观结构的调控作用,为制备具有高效生物催化活性的CLEA粒子奠定了基础。     

基于焦磷酸测序分析技术的金银花掺伪鉴别方法研究

金银花是大宗药材,市场掺伪时有发生,但目前的检测方法不能满足快速准确的检测需求,因此亟需建立快精准的检测方法。为了确立高精准度和大通量的金银花掺伪鉴别检测方法,结合SNP标记及焦磷酸测序分型分析技术,对金银花及其常见伪品差异性SNP位点进行PCR扩增及焦磷酸测序分析。结果发现,运用焦磷酸测序技术对金银花和山银花的差异性SNP位点进行定量分析,能够对金银花真伪及掺伪量进行鉴定。该方法兼有PCR技术的灵敏性和焦磷酸测序技术的准确性,具有重复性好、自动化程度较高、易操作的特点,能在3小时之内完成金银花成分掺伪量的检测工作,并得出量化结果。     

蛋白质色谱的高效化技术

过去30年间,以基因工程和细胞融合技术为代表的现代生物技术的发展让治疗和诊断用蛋白质的规模化生产成为现实.与此同时,蛋白质色谱、膜分离等生物下游核心技术的创新也适应了这种发展.以蛋白质色谱为例,琼脂糖、纤维素和亲水性高分子聚合物等材料被广泛地应用于色谱介质的合成,其孔道结构得到一定的改良;离子交换色谱等技术日趋完善,新型色谱技术(如金属螯合亲和色谱等)不断涌现;色谱的生产效率通过过程集成和外场(如电场、磁场、超重力场等)的引入得以进一步提高.同时,蛋白质色谱也为基因组学、蛋白质组学等组学研究提供了有力的工具.