抗人精子蛋白17磁性纳米探针靶向的卵巢癌体内外磁共振成像

用MRI(magnetic resonance imaging)技术探索连接抗人精子蛋白17单克隆抗体(anti-Sp17 mAb)的磁性纳米探针对体外培养及动物体内Sp17+卵巢癌的靶向性。将anti-Sp17mAb连接到表面包覆壳聚糖的超顺磁性氧化铁纳米颗粒上,制成磁性纳米探针anti-Sp17-MNP,用作MRI阴性对比剂。将磁性纳米探针与Sp17+和Sp17-培养的肿瘤细胞共育,进行一系列体外磁共振成像实验。荷瘤小鼠尾静脉注射磁性纳米颗粒,用7T磁共振仪在体成像,观察肿瘤部位的信号变化,并用普鲁士蓝染色肿瘤组织切片,观察有无铁粒子聚集。体外MRI数据显示,anti-Sp17-MNP与细胞靶向结合,并与细胞共育2 h后,Sp17+HO-8910的T2*信号强度比Sp17-HepG2低2倍;anti-Sp17-MNP对肿瘤细胞的靶向作用可被重组人Sp17阻断。7T磁共振仪对动物在体肿瘤成像结果显示,感兴趣区因磁性纳米探针靶向聚集而导致信号降低,并经组织切片普鲁士蓝染色证实。本研究结果表明,用anti-Sp17抗体和新的合成路线制备的纳米探针具有用作MR对比剂进行分子成像的潜能。     

大戟甲羟戊酸途径关键酶基因hmgr的克隆与分析

通过比较6种植物8条甲羟戊酸途径关键酶3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因同源区域,设计简并引物,利用RT-PCR技术成功地从大戟(Euphorbia pekinensis)叶中扩增出458bp的基因片段。通过BlastP比较,所推断的大戟HMGR蛋白序列与杜仲Eucommia ulmoides(AAV54051)、穿心莲Andrographis paniculata(AAP14352)、胡黄连Picrorhiza kurrooa(ABC74565)、橡胶树Hevea brasiliensis(AAU08214)、海岛棉Gossypium barba-dense(ABC71314)、龙胆草Gentiana lutea(BAE92730)的一致性分别达到90%、86%、86%、92%、87%和88%。蛋白质保守区、特征区以及进化树分析,初步证实该基因为hmgr基因,这是首次报道从药用植物大戟中克隆到甲羟戊酸途径关键酶HMGR的基因片段。     

Ce~（3＋）与G－肌动蛋白结合引起的构象变化及对聚合的影响

用Ａｅｄａｎｓ标记肌动蛋白单体Ｇ－Ａｃｔｉｎ上Ｃｙｓ３７４残基作为探针,研究了稀土离子Ｃｅ~（３＋）与Ｇ－Ａｃｔｉｎ的结合及引起的微构象变化。Ｃｅ~（３＋）在低浓度（Ｃｅ~（３＋）／Ａｃｔｉｎ摩尔比＜１）和Ｃａ~（２＋）竞争Ｇ－Ａｃｔｉｎ上二价离子的高亲合位点。Ｃｅ~（３＋）取代Ｃａ~（２＋）引起Ａｅｄａｎｓ荧光强度增强与Ｍｇ~（２＋）取代Ｃａ~（２＋）的结果相同。Ｃｅ~（３＋）／Ａｃｔｉｎ＞ｌ则导致Ａｅｄａｎｓ荧光强度下降。说明Ｃｅ~（３＋）在高低两种浓度条件下结合的位点及对Ｃｖｓ３７４的微构象的影响不同。时间分辩测得的Ａｅｄａｎｓ荧光寿命也支持这一结论。ＣＤ谱结果表明Ｃｅ~（３＋）／Ａｃｔｉｎ＜０．４,Ａｃｔｉｎ的二级结构增加,大于０．４又导致其失去。Ｃｅ~（３＋）－Ａｃｔｉｎ在有／无游离ＡＴＰ时用聚合液诱导的聚合结果表明,无游离ＡＴＰ时,极低浓度Ｃｅ~（３＋）促进聚合,高浓度虽有促进但有所减弱;有游离ＡＴＰ时,Ｃｅ~（３＋）／Ａｃｔｉｎ在实验范围内促进聚合。     

肠艾美耳球虫(Eimeria intestinalis)内生发育阶段超微结构研究:Ⅱ.大配子的发育及卵囊壁的形成

肠艾美耳球虫(Eimeria intestinalis)大配子体(Macrogametocyte)带虫空泡内有许多泡内小管。大配子体外被单层限制膜,核大,有一明显的核仁。两种成囊颗粒几乎同时出现。发育中的大配子体胞质中出现多糖和脂肪小体,并逐渐增多。大配子表面被有两层膜。卵囊壁形成的标志是大配子表面的两层膜松弛地向带虫空泡内推移,成囊颗粒Ⅰ形成卵囊壁的外层,成囊颗粒Ⅰ的物质形成卵囊壁的内层,在内层之下又有一颗粒层的形成和消失。     

雪被去除对川西亚高山云杉林土壤活性氮的影响

气候变化引发的季节性雪被改变可能对高寒森林土壤氮循环产生深刻影响.以遮雪棚去除雪被,研究了雪被去除样方和对照样方在不同关键时期(雪被初期、深雪被期和雪被融化期)土壤氮库和矿化速率的变化.结果表明: 季节性雪被对土壤具有良好的保温作用,雪被去除使得5 cm深度土壤平均温度和最低温度分别降低0.33和1.17 ℃,并明显增加了土壤冻结深度和冻融循环.土壤活性氮在不同雪被时期存在显著差异.雪被去除使得冬季土壤铵态氮、硝态氮和可溶性有机氮增加38.6%、23.5%和57.3%.此外,雪被去除也促进了融化期土壤硝化和矿化速率的增加.因此,未来气候变暖引起的雪被减少可能加快川西亚高山森林冬季土壤氮循环.     

高温对田间小菜蛾DNA损伤及4种抗药性相关酶系活性的抑制

研究了高温对福州上街菜田小菜蛾成虫4种抗药性相关酶系活性的影响。与饲养在25℃下的小菜蛾相比,33．5~C或40℃处理72h导致小菜蛾基因组DNA出现DNA凋亡特征梯度化条带。33~C饲养小菜蛾4、8、12或24h对小菜蛾成虫乙酰胆碱酯酶（AChE）和羧酸酯酶（CarE）活性无显著影响,但33℃饲养小菜蛾12或24h导致小菜蛾成虫谷胱甘肽s转移酶（GSTs）酶活性和细胞色素P450含量显著下降。36℃、24h可导致AChE活性显著下降,36℃、12h和24h可导致CarE活性显著下降,36℃、4h,8h,12h和24h可导致GST活性和细胞色素P450含量显著下降。总体上,高温对CarE、GSTs和细胞色素P450的抑制作用大于对AChE的影响,此外,3CC对AChE、CarE、GSTs酶活性和细胞色素P450含量的抑制作用大于33℃的抑制作用。     

马粪海胆对环境变化的耐受性与选择性研究

对采自青岛近岸的马粪海胆进行温度、盐度、光强与底质等因子的耐受及选择实验。结果表明,青岛近岸马粪海胆的适温范围约在8-22℃,对温度的选择受驯养水温的影响;属窄盐性种类,适盐范围约在30-35;喜好弱光环境,饥饿状态的选择光强（8-25lx）较非饥饿状态（10-35lx）低;对粗沙砾底质具明显的正选择,而对细沙性底质呈明显的负选择。     

南京椴HMGR基因的克隆和功能验证

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR）是植物萜类代谢中甲羟戊酸途径的关键酶,本研究运用cDNA末端快速扩增（RACE）技术,首次从珍稀植物南京椴中克隆出HMGR的全长基因TmiHMGR,其长度为2 160 bp,包含一个1 758 bp的开放阅读框,其推导蛋白TmiHMGR编码585个氨基酸残基,相对分子量为62.9 kD,pI为6.11。将TmiHMGR与其他植物HMGR氨基酸序列构建进化树,结果显示TmiHMGR与苹果的HMGR聚为一枝。采用半定量RT-PCR分析TmiHMGR在根、茎和叶中的表达情况,结果表明该基因在茎中的表达量最高,根和叶中的表达量相对较弱。验证功能的颜色互补实验结果显示,TmiHMGR能够使代谢流明显朝类胡萝卜素合成的方向进行,说明TmiHMGR在萜类产物生物合成中是一个重要因子。     

黄麻链霉菌AUH-1发酵液的抗菌活性及其稳定性研究

旨在研究黄麻链霉菌AUH-1菌株发酵液的抗真菌活性,并明确温度、紫外线及pH等理化因素对活性物质稳定性的影响。以8种植物病原真菌为供试菌,采用抑制菌丝生长速率法测定发酵液的抗真菌活性,并以水稻纹枯病菌为指示菌,测定不同条件下发酵液的抑菌活性。抗真菌活性结果表明:AUH-1菌株发酵液对8种植物病原真菌均具有不同程度的抑制作用,其中对西瓜枯萎病菌、烟草黑胫病菌、水稻纹枯病菌以及辣椒疫病菌的抑制效率分别高达81%、78%、68%和67%以上。稳定性实验结果表明:AUH-1菌株所产抗真菌活性物质具有良好的热稳定性和紫外稳定性。可见,黄麻链霉菌AUH-1具有广谱拮抗作用,具备开发生物农药的良好应用前景。     

2型糖尿病兼抑郁症大鼠模型的建立与评价

目的：用体重检测、空腹血糖检测、宏观表征、旷场实验行为学评价糖尿病兼抑郁症的大鼠模型。方法采用高脂饲料喂养加腹腔注射小剂量链脲佐菌素（ STZ）的方法制备2型糖尿病模型,在其基础上再用21 d慢性束缚的方法建立糖尿病兼抑郁症大鼠模型。将32只Wistar大鼠随机分为3组（ n ＝8）：正常组（N组）,2型糖尿病组（T组）,2型糖尿病兼抑郁症组（T＋D组）。2型糖尿病模型建立后,在慢性束缚的第0、7、14、21天检测大鼠的空腹血糖和体重,并对大鼠的宏观表征、饮食量、粪便、小便、精神状态进行观察,在第21天利用行为学设备分析软件,对大鼠旷场实验进行分析,检测大鼠的抑郁程度,验证评价2型糖尿病兼抑郁症大鼠模型是否成功。结果给予高脂饲料及腹腔注射STZ制备2型糖尿病模型后,T＋D组大鼠的毛发散乱,无光泽,活动迟缓,进食量、饮水量增加,粪便尿量增加,精神萎靡。第0、7、14、21天T组和T＋D组组大鼠体重均下降,与N组比较差异有显著性（P＜0.05;P＜0.01）,21d慢性束缚刺激后,T＋D组体重比T组大鼠体重增加较慢,差异有显著性（P＜0.05）;第0、7、14、21天,T组和T＋D组大鼠血糖均升高,与N组比较差异有显著性（ P＜0.01）,21 d慢性束缚刺激后,第21天T＋D组大鼠血糖比T组较高,差异有显著性（P＜0.01）,大鼠5 min内总移动距离有变化,与N组相比,T组差异没有显著性（P＞0.05）,T＋D组差异有显著性（P＜0.05）;与N组相比,T组大鼠5 min内移动速度减慢,差异有显著性（P＜0.05）,T＋D组差异有显著性（ P＜0.01）。结论利用高脂饲料喂养加腹腔注射小剂量STZ及21天慢性束缚的方法,可以成功复制2型糖尿病兼抑郁症大鼠模型,适用于后续研究。