集胞藻PCC6803 中relA/spoT 同源基因syn-rsh (slr1325)的鉴定

[目的]四磷酸或五磷酸鸟苷(Guanosine 3′,5′-bispyrophosphate,(p)ppGpp)是细菌在遭遇环境胁迫时细胞产生应激反应的信号分子,(p)ppGpp由其合成酶RelA或具有合成酶或水解酶双重催化功能的RelA/SpoT合成.本文证明了集胞藻PCC6803(Synechocystis sp.)中唯一编码RelA/SpoT同源蛋白(命名为Syn-RSH)的基因slr1325(syn-rsh)的功能.[方法]通过互补试验证明syn-rsh表达产物的生物学功能;以纤维素薄层层析检测不同条件下Escherichia coli(p)ppGpp合成缺陷突变株及集胞藻PCC6803细胞中的(p)ppGpp.[结果]诱导Syn-RSH表达可使(p)ppGpp合成酶和水解酶基因缺失的E.coli突变株回复野生型表型,并在细胞中积累一定水平的ppGpp;在实验室培养条件下,集胞藻PCC6803细胞中可检测到低水平的ppGpp,氨基酸饥饿可诱导ppGpp水平升高并维持在相应水平.[结论]Syn-RSH具有(p)ppGpp合成酶和水解酶的双重功能,(p)ppGpp是集胞藻PCC6803在实验室生长条件下细胞生长所必需的.     

组织块速冻装置

冰冻切片法是生物医学研究中常用的方法之一,其中较为常用的是恒冷箱切片机,此机冷冻组织块要求要速冻以防形成冰晶,影响组织结构.通常采用CO_2、干冰,仪器本身所具有的低温装置等使组织块冷冻,以上方法虽然可以使组织块冷冻,但存在一些缺点,如CO_2下易领取,干冰冷冻也容易受周围空气的影响,尤其是一些较大的组织块,冷冻速度太慢容易形成冰晶,针对这些原因,我们科室设计了一个快速冷冻组织块的装置。(如图所示)     

一种冰冻切片漂片法免疫反应后再用石蜡切片的方法

本文采用组织冰冻切片５０μｍ进行双重标记的免疫组织化学漂片染色后,将其贴在塑料包埋盒内,脱水,经石蜡包埋切为１－３μｍ的薄片贴于载玻片上,干燥后脱水透明封片,最后进行切片观察,免疫阳性产物被准确定位于所观察的细胞或纤维上,得到满意的结果。为免疫组织化学形态学研究工作提供了新的手段。     

溶瘤病毒疗法在胰腺癌治疗中的研究进展

胰腺癌是恶性程度最高的消化道肿瘤之一,极难治疗,患者五年生存率不足15%。在过去20年中,有许多溶瘤病毒被尝试用于治疗胰腺癌,其中有一部分已经步入临床试验阶段。由于溶瘤病毒疗法毒副作用较低,且可与免疫治疗、靶向治疗等方法有机结合,对于需要长期维持治疗以及单一疗法疗效较差的胰腺癌而言无疑是很好的选择。该文主要介绍了几种溶瘤病毒的基因改造方法、作用原理以及临床前实验结果,并对溶瘤病毒疗法治疗胰腺癌存在的挑战和相应解决办法进行讨论。     

新生鼠中枢神经系统内Nestin蛋白免疫阳性的组织分布

为了观察Nestin在新生SD大鼠中枢神经系统中的分布,探讨神经干细胞在新生鼠的分布.采用免疫荧光法,显示含神经干细胞特征性的标志物Nestin的阳性结构在新生SD大鼠中枢神经系统中的分布.结果表明在新生SD大鼠中枢神经系统中,Nestin在前脑、脑干和小脑的各个部位均有表达,阳性结构多为纤细的纤维状突起,分布密集,标记强度多为中等强度,分布相对比较均匀.在脊髓实质的Nestin免疫阳性产物明显减少,分布稀疏,染色也较浅,中央管Nestin免疫染色阳性的室管膜细胞很少,但在脊髓中央管的背侧(延髓见于腹侧和背侧)可见到“喷泉”状免疫强阳性纤维束垂直伸展,直达软膜.由此可得出结论:新生SD大鼠中枢神经系统的广泛脑区均存在大量的神经干细胞,而脊髓的神经干细胞数目较少,提示神经干细胞在生后从神经系统的尾端开始逐渐减少.