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1.
三叶蔓荆的化学成分研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
采用柱色谱方法,从三叶蔓荆全草(Vitex trifolia L.)95%乙醇提取物的石油醚和乙酸乙酯萃取部位分离得到12个化合物。经理化性质和波谱学方法鉴定为软脂酸(1)、对羟基苯甲酸(2)、对羟基苯甲酸乙酯(3)、3,4-二羟基苯甲酸(4)、香草酸(5)、咖啡酸(6)、顺式对羟基肉桂酸乙酯(7)、反式对羟基肉桂酸乙酯(8)、木犀草素(9)、槲皮素(10)、芹菜素(11)、齐墩果酸(12)。其中化合物3、6~11为首次从本植物分离得到,化合物3、6~8和11为首次从本属植物分离得到。  相似文献
2.
甘油脱水酶gldC基因克隆、表达与鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:表达及纯化甘油脱水酶γ亚基蛋白。方法:使用PCR及DNA重组技术,将甘油脱水酶7亚基基因gldC重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL—c2x中,在大肠杆菌中进行表达。结果:转化重组质粒pMAL/gldC的大肠杆菌经IPTG诱导,SDS—PAGE分析显示表达出的MBP—gldC融合蛋白相对分子质量约66kD,与预期大小一致,并经Western blot分析证实。用直链淀粉树脂亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白。结论:成功地获得甘油脱水酶γ亚基融合蛋白,以便进一步研究其生物学性能。  相似文献
3.
鉴定转Bt甘蔗抗条螟的方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过采集蔗田条螟Procerasvenosatus Walker的蛹,在室内可控条件下进行羽化、交配、产卵、孵化的方式获得虫源,并将初孵幼虫接于检疫温室桶栽的13个转Bt基因甘蔗品系的心叶上,7d后调查幼虫的生长死亡情况以及甘蔗受害程度。结果表明,综合幼虫的生长死亡情况和甘蔗受害程度二项指标,能更准确评价甘蔗的抗虫性,13个转Bt基因甘蔗品系的抗虫性差异悬殊,从高抗到高感不等。该评价方法简单易行,结果准确可靠,可作为转Bt基因甘蔗抗虫性鉴定的一个主要方法。  相似文献
4.
Half-smooth tongue sole (Cynoglossus semilaevis) is an important cultured marine fish as well as a promising model fish for the study of sex determination mechanisms. In the present study, a protocol for artificial gynogenesis of half-smooth tongue sole was developed in order to identify the sex determination mechanism and to generate all-female stock. The optimal UV-irradiation dose for genetically inactivating sea perch spermatozoa was determined to be ≥30 mJ/cm2. The optimal initiation time for cold shock of gynogenetic embryos was determined to be 5 min after fertilization, while the optimal temperature and treatment duration were determined to be 20–25 min at 5°C. Chromosomes from common diploids, gynogenetic haploids, and diploids were analyzed. WW chromosomes were discovered in some of the gynogenetic diploids. The microsatellite marker was applied to analyze gynogenetic diploid fry. Among the 30 gynogenetic diploid fry, 11 fry contained only one allele, while 19 contained two alleles, which had the same genotype as their mother. The female-specific DNA marker was observed in four individuals out of ten gynogenetic diploid fry. Ploidy analysis of 20 putative gynogenetic fry showed them all to be diploid. Thus, a protocol for the induction of artificial gynogenesis has been developed for the first time in half smooth tongue sole, and the sex determination mechanism in the tongue sole was determined to be female heterogametic with the ZW chromosome.  相似文献
5.
化学-酶法制备L-高苯丙氨酸   总被引:1,自引:0,他引:1  
以苯丙酸乙酯为原料,通过正交设计优化2-氧4-苯基丁酸盐的制备条件:苯丙酸乙酯与草酸二乙酯摩尔比为1:3,缩合反应时间为2.5h,H2SO4质量分数为20%,水解反应时间为15h,优化条件下2-氧-4-苯基丁酸盐的产率为68.24%。随后,利用E.coli A5所产的天冬氨酸转氨酶为生物催化剂制备L-高笨丙氨酸。酶转化反应的最适条件为:游离细胞体系pH、温度、底物质量浓度和细胞质量浓度分别为8.5、37℃、20g/L和30g/L;而固定化细胞体系则分别为7.0—9.0、40℃、10g/L和30g/L。采用廉价的L-谷氨酸(L—Glu)作为氨基供体,添加表面活性剂有利于提高L-HPA产率。通过研究固定化细胞转化反应进程,结果发现8h内90%的底物可转化为L—HPA。  相似文献
6.
为了表达及纯化甘油脱水酶β亚基蛋白,采用PCR及DNA重组技术将甘油脱水酶β亚基基因gldB重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达。结果表明,转化重组质粒pMAL/gldB的大肠杆菌经IPTG诱导,SDS-PAGE分析显示:表达出的MBP-glddB融合蛋白相对分子质量约72000,与预期大小一致,并经Western blot分析证实。进一步通过直链淀粉树脂亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白。已获得的重组甘油脱水酶β亚基蛋白有利于研究其生物学性能。  相似文献
7.
目的:构建可高效生产甘油脱水酶的大肠杆菌工程菌,方法:将编码甘油脱水酶的三个基因gldA、gldB、gldC,分别克隆至克隆载体pMD18-T和pSIM-T中,经测序正确后,再亚克隆至表达融合蛋白的高效表达载体pMAL-c2X上,构建成表达质粒pMAL-gldABC,并转化大肠杆菌E.coli DH5α。结果:成功地将甘油脱水酶基因gldABC以同向串联方式克隆到大肠杆菌融合表达载体pMAL-c2X中,结论:得到了含gldABC基因的MBP融合蛋白表达载体,为研究甘油脱水酶基因(gldABC)的在原核表达载体中的串联表达奠定了基础。  相似文献
8.
The expression efficiency was improved for the recombinant single-chain variable fragment (scFv) against clenbuterol (CBL) obtained from mouse and expressed in the methylotrophic yeast Pichia pastoris GS115, by redesigning and synthesizing the DNA sequence encoding for CBL-scFv based on the codon bias of P. pastoris. The codons enco4ding 124 amino acids were optimized, in which a total of 156 nucleotides were changed, and the G+C ratio was simultaneously decreased from 53 to 47.2 %. Under the optimized expression conditions, the yield of the recombinant CBL-scFv (41 kDa) antibodies was 0.223 g L–1 in shake culture. Compared to the non-optimized control, the expression level of the optimized recombinant CBL-scFv based on preferred codons in P. pastoris demonstrated a 2.35-fold higher yield. Furthermore, the recombinant CBL-scFv was purified by Ni-NTA column chromatography, and the purity was 95 %. The purified CBL-scFv showed good CBL recognition by a competitive indirect enzyme-linked immunoassay. The average concentration required for 50 % inhibition of binding and the limit of detection for the assay were 5.82 and 0.77 ng mL–1, respectively.  相似文献
9.
以蓖麻叶为原料,对蓖麻碱的超声提取工艺优化进行研究,在单因素试验的基础上,选择超声时间、超声功率、料液比为自变量,以蓖麻碱提取率为影响值,采用响应面试验设计方法,研究各自变量及其交互作用对蓖麻碱提取率的影响。利用Design Expert8软件得到回归方程得模型并进行响应面分析,确定超声提取蓖麻碱的最佳工艺条件为料水比为1∶25 g/mL,超声时间为103.03 min,超声功率为621.05 W,此条件下蓖麻碱的提取率为2.63‰。  相似文献
10.
利用广东省2009年甘蔗品种区域试验产量数据,对线性回归模型、AMMI模型和LR-PCA模型在评价甘蔗品种稳定性方面的应用进行了初步比较,结果发现,回归法计算简便、直观,AMMI模型和LR-PCA模型的分析结果则更全面、深入,而这两种模型之间仍存在着一定差异.实际操作中,在根据不同的数据资料选择相适宜的分析方法的同时,也可以采用不同的方法进行分析,通过比较选择较为合理的结果.  相似文献
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