激活SUR2B/Kir6.1通道扩张肺微动脉的分子机制

目的：以ATP敏感性钾通道（K_ATP） SUR2B/Kir6.1亚型开放剂埃他卡林（Ipt）为工具药,研究激活SUR2B/Kir6.1通道扩张肺微动脉作用特征,并探讨其可能的分子机制。方法：利用离体微血管压力-直径监测灌流技术,检测Ipt对大鼠四级肺微动脉的舒张效应（n=6~8）,观察内皮损伤后或用K_ATP通道拮抗剂格列苯脲（Gli）、环氧合酶（COX）抑制剂吲哚美辛（Indo）、一氧化氮合酶（NOS）抑制剂L-Nω-硝基精氨酸甲酯（L-NAME）预孵后肺微动脉舒张率的变化。结果：Ipt能够扩张肺微动脉,最大舒张率为（60.53±2.08）%。内皮细胞损伤后,Ipt扩张肺微动脉作用明显减弱,最大舒张率为（9.47±1.56）%,与对照组相比存在显著性差异（P<0.01）。预孵Gli、Indo、L-NAME后,最大舒张率分别下降为（17.49±1.47）%、（37.00±3.88）%、（24.91±2.30）%,与对照组相比均存在显著性差异（P<0.01）。结论：其选择性开放K_ATP通道SUR2B/Kir6.1扩张肺微动脉作用具有内皮细胞依赖性,与其促进内皮细胞释放一氧化氮（NO）和前列环素（PGI₂）相关。     

常压低氧小鼠氧耗量测定新装置的研究及应用

目的：建立一种实时记录常压低氧环境中动物氧耗量的方法。方法：本实验装置由动物舱、补水控制系统、天平、软管、装有体重记录软件的电脑等组成。为了实现常压低氧,用水补充动物消耗的氧气以保持动物舱内压力恒定,这个过程由气液联动装置控制;补充的水量由天平测量并同步输出信号至excel文档中。用注射器抽气校准方法检测了装置的准确性和精度。利用该装置观察了6只急性重复低氧小鼠（处理组）和6只未经低氧处理的小鼠（对照组）的常压低氧过程的氧耗量特征。结果：不同体积抽气量与相应补水量两组数据配对t检验P=1;重复抽1 ml氧气6次的补水量变异系数为4%。处理组小鼠的存活时间为（58.8±6.8）min,显著高于对照组（46.0±8.7）min（P〈0.05）。处理组小鼠的总氧耗量为（85.1±8.5）ml,显著高于对照组（73.6±5.4）ml（P〈0.05）。结论：处理组小鼠摄取氧总量增多从而显著延长其存活时间。氧耗量测定装置准确度和精密度较高,可用于低氧研究中氧耗量的测定。     

急性低氧和间断低氧习服对大鼠主动脉收缩和舒张功能的影响

目的：观察急性低和间断低氧习服对大鼠主动脉收缩和舒张功能的影响。方法：用去甲肾上腺素（ＮＥ）诱发大鼠离体动脉环的收缩,反映收缩功能的变化,主动脉环以０．６２μｍｏｌ／Ｌ ＮＥ预收缩后用乙酰胆碱（Ａｃｈ）舒张对抗,反映舒张功能的变化。结果：与常氧对照组相比,急性低氧和间断低氧习照大鼠主动脉对去甲肾上腺素（ＮＥ１０＾－９,１０＾０８,１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）介导的收缩反应显著增强（Ｐ〈０．０５～０．０１     

高原肺水肿易感基因多态性的全基因组关联分析

目的：高原肺水肿严重影响高原人群的健康。筛选高原肺水肿易感基因以用于高原肺水肿易感者的评估及防护。方法：利用Affymetrix SNP Array6．0芯片对23例高原肺水肿患者和17个健康对照进行全基因组SNP分型,利用PLINK软件进行了全基因组关联分析,利用Go和Pathway软件进行分析及作图。结果：全基因组关联分析获得39个相对显著的SNPs位点（P〈10^-4）。通过对这些SNP位点附近27个基因的c0和Pathway富集分析,发现这些基因主要参与细胞增殖调控过程、氮代谢过程和G蛋白耦联受体蛋白信号转导通路等。结论：本文发现的多态性位点及相关基因可能与高原肺水肿易感性相关。     

吡那地尔对老年自发性高血压大鼠心血管作用的特征

本文研究新型抗高血压药ＡＴＰ敏感性钾通道开放剂吡那地尔对１５月龄老年自发性高血压大鼠心血管作用的特征。在离体工作心脏上吡那地尔０．１－１０．０μｍｏｌ／Ｌ对离体工作心脏的心率、心肌舒缩功能、主动脉射量与冠脉流量无显著影响。在离体血管上,以去甲肾上腺素或氯化钾预收缩主动脉环后,观察吡那地尔的舒血管作用,并与硝苯地平作比较,发现吡那地尔对去甲肾上腺素预收缩的血管具有双相作用。吡那地尔１．０－５．０μｍｏｌ／Ｌ时呈舒血管作用,浓度增至１０．０μｍｏｌ／Ｌ时,先呈缩血管效应,继之呈舒血管效应。而在正常血压大鼠和４月龄年轻自发性高血压大鼠中,主动脉环以去甲肾上腺素预收缩后吡那地尔１．０－１０．０μｍｏｌ／Ｌ仅呈舒血管效应;以氯化钾预收缩后,吡那地尔也仅呈舒血管效应。另一方面,与４月龄自发性高血压大鼠相比,１５月龄自发性高血压大鼠的主动脉环对吡那地尔的舒血管作用的反应减弱,但对硝苯地平的舒血管作用的反应增强。其机理可能与老年高血压大鼠心血管重构、ＡＴＰ敏感性钾通道的变化有关。     

沙利度胺抑制肿瘤细胞分泌VEGF/bFGF机制的探讨*

目的: 探讨Cereblon(CRBN)对沙利度胺抑制人肺癌A549细胞及人肝癌HepG2细胞分泌VEGF/bFGF的影响。方法: 采用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰技术建立稳定敲低CRBN的A549细胞系(A549_CRBN)及HepG2细胞系(HepG2_CRBN)并通过实时定量PCR(Real-time PCR)和蛋白质印记(Western blot)实验验证。将A549细胞分为阴性对照组(A549_luciferase)、CRBN低表达组(A549_CRBN);HepG2细胞分为阴性对照组(HepG2_luciferase)、CRBN低表达组(HepG2_CRBN),以上细胞按照 3×10⁵ cells/well接种到6孔板中,放入37℃,5%CO2的培养箱中培养24 h,分别加入1 ml含100 μmol/L沙利度胺(thalidomide组)和1 ml 1‰ DMSO(control组)的培养液,继续培养24 h再行后续实验,每组设计3个复孔。MTS法检测沙利度胺对细胞增殖的影响;Real-time PCR检测VEGF、bFGF、c-jun mRNA表达,ELISA法检测VEGF、bFGF蛋白表达。结果: 与对照组比较,沙利度胺在浓度为1、10、50、100 μmol/L 时对A549 及HepG2细胞的增殖能力无显著影响(P＞0.05)。与A549_CRBN或HepG2_CRBN组比较,A549_luciferase及HepG2_luciferase组分泌的VEGF及bFGF均显著降低(P＜0.05)。与A549_luciferase或HepG2_luciferase细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制A549_luciferase和HepG2_luciferase细胞的VEGF和bFGF的表达(P＜0.05),而对A549_CRBN和HepG2_CRBN细胞中VEGF和bFGF的表达无显著抑制作用;与HepG2_luciferase细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制HepG2_luciferase细胞的c-Jun表达(P＜0.01),而对HepG2_CRBN细胞的c-Jun表达无显著抑制作用。结论: 沙利度胺对A549和HepG2细胞VEGF和bFGF表达的抑制作用可能是通过CRBN介导的,而c-Jun可能是抑制作用的关键转录因子之一。