毕赤酵母高密度培养表达鸡α-干扰素的工艺研究

考察了10 L罐规模条件下pH、温度、装液量以及碳源流加模式对毕赤酵母高密度培养表达鸡α-干扰素的影响,确定了最优的生产工艺:在pH5.5、28℃、40%装液量条件下,当初始碳源耗尽的情况下,进行甘油和甲醇混合(流加体积速率比为20∶1)脉冲流加,产物鸡α-干扰素抗病毒活性最高,可达3×106 IU/mL。将该工艺在50 L发酵罐规模条件下进行放大,重复20批,结果表明此过程重复性较好,且目的蛋白表达量稳定,具有工业化生产的实际应用价值。     

寄生植物锁阳茎的发育解剖学研究

锁阳茎的初生分生组织由原表皮、基本分生组织以及在基本分生组织中呈波浪式环状排列的原形成层束组成。茎的增粗是由于呈波浪式环状排列的维管束,其“波浪”上下幅度逐渐增大,即从“浪”的基部到“浪”顶端维管束数目由4个逐渐增加到10－12个。维管束数目不断增加是由于：（1）由髓射线薄壁细胞反分化产生分生组织束,分生组织束活动产生新的维管束;（2）维管束中分化出一列或几列薄壁细胞,导致该维管束被分化出的薄壁细胞分成2－3个独立的维管束。     

花生种子活力与贮藏蛋白质降解的关系

花生种子吸胀2d后,子叶中肽链内切酶活性上升,贮藏蛋白质开始降解。高活力种子肽链内切酶活性在吸胀2d后迅速上升,至4d时达到高峰,而中等活力种子的肽链内切酶活性上升速度绶慢。高活力种子萌发时贮藏蛋白质降解速度高于中等活力种子。中等活力种子经PEG和PUT处理可提高种子活力,也促进了种子贮藏蛋白质降解能力的提高。     

圭山国家森林公园开展生态旅游发展优势及其对策

石林县开展生态旅游已经取得了显著成绩,圭山国家森林公园作为云南石林喀斯特重要的生态旅游胜地,对于石林喀斯特旅游圈生态旅游具有重要的战略意义。本文分析云南圭山国家森林公园生态旅游开发的条件和优势,以及目前生态旅游资源开发中存在的问题,提出其生态旅游可持续发展的对策和建议,促进石林喀斯特生态旅游业可持续发展。     

γ-聚谷氨酸的性质与生产方法

介绍了γ-聚谷氨酸的结构、理化性质及其用途。从国内外生产γ-聚谷氨酸的方法着手,综述了不同的合成方法以及各自的优缺点,重点介绍了微生物法合成γ-聚谷氨酸的途径,对新方法进行了展望。     

毛刺槐的组织培养和植株再生

1　植物名称　毛刺槐 (Ｒｏｂｉｎｉａｈｉｓｐｉｄａ) ,别名毛洋槐、江南槐。2　材料类别　带腋芽的茎段。取自本校校园里的 1 0～ 2 0年生毛刺槐的当年生新梢。3　培养条件　培养基 :( 1 )ＭＳ 6 ＢＡ 2 .0ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) ＮＡＡ 0 .0 5 ;( 2 )ＭＳ 6 ＢＡ 2 .0 ＮＡＡ 0 .1 ;( 3)ＭＳ 6 ＢＡ 1 .0 ＮＡＡ 0 .0 5 ;( 4)ＭＳ 6 ＢＡ 1 .0 ＮＡＡ 0 .1 ;( 5 )ＭＳ 6 ＢＡ 0 .5 ＮＡＡ 0 .1 ;( 6 )ＭＳ 6 ＢＡ 0 .5 ＮＡＡ 0 .0 5 ;( 7)ＭＳ。以上培养基均附加蔗糖 30 ｇ·Ｌ-1、琼脂 7ｇ·Ｌ-1,ｐＨ6 .0～ 6 .…     

不同溶氧条件下L-苏氨酸生物合成菌株的代谢流量分析

[目的]探索L-苏氨酸生物合成机理及影响因素.[方法]建立了大肠杆菌L-苏氨酸的代谢流平衡模型,应用MATLAB软件计算出不同溶氧条件下发酵中后期代谢网络的代谢流分布及理想代谢流分布.[结果]5%溶氧条件下,25.5%碳架进入HMP途径,74.5%碳架进入糖酵解途径,获得33.9%质量转化率;20%溶氧条件下,58.08%碳架进入HMP途径,41.92%碳架进入糖酵解途径,获得46.5%质量转化率;[结论]与理想代谢流(88.23%质量转化率)相比,应从菌种改造和发酵控制方面通过改变6-磷酸葡萄糖异构酶借以增加HMP途径代谢流量,通过增加磷酸烯醇式丙酮酸羧化反应代谢流提高天冬氨酸族合成代谢流,减少TCA循环代谢流量,从而达到减少副产物生成,增加L-苏氨酸生物合成的目的.     

青海湖鸟岛地区不同淹水条件下土壤酶活性的差异及其影响因素

湿地以常年性或周期性积水为特征,而水分条件的改变可直接影响湿地生态系统的结构和功能。为探究淹水条件对土壤酶活性的影响以及驱动酶活性变化的因素,在青海湖鸟岛地区选择长期淹水、周期性淹水和很少淹水的湿地,比较了土壤化学性质、微生物生物量碳氮以及酶活性的差异。结果表明:周期性淹水的湿地土壤β-葡萄糖苷酶、纤维二糖酶和甘氨酸氨基肽酶的活性较长期淹水的湿地分别下降了24.01%、18.80%和2.96%;而很少淹水的湿地较周期性淹水的湿地分别下降了33.65%、18.84%和63.47%。周期性淹水与长期淹水湿地的土壤N-乙酰氨基葡萄糖苷酶和亮氨酸氨基肽酶活性显著高于很少淹水的湿地,而很少淹水的湿地土壤碱性磷酸酶和酚氧化酶活性最高。冗余分析发现,土壤易氧化碳、全氮、有机碳、微生物生物量碳氮、水溶性有机氮与土壤酶活性显著相关,其中,有机碳与纤维二糖酶活性的相关性较高;易氧化碳能很好地解释β-葡萄糖苷酶、N-乙酰氨基葡萄糖苷酶和甘氨酸氨基肽酶活性的变化。总的来说,长时间淹水更有利于碳氮的积累,提高水解酶活性。     

靶向EGFR二聚化界面单链抗体的构建及表达

[目的]构建靶向EGFR二聚化界面的单链抗体。[方法]构建单链抗体的基因并进行密码子优化,克隆于表达载体p GAPZα-A和毕赤酵母X-33。镍柱纯化目的蛋白,并对EGFR高表达细胞A431和EGFR正常表达细胞NIH-3T3进行体外抑制分析和抗磷酸化分析。[结果]纯化获得了分子量大小约29. 0 k Da的EGFR dimer Sc Fv蛋白。在48h体外抑制实验中,534 nmol/L EGFR dimer Sc Fv对A431和NIH-3T3的抑制率分别为34. 92±1. 30%和5. 89±0.46%,抑制作用与母本抗体相似。Western Blotting分析表明,EGFR dimer Sc Fv能显著抑制A431细胞EGFR磷酸化,而对NIH-3T3细胞显著无抑制作用。[结论]初步验证了靶向EGFR二聚化界面的单链抗体作为新型抗体药物的可行性,为后续研究奠定了基础。     

管花肉苁蓉茎异常结构的发育解剖学研究

管花肉苁蓉茎内存在类似于单子叶植物的散生初生维管束。它由散生在基本分生组织中的原形成层束分化而成。在原形成层来分化的过程中,每个原形成层束可通过分离形成2—7个初生维管束,使初生维管束的数目迅速增加。当初生维管束开始正常次生生长时,正常维管束韧皮部外方的薄壁组织细胞或远离维管柬的薄壁组织细胞转变为异常形成层束。异常次生维管束与正常维管束以韧皮部相对或韧皮部并列的方式排列,或异常次生维管束单个存在于薄壁组织中。