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辣椒碱对小菜蛾的驱避活性及其体内谷胱甘肽-S-转移酶和Na+,K+-ATP酶活性的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
采用常规生测方法和酶活力测定方法,初步研究了辣椒碱对小菜蛾Plutella xylostella L.的产卵忌避和拒食作用,及其对小菜蛾体内谷胱甘肽-S-转移酶、Na+,K+-ATP酶活性的影响,以期阐明辣椒碱对害虫的作用机制。结果表明,辣椒碱对小菜蛾表现出较强的产卵忌避活性和拒食活性。在6.25×104 mg/L浓度下,处理24 h辣椒碱对小菜蛾的非选择性产卵忌避率达96.55%,选择性产卵忌避率为84.30%;在相同浓度下,处理48 h辣椒碱对小菜蛾的非选择性拒食率达81.47%,选择性拒食率为69.69%。 另外,经1.25×105 mg/L辣椒碱不同时间处理后,小菜蛾体内的谷胱甘肽-S-转移酶酶活力和Na+,K+-ATP酶活力与对照相比均产生了波动,处理18 h时小菜蛾体内GSTs活力最高,为152.01 U·mg-1pro·min-1,处理1 h时小菜蛾体内Na+,K+-ATP酶活力最高,为19.99 U·mg-1pro·min-1。结果说明辣椒碱能够影响小菜蛾产卵和取食行为,并且对其体内的酶系也产生了影响。 相似文献
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用XholⅠ和SalⅠ分别双酶切植物表达载体pCAMB IA1300和含有目的基因的pMD19-T-BenA3,定向连接得到重组质粒pCAMB IA1300-BenA3,将其导入农杆菌AGL-1。经PCR鉴定后,得到可用于绿僵菌转化的农杆菌双元载体。采用的预培养时间、菌液浓度、共培养时间、乙酰丁香酮浓度的条件下,进行农杆菌介导绿僵菌的遗传转化,得到可以稳定性遗传的绿僵菌转化子,随机挑选转化子进行苯菌灵抗性基因的PCR扩增表明,绿僵菌转化子含有了苯菌灵抗性基因。该转化体系的建立,将有利于绿僵菌生防功能基因的克隆和作用机制的研究。 相似文献
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农杆菌介导将Bt杀虫蛋白基因导入优良玉米自交系的研究 总被引:26,自引:0,他引:26
以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料,用带有质粒pGBIL04(Pactin-Bt-Tnos)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织,共培养3天后,在含PPT的培养基上连续筛选培养3代,然后分化获得再生植株。PCR检测证明目的基因已整合到再生植株的基因组中。实验结果表明幼胚预培养后形成的新鲜的初始愈伤组织是比较适宜的转化受体,结果还发现将共培养温度降到22℃可以提高农杆菌介导的玉米遗传转化的筛选频率。
Abstract:Excellent inbred-lines of maize,340 and 4112,which were used largely in hybridized combination were transformed with Agrobacterium tumefaciens.The immature embryos and their original calli were infected by A.tumefaciens LBA4404 containing plasmid pGBIL04.After 3 days of co-cultivation,the immature embryos and calli were continuously selected on the medium containing phosphinothricin (PPT) for 3 generations,then plants were regenerated.It was proved by PCR analysis that the target Bt gene had been integrated into the genome of regenerated plants.The results showed that fresh original calli from the immature embryos after pre-culture were suitable acceptors.The results also showed that it could increase the frequency of selection by properly lowering the co-culture temperature to 22℃. 相似文献
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一种改进的甲醛—琼脂糖凝胶电泳 总被引:1,自引:0,他引:1
构建cDNA文库,进行Northern杂交分析以及RT-PCR等分子生物学研究,都需要纯度高、完整性好的RNA。鉴定RNA的完整性通常需要进行甲醛-琼脂糖凝胶电泳。然而,传统的甲醛-琼脂糖凝胶电泳操作步骤繁杂[1],本文提出一种改进的甲醛-琼脂糖凝胶电泳,不仅简化了操作,而且效果很好。我们以向日葵总RNA和cDNA甲醛-琼脂糖凝胶电泳为例,对这一方法进行介绍。1 材料与方法1.1 总RNA的提取及mRNA的分离:取向日葵花蕾1g,按照改进的异硫氰酸胍法提取向日葵总RNA[2]。利用磁珠法分离mR-… 相似文献
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