人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠Fas／Fas—L、Caspase-3表达的影响

通过人参皂甙Rg1对局灶性脑缺血再灌注大鼠膜蛋白（Fas）、膜蛋白配体（Fas—L）、胱天蛋白酶（Caspase-3）表达的影响,探讨人参皂甙Rg1的作用机制。本实验将SD大鼠随机分为假手术组、单纯缺血再灌注组、人参皂甙R1 10、20、40mg．kg^-1组、尼莫地平1mg．kg^-1组,采用大脑中动脉闭塞法建立脑缺血再灌注模型,24h后观察海马CA1区,     

ERK1/2和p-ERK1/2在肺癌组织中的表达及意义

目的研究细胞外信号调节激酶1/2（extracellular regulated kinase 1/2,ERK1/2）及其磷酸化状态（p-ERK1/2）在不同分化程度肺癌中的表达情况,探讨二者与肺癌侵袭、转移的关系。方法采用免疫组化（Envision）法,检测79例肺癌组织及l2例癌旁正常肺组织中ERK1/2和p-ERK1/2的表达。结果ERK1/2在高、中、低分化组表达率分别为13.6%,39.4%,66.7%,p-ERK1/2在高、中、低分化组表达率分别14.3%,27.3%,79.2%（P〈0.05）;无淋巴结转移者阳性率为20%,有淋巴结转移者阳性率为50.1%（P〈0.05）。ERK1/2和p-ERK1/2的表达在不同年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤病理类型无显著性差异,而与分化程度有关,其中p-ERK1/2的表达还与有无淋巴结转移有关。结论ERK1/2和p-ERK1/2在肺癌组织中高表达且与分化程度有关。     

人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织Bcl-2和Bax表达的影响及其意义。方法分别给大鼠腹腔注射人参皂甙Rg1 10、20、40 mg/kg,采用大脑中动脉闭塞方法建立脑缺血再灌注模型,观察大鼠脑缺血再灌注后不同时间段（2 h、24 h）神经功能缺损评分;应用免疫组化法检测脑组织缺血再灌注24h后Bcl-2、Bax的表达。结果人参皂甙Rg1组大鼠脑缺血后各时间点神经功能缺损评分显著低于单纯缺血再灌注组（P〈0.05）;与单纯缺血再灌注组相比,人参皂甙Rg1各组Bcl-2表达显著增高,Bax表达显著降低,Bcl-2/Bax比值显著上调（P〈0.05）。结论人参皂甙Rg1防治大鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与促进脑组织Bcl-2表达、抑制Bax表达有关,且以高剂量效果较好。     

人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠Caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)表达的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、人参皂苷Rg110、20、40mg/kg组、尼莫地平组,每组10只。采用线栓法栓塞大脑中动脉2h制作大鼠脑缺血再灌注模型;观察再灌注22h后神经功能缺损评分;应用免疫组化、免疫印迹法检测大脑皮层缺血半暗带Caspase-3的表达。结果(1)假手术组、模型组、人参皂苷Rg110、20、40mg/kg组和尼莫地平组神经功能缺损评分分别为0、2.8±0.9、2.1±0.9、1.5±0.7、1.3±1.1、1.5±0.7,差异有统计学意义(P0.05)。人参皂苷Rg120、40mg/kg组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);人参皂苷Rg110mg/kg组与尼莫地平组比较,差异有统计学意义(P0.05);人参皂苷Rg120、40mg/kg组与尼莫地平组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。(2)免疫组化和免疫印迹结果显示各组大鼠皮层缺血半暗带均有Caspase-3的表达,其中假手术组仅有少量表达,模型组表达最多。与模型组比较,人参皂苷Rg1各剂量组及尼莫地平组Caspase-3表达量减少,差异有统计学意义(P0.05);与尼莫地平组比较,人参皂苷Rg110mg/kg组的Caspase-3表达量显著增高,40mg/kg组显著降低(P0.05),而20mg/kg组则差异无统计学意义(P0.05)。结论人参皂苷Rg1防治脑缺血再灌注的机制与抑制脑组织Caspase-3表达有关,且以高剂量效果较好。     

1型糖尿病的干细胞治疗研究进展

1型糖尿病是由于产生胰岛素的β细胞特征性的被破坏造成的自身免疫疾病.理想的治疗方法就是通过外源的或内源的移植使胰腺细胞再生.干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞,它们都有各自的特点.最近的数据显示这些干细胞能够在体外特定的培养条件下分化成为胰岛素产生细胞.虽然在很多的案例中,来源于干细胞的胰岛素产生细胞在实验中可以逆转糖尿病模型动物的高血糖,但是,要想达到明确的应用于临床,仍然存在几个问题：主要有与胰岛β细胞相似细胞系的获得、移植后的免疫相容性问题和肿瘤的形成.本文综述了从胚胎干细胞和成体干细胞获得胰岛素产生细胞的不同方法、分化后的细胞移植治疗情况以及干细胞治疗1型糖尿病存在的主要问题和可能解决的办法.     

肝爽颗粒联合替诺福韦酯对慢性乙型肝炎患者肝纤维化标志物和外周血单个核细胞Nrf2 /HO-1信号通路的影响

摘要 目的：观察肝爽颗粒联合替诺福韦酯对慢性乙型肝炎（CHB）患者肝纤维化标志物和外周血单个核细胞核因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶 1（HO-1）信号通路的影响。方法：选择中国人民解放军联勤保障部队第九四〇医院自2020年5月-2022年5月期间收治的80例CHB患者,按照随机数字表法分为对照组（n=40,替诺福韦酯治疗）和观察组（n=40,肝爽颗粒联合替诺福韦酯治疗）。对比两组乙型肝炎病毒（HBV）-脱氧核糖核酸（DNA）转阴率、肝纤维化指标、外周血单个核细胞Nrf2/HO-1信号通路相关指标、肝功能指标、乙型肝炎e抗原（HBeAg）转阴率、不良反应发生率。结果：观察组的HBV-DNA转阴率和HBeAg转阴率均高于对照组（P<0.05）。与对照组相比,观察组治疗3个月后总胆红素（TBIL）、层黏连蛋白（LN）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、Ⅲ型前胶原（PcⅢ）、透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原（IV-C）更低,Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA更高（P<0.05）。两组不良反应发生率比较无差异（P>0.05）。结论：CHB患者采用肝爽颗粒联合替诺福韦酯治疗,可促进肝功能和肝纤维化标志物水平改善,调节外周血单个核细胞Nrf2/HO-1信号通路。     

特异性下调葡萄糖调节蛋白78表达对肝细胞癌侵袭和转移能力的影响

为了研究特异性下调葡萄糖调节蛋白(Grp)78对肝细胞癌侵袭和转移能力的影响。通过小干扰RNA(siRNA)技术特异性下调人肝细胞癌细胞株BEL7402中Grp78的表达,并应用Transwell法和划痕法对肝细胞癌侵袭、转移能力的改变进行分析,应用免疫沉淀技术和GST-pulldown技术分别对黏着斑激酶(FAK)的磷酸化水平和小GTPase RhoA的活性进行研究,应用免疫印迹技术检测E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白和波形蛋白的表达。结果发现,Transwell实验和划痕实验结果显示特异性下调Grp78表达可以抑制肝细胞癌的侵袭和转移,免疫沉淀结果显示特异性下调Grp78表达可以降低FAK的磷酸化水平,GST-pulldown实验结果表明特异性下调Grp78表达可以上调RhoA的活性。免疫印迹实验结果表明特异性下调Grp78可以下调N-钙黏着蛋白、波形蛋白的表达,上调E-钙黏着蛋白的表达。结果表明特异性下调Grp78在体外可以抑制肝细胞癌的侵袭和转移,这种抑制作用是通过FAK脱磷酸化和抑制肿瘤的上皮-间叶转化实现的。     

P38和ERK1/2在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨p38（mitogen-activated protein kinase p38,p38）和细胞外信号调节激酶1/2（extracellular reg-ulated kinase 1/2,ERK1/2）在不同分化程度肝细胞癌（human hepatocellular carcinoma,HCC）中的表达情况,以及两者的相关性。方法通过免疫组化（Envision）法,检测52例肝癌组织及l0例癌旁正常肝脏组织中p38和ERK1/2的表达。结果：p38和ERK1/2在肝癌组织中均有表达,与正常组比较差异有显著性,且阳性率的高低与其分化程度有关,p38在肝癌组织中的表达随分化程度的增高阳性率降低（P〈0.05）;ERK1/2在中、低分化的肝癌组织分别与高分化相比差异具有显著性（P〈0.05）。但低分化与中分化的肝癌组织比较虽也有差异但无统计学意义（P〉0.05）。癌组织中p38和ERK1/2的表达呈中度正相关（r=0.703,P〈0.05）。结论HCC中,p38和ERK1/2表达和活性增加,且存在一定的相关性。     

膜联蛋白A2对脑心肌炎病毒在BHK-21细胞中增殖的影响

膜联蛋白A2是一种参与调节多种病毒增殖的重要宿主蛋白。本研究通过构建过表达膜联蛋白A2的BHKAnxa2细胞系及瞬时敲低膜联蛋白A2,探讨膜联蛋白A2对脑心肌炎病毒在BHK-21细胞中增殖的影响。通过RT-PCR从BHK-21细胞中扩增膜联蛋白A2全长cDNA,测序正确后克隆入pcDNA3.1整合表达载体中;用重组载体pcDNA3.1-Anxa2转染BHK-21细胞,经G418筛选获得抗性克隆,qRT-PCR和Western blot试验证明BHKAnxa2过表达膜联蛋白A2;EMCV感染试验证明BHK-Anxa2细胞中病毒滴度高于对照组。通过siRNA降低BHK-21细胞中膜联蛋白A2表达,EMCV感染试验证明膜联蛋白A2表达下降后EMCV增殖也随之下降。以上试验结果表明鼠膜联蛋白A2表达改变可导致病毒在BHK-21细胞中的增殖发生变化,提示膜联蛋白A2与EMCV在BHK-21细胞中的增殖相关。