猪血红蛋白(Hb)脉冲酶解效果比较研究

目的寻找一种高效快捷有效地降解猪血红蛋白(Hb)新方法。方法在波型为双向方波,电极间距离为1.2 cm,脉冲频率为200 kHz的脉冲电场下,利用胰蛋白酶在温度为37℃,水解时间为4 h条件下水解猪血红蛋白。结果在脉冲电场作用下,胰蛋白酶水解血红蛋白获得的降解产物,利用高效凝胶色谱、紫外可见扫描及SDS-PAGE蛋白质电泳检测,发现其吸收峰或色带明显多于单一利用胰蛋白酶降解血红蛋白所得降解产物的吸收峰或色带。结论当脉冲电场通过血红蛋白时,血红蛋白内部的分子结构便产生斯塔克效应(Stark effect),引起血红蛋白分子剧烈振动,从而改变其分子结构振辐、吸收峰和偶极矩,并分别引起斯塔克频率、偶极矩、极化率的改变、使血红蛋白分子结构的极化跃迁和超极化,因此,在脉冲电场作用下,促进了血红蛋白酶解反应。     

蛋黄液辐照杀菌技术研究

通过测定液蛋黄的酸价、过氧化值和TBA值,研究辐照剂量对蛋黄液氧化和杀菌效果的影响.结果表明,蛋黄液经辐照后,蛋黄液中脂肪氧化程度随着剂量增大而增加.0.4 kGy能够完全杀灭微生物,且感官指标不发生变化.     

猪血红蛋白降解菌株分离筛选与微生物特性

从多年被废弃畜禽血液浸染的土壤中,分离筛选出16株菌株。根据在酪蛋白/明胶平板上蛋白质水解圈比值大小,初步确定8株菌株为被选菌株;并分别在Hb发酵培养液中发酵72 h,测定蛋白酶活力、游离氨基酸含量、可溶性蛋白质含量、Hb降解率,最终确定一株菌株(编号为Lact5.Ⅲ)为所有被筛选出来的16株菌株中的最佳菌株。经过菌落形态观察初步确定为细菌,进一步测定生理、生化反应指标,鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。     

基于真空LHPEF结合胰蛋白酶降解猪血红蛋白

在真空及低压高频脉冲（LHPEF）条件下,结合胰蛋白酶降解猪Hb,利用高效凝胶色谱、Native-PAGE蛋白电泳及紫外扫描来测定其降解效果。结果：在37℃温度下,1.88 V、200 kHz的LHPEF处理猪Hb,电导率为3.45326 ×10^5 μs/cm（对照组为0.645×10^4 μs/cm）。紫外扫描曲线图中的真空LHPEF胰蛋白酶降物中有8个特征吸收峰,而对照组中为6个吸收峰,Native- PAGE蛋白质电泳图中有13个明显色带,而对照组中只有6个色带,高效凝胶色谱图中的特征吸收峰为48个,对照组中7个特征吸收峰。     

胶原蛋白酶产生菌的筛选及酶的分离纯化

从堆积骨骼的土样中筛选出高产胶原蛋白酶的MBL13菌株,经鉴定为蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus。对其所产的胶原蛋白酶BCC进行分离纯化,并进行酶学性质的研究。从菌株的发酵液中纯化出分子量约为38.0kDaBCC酶。酶反应的最适温度为40℃,最适pH为8.0。在50℃以下稳定,60℃保温1h酶活仅保留10%;在pH7.0～8.5活性较稳定;金属离子Ca2+、Zn2+、Mg2+对酶有激活作用,金属离子Cu2+对酶有显著的抑制作用。EDTA和EGTA能抑制该酶,表明BCC酶为一种金属蛋白酶。酶的底物特异性表明该酶为骨胶原蛋白酶,且对Ⅰ型骨胶原蛋白水解能力极显著高于Ⅱ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白。将纯化的BCC酶应用于骨胶原蛋白的水解可以得到不同链长的多肽,其水解能力高于标准品胶原酶Ⅰ型。本研究为工业酶提供了新的菌株和新型胶原蛋白酶,为胶原蛋白酶的开发提供了重要的理论依据。     

肉类工业微生物诱变及应用研究进展

随着分子生物学、细胞生物学及分子遗传学等学科的迅猛发展,对微生物诱变分子机理的研究也日益完善。从微生物诱变分子机理出发,着重介绍了DNA损伤分子机理、基因突变分子机理和诱变剂的种类及遗传效应,同时,列举了诱变菌在肉类工业中的应用。     

不同因素对金针菇原生质体制备和再生的影响

比较了不同浓度裂解酶及组合、渗透压稳定剂、酶解时间等因素对金针菇原生质体得率的影响以及不同渗透压稳定剂、培养基、接种方法等因素对金针菇原生质体再生的影响。试验结果表明:固体培养10d的金针菇菌丝,以0.5mol/L KCl作渗透压稳定剂,加入1%纤维素酶和1%溶菌酶在25℃下酶解1.5h,分离原生质体效果最佳,原生质体产量可达27.8×105个/ml以上;以0.5mol/L KCl作渗透压稳定剂,在25℃条件下,金针菇原生质体采用直接涂布法接种在RCM培养基上培养,再生率最高为0.5%。     

红平红球菌絮凝基因提取及絮凝剂对血红素肽-铁絮凝特性

优化了红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)絮凝基因(NOC-1)的提取条件,探讨了该菌种发酵产生的微生物絮凝荆(MBF)对猪血红蛋白酶解的主要产物-血红素肽铁的絮凝特性.结果表明:采用溶菌酶与CTAB相结合方法,在水浴温度为65℃,时间为20 min条件下,提取絮凝基因,获得了清晰平整明亮的DNA条带,无明显弥散,DNA提取量多且断裂少,利用PCR扩增出了产絮凝基因(NOC-1)16S rRNA,测定并分析了产絮凝基因片段的1400 bp碱基组成.该MBF对猪血红蛋白酶解主要产物,即血红素肽铁絮凝特性与溶液的pH、温度、絮凝方式等有关,当猪血红蛋白酶解溶液pH值为6.0,絮凝温度45℃,结合超声波处理,MBF对血红素肽铁的絮凝率达到最佳,且絮凝沉降规律为拥挤沉淀,絮凝杌理为该菌种产生的MBF为粘多糖,分子上的活性基团(羧基、羟基、氨基等)借助离子键、氢键和范德华力,吸附血红素肽铁形成微粒,并通过架桥方式将2个或更多的微粒交联在一起从而导致絮凝.