帕金森病的临床治疗概况

帕金森病(Parkinson's disease, PD),在医学上称为"原发性震颤麻痹",又称"震颤麻痹",是一种中枢神经系统变性疾病,主要是因位于中脑部位"黑质"中的多巴胺(DA)能神经元病理性改变后,多巴胺的合成减少,对与其功能相互拮抗的乙酰胆碱的抑制功能降低,则乙酰胆碱的兴奋作用相对增强。两者失衡的结果便出现了"震颤麻痹"。本综述先从PD发病机制方向总结归纳目前临床常用的西医药物(包括左旋多巴、DA降解酶抑制剂、DA受体激动剂、抗胆碱能药物)、基因治疗靶点、手术治疗(脑深部电刺激术)及物理疗法,又从中医角度整体介绍了目前中医中药治疗以及针灸治疗等。因PD对患者的日常生活及身心健康造成了严重影响,我们希望通过本综述为PD综合治疗提供更广阔的临床思路及更好的方案。     

长链非编码RNA IFNG-AS1靶向miR-19b-1-5p调控oxLDL诱导的血管内皮细胞增殖、凋亡的机制研究

为了探讨长链非编码RNA干扰素活化基因的反义核糖核酸(lncRNA IFNG-AS1)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的人脐静脉血管内皮细胞EVC-304增殖、凋亡的影响和调控机制,该研究采用100μg/mL的oxLDL分别处理转染si-IFNG-AS1、miR-19b-1-5p mimics或共转染si-IFNG-AS1与anti-miR-19b-1-5p的EVC-304细胞,利用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中IFNG-AS1和miR-19b-1-5p表达,细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(P21)、多肿瘤抑制基因1(P16)、剪切的DNA修复酶(cleaved-PARP)、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)的蛋白表达情况;利用双荧光素酶报告基因实验验证IFNG-AS1和miR-19b-1-5p的靶向关系。结果显示,oxLDL促进了EVC-304细胞中IFNG-AS1的表达,而抑制了miR-19b-1-5p的表达(P<0.05);抑制IFNG-AS1或过表达miR-19b-1-5p提高了oxLDL处理的EVC-304细胞增殖活性及细胞中P21和P16蛋白表达,而降低了细胞凋亡率及cleaved-PARP和cleaved-caspase-3的蛋白表达(P<0.05);抑制miR-19b-1-5p逆转了抑制IFNG-AS1对oxLDL处理的EVC-304细胞增殖和凋亡的影响(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实IFNG-AS1靶向调控miR-19b-1-5p表达。这提示抑制IFNG-AS1表达可促进oxLDL处理的EVC-304细胞增殖,并抑制细胞凋亡,其作用机制与靶向上调miR-19b-1-5p表达有关,IFNG-AS1/miR-19b-1-5p轴可能为动脉粥样硬化的治疗提供新的靶点。     

缺氧环境下大鼠骨髓间充质干细胞凋亡相关蛋白和mRNA的表达

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）在缺氧环境下凋亡相关蛋白和mRNA的表达。方法将接种的P3细胞置于94％N2、1％O2和5％CO2缺氧箱中37℃孵育，分别于0．5h、1h、2h、4h、6h、8h和12h取出分别应用Annexin V／PI双染法进行流式细胞仪（FCM）分析MSCs凋亡率（Apoptotic Rate，AR），并同步用免疫细胞化学、western blotting和Rt-PCR等方法检测Bax／Bcl-2，Fas／FasL和Caspase-3蛋白和mRNA的表达。结果1．缺氧前，免疫细胞化学法未检测到Bcl-2、Bax、Fas、FasL和Caspase-3蛋白表达，缺氧0．5h后均可较强表达；2．各缺氧时间点Bcl-2、Bax、Fas、FasL、Caspase-3蛋白和mRNA表达较缺氧前均显著性增高（P均〈0．05）；随缺氧时间延伸，Bcl-2蛋白和mRNA表达不显著增加（P〉0．05），而Bax、Fas、FasL、Caspase-3蛋白和mRNA表达均显著增加（P均〈0．05），但缺氧6-12h时间点之间表达均没有统计学意义（P均〉0．05）；3．AR和Bcl-2／Bax蛋白（r1=0．417，P=0．043）及mRNA（r2=-0．435，P=0．040）呈显著负相关，而和Fas（r1=0．639，P=0．025；r2=0．711，P=0．018）、Fas-L（r1=0．581，P=0．022；r2=0．605，P=0．037）、Caspase-3（r1=0．704，P=O．014；r2=0．657，P=0．026）蛋白及mRNA均呈显著正相关。结论在缺氧促进MSCs凋亡的过程中，Bcl-2蛋白和mRNA可能起着保护作用，而Bax、Fas-L、Fas、Caspase-3蛋白和mRNA可能在MsCs凋亡的进程中起着促进作用。     

苦豆子碱和烟碱的联合杀蚜作用

【目的】以豆蚜Aphis craccivora Koch为试虫,对苦豆子碱和烟碱的联合杀蚜活性进行了测定,以期为开发新型植物源杀蚜剂奠定基础。【方法】单体化合物对豆蚜的毒力测定采用微量点滴法;制剂对豆蚜的毒力测定采用波特喷雾法;田间药效试验参照国家标准进行,其中施药方法采用常量喷雾法;制剂加工及化合物之间的联合杀蚜作用测定均采用常规方法。【结果】苦豆子碱和烟碱混用具有明显的杀蚜增效作用,在最佳质量配比（苦豆子碱∶烟碱=13∶1）下,共毒系数（common toxicity coefficient, CTC）值达185.82。结合对溶剂、乳化剂等助剂的筛选,研制出15.7% 苦豆子碱·烟碱环保型乳油,配方为：苦豆子碱（14.6%）、烟碱（1.1%）、环保溶剂（74.3%）、乳化剂（10%）。质量检测结果表明该制剂各项指标均达到商品农药的要求。大田药效试验表明,该制剂在质量浓度为0.354 g/L时,常量喷雾,药后7 d对月季长管蚜Macrosiphum rosirvorum的防效仍为85.91%。【结论】苦豆子碱和烟碱混用具有显著的杀蚜相互增效作用,具有进一步开发潜力。     

Akt基因转染对骨髓间充质干细胞缺氧时凋亡和增殖的影响

目的采用Akt基因转染鼠骨髓MSCs探讨Akt基因是否减轻MSCs缺氧时的凋亡和提高缺氧时的增殖能力,即耐缺氧能力。方法将转染和未转染Akt基因的MSCs置于94%N2、1%O2和5%CO2缺氧箱中37℃孵育不同时间（常氧、缺氧0.5h、1h、2h、4h和8h）后,Annexin V/PI双染法行流式细胞仪分析凋亡率（apoptoticrate,AR）和死亡率（deadrate,DR）、MTT法分析细胞增殖状态、Rt-PCR和Western blot等检测Akt和p-Akt表达以及放射同位素法检测MSCs对氚标-葡萄糖（^3H-G）的摄取等。结果1.Akt基因显著降低MSCs缺氧时AR和DR（P〈0.01）,而各缺氧时间点没有统计学意义（P〉0.05）;2.Akt基因显著增高MSCs常氧和缺氧（与未转染Akt基因MSCs同等条件下比较）时增殖能力（P〈0.01）,缺氧时增殖能力显著低于常氧时（P〈0.01）;3.Akt基因显著增高常氧时MSCsAkt mRNA（P〈0.01）和蛋白（P〈0.01）表达,而不增高p-Akt蛋白（P〉0.05）表达;Akt基因显著提高缺氧时p-Akt蛋白（P〈0.01）表达,而不提高常氧时p-Akt蛋白（P〉0.05）表达;4.Akt基因显著增高MSCs常氧和缺氧（与未转染Akt基因MSCs同等条件下比较）时^3H-G的摄取（P〈0.01）,缺氧时^3H-G的摄取显著性低于常氧培养时（P〈0.01）;^3H-G的摄取与细胞增殖显著正相关（r=0.79,P=0.015）而与细胞凋亡显著负相关（r=-1.47,P=0.023）。结论Akt基因转染可显著提高MSCs耐缺氧能力,此可能与缺氧时改善MSCs葡萄糖摄取等有关。