半夏蛋白的若干生物学性质

从半夏块茎鲜汁分离的半夏蛋白具有凝集细胞和促使细胞分裂的作用。在已测试的红细胞中凝集羊、狗、猫、兔、豚鼠、大鼠、小鼠和鸽的红细胞,但不凝集人、猴、猪和鸡、鸭、鹅、龟、蟾蜍、鳝的红细胞。半夏蛋白的血凝作用和已知的多种凝集素一样存在供血动物种属专一性。半抗原抑制试验结果,所测各种单糖、双糖、聚糖和糖蛋白中,只有甘露聚糖和含有寡聚甘露糖苷核心的甲状腺球蛋白有抑制作用,表明半夏蛋白只与甘露聚糖结合,且其分子上与糖互补的位置远远大于一个单糖分子的范围。是目前已知的唯一只与甘露糖而不与葡萄糖结合的一种具有凝集素作用的蛋白质。除红细胞外半夏蛋白亦凝集其它细胞,已测细胞中小鼠脾细胞、人肝癌细胞(QGY7703-3和7402)、艾氏腹水癌和腹水型肝癌细胞均被半夏蛋白凝集,但它不凝集大鼠附睾和猪大网膜脂肪细胞,虽然能和这两种细胞结合。提示半夏蛋白的细胞凝集作用不仅具有动物种属专一性并存在细胞类别专一性。半夏蛋白的促细胞分裂作用亦有动物种属专一性,它促使兔外周血淋巴细胞转化,但不促使人外周血淋巴细胞分裂。     

半夏蛋白的分离、结晶、生物活力和一些化学性质

从中草药半夏(Pinellia ternata Breit.)的鲜汁中分离出一种植物蛋白质组分,定名为半夏蛋白。它在稀磷酸缓冲液,pH 6.8,28～30℃结晶。它具有抑制早期妊娠的活力。给怀孕七天的小白鼠每只皮下注射250微克半夏蛋白,50%注射过的小白鼠引起流产。半夏蛋白也是一种植物凝集素,它与兔红血球有专一的血凝活力,浓度低至每毫升2微克仍有凝集作用。用凝胶过滤法测定,半夏蛋白分子量为44,000。十二烷基硫酸钠或胍盐存在下,半夏蛋白解聚成亚基。测定了半夏蛋白的氨基酸组成和N-末端氨基酸残基。半夏蛋白不含己糖。有迹象表明半夏蛋白可能是其分子大小、结构与性质极为相近的一组蛋白。     

结晶半夏蛋白在6M 盐酸胍中的可逆变性

前文——“半夏蛋白的分离、结晶、生物活力和一些化学性质”中已报道,半夏蛋白经变性剂处理后解聚成为亚基。结晶半夏蛋白经6M 盐酸胍变性后,用分步透析法,即用缓冲液等体积递减稀释变性剂,最终“恢复半夏蛋白”于生理盐水中平衡,去除变性剂,可以重新天然化。去除胍的“恢复半夏蛋白”,分子大小、亚基结构和肽链构型不变,完全恢复其在小白鼠中抑制早期妊娠的活力,并能在天然半夏蛋白相同的结晶条件下再结晶。     

半夏凝集素的糖类结合专一性

半夏是一种多用途的中草药。从其块茎鲜汁中分得的结晶蛋白——半夏蛋白——能凝集兔红细胞,很可能是对某种糖专一结合的凝集素。为此我们采用了琼脂糖双扩散以及亲和层析等技术对半夏中血凝活性成分和各种糖类结合的专一性进行了探讨。     

半夏蛋白的分离、结晶、生物活力和一些化学性质

从中草药半夏(Pinellia ternata Breit.)的鲜汁中分离出一种植物蛋白质组分,定名为半夏蛋白。它在稀磷酸缓冲液,pH6.8,28～30℃结晶。它具有抑制早期妊娠的活力。给怀孕七天的小白鼠每只皮下注射250微克半夏蛋白,50%注射过的小白鼠引起流产。半夏蛋白也是一种植物凝集素,它与兔红血球有专一的血凝活力,浓度低至每毫升2微克仍有凝集作用。用凝胶过滤法测定,半夏蛋白分子量为44,000。十二烷基硫酸钠或胍盐存在下,半夏蛋白解聚成亚基。测定了半夏蛋白的氨基酸组成和N-末端氨基酸残基。半夏蛋白不含已糖。有迹象表明半夏蛋白可能是其分子大小、结构与性质极为相近的一组蛋白。     

半夏蛋白的抗兔胚泡着床作用

半夏蛋白有很强的抗兔胚泡着床作用,子宫内注射500μg,抗着床率达100%。经半夏蛋白作用后的子宫内膜能使被移植的正常胚泡不着床。在子宫内经半夏蛋白孵育的胚泡移植到同步的假孕子宫,着床率随孵育时间延长而降低。用辣根过氧化物酶标记半夏蛋白的定位实验表明该蛋白结合在子宫内膜腺管的上皮细胞膜上。已知半夏蛋白有类似凝集素的活性,能与甘露聚糖结合,它的抗着床作用可能是由于该蛋白结合了母体和(或)子体细胞膜上的某些糖结构,改变了细胞膜的生物学行为所致。     

脊髓和脊神经节原代分离培养中GABA能神经元的形态观察

选用12—14天胚胎小鼠(C 57 BL/6J),取脊髓及脊神经节原代培养。观察神经元的发育并用GABA抗血清、PAP方法显示GABA能神经元。脊髓神经元呈各种形态大小,随着培养的进行它们的突起和胞体不断生长;脊神经节细胞有不同大小,其体积在培养中保持恒定。随着神经元的逐渐成熟,它们的核质比不断增大。GABA免疫细胞化学阳性脊髓神经元大小不等,可分为两类:1.突起和胞体阳性,核不着色而核仁着色;2.只在突起和细胞膜上有阳性反应而胞体及核为阴性(可能为GABA摄取的结果)。有不同大小的脊神经节细胞呈阳性反应,其胞体及核仁着色而核呈阴性反应。证实了培养条件下处于胚胎发育阶段的阳性脊神经节细胞的存在。     

结晶半夏蛋白在6M盐酸胍中的可逆变性

前文——“半夏蛋白的分离、结晶、生物活力和一些化学性质”中已报道,半夏蛋白经变性剂处理后解聚成为亚基。结晶半夏蛋白经6M盐酸胍变性后,用分步透析法,即用缓冲液等体积递减稀释变性剂,最终“恢复半夏蛋白”于生理盐水中平衡,去除变性剂,可以重新天然化。去除胍的“恢复半夏蛋白”,分子大小、亚基结构和肽链构型不变,完全恢复其在小白鼠中抑制早期妊娠的活力,并能在天然半夏蛋白相同的结晶条件下再结晶。     

半夏凝集素的糖类结合专一性

半夏是一种多用途的中草药。从其块茎鲜汁中分得的结晶蛋白——半夏蛋白——能凝集兔红细胞叫,很可能是对某种糖专一结合的凝集素。为此我们采用了琼脂糖双扩散以及亲和层析等技术对半夏中血凝活性成分和各种糖类结合的专一性进行了探讨。用0.025M巴比妥-HCl缓冲液,pH8.6,或pH8.8的Tris-HCl缓冲液配成的