基于酵母水平的高通量药物筛选

随着后基因组时代的到来,越来越多的药物靶标蛋白将会被发现,基于靶标蛋白设计出的化合物也将大量涌现,高通量药物筛选日趋重要。酵母基因组的易操作性及其简单稳定的培养条件,使得该真核微生物成为一种理想的药物筛选工程细胞。本文讨论了选择酵母系统进行细胞水平筛选的优缺点,并从基于靶点和表型两种筛选模式对酵母水平的高通量药物筛选做一总结。     

急性Stanford A型主动脉夹层患者术后发生急性肾损伤的影响因素及术前尿NGAL联合血清β2-MG、Mb的预测价值

摘要 目的：探讨急性Stanford A型主动脉夹层（TAAD）患者术后发生急性肾损伤（AKI）的影响因素,分析术前尿中性粒细胞明胶酶相关脂质转运蛋白（NGAL）联合血清β2-微球蛋白（β2-MG）、肌红蛋白（Mb）对术后AKI 的预测价值。方法：选择2019年1月至2022年1月我院收治的100例TAAD患者,根据术后是否发生AKI将患者分为AKI组（38例）和非AKI组（62例）,检测并比较两组术前尿NGAL、血清β2-MG、Mb水平。分析TAAD患者术后发生AKI的影响因素,以及术前尿NGAL联合血清β2-MG、Mb对TAAD患者术后发生AKI的预测价值。结果：AKI组术前尿NGAL、血清β2-MG、Mb水平均高于非AKI组（P＜0.05）。AKI组体质量指数（BMI）、肾动脉受累比例、术中尿量、术中输血量、术前血肌酐（Scr）水平均高于非AKI组,体外循环时间、深低温停循环时间长于非AKI组,年龄大于非AKI组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：肾动脉受累、体外循环时间过长、术前Scr、尿NGAL、血清β2-MG、Mb水平较高是TAAD患者术后发生AKI的危险因素（P＜0.05）。术前尿NGAL联合血清β2-MG、Mb预测TAAD患者术后发生AKI的曲线下面积为0.847,明显高于三指标单独检测的0.689、0.678、0.677（P＜0.05）。结论：术前尿NGAL、血清β2-MG、Mb水平较高、肾动脉受累、体外循环时间过长是TAAD患者术后发生AKI的危险因素,联合检测术前尿NGAL、血清β2-MG、Mb水平对术后AKI的发生具有一定预测价值。     

聚苯乙烯微塑料对黑藻生长及生理生化特征的影响

为探讨淡水环境中微塑料的污染对沉水植物产生的生理生化影响,选择典型沉水植物黑藻为供试材料,以粒径3 μm的聚苯乙烯微塑料颗粒(PS-MPs)为外源胁迫污染物,通过添加不同浓度的PS-MPs(5、10、30、50、100 mg·L^-1)设置不同暴露组及对照组,测定沉水植物的株高、生物量、叶绿素含量、抗氧化酶活性、光合荧光参数及荧光成像的变化特征。结果表明: 50～100 mg·L^-1PS-MPs下黑藻的株高显著下降;较低浓度下(如5 mg·L^-1)黑藻的鲜重显著升高,但随着PS-MPs暴露浓度进一步增加,黑藻鲜重降低,干重无显著变化。黑藻叶绿素总量、叶绿素a和叶绿素a/b均随PS-MPs浓度的增加呈显著下降趋势,叶绿素b无明显变化。PS-MPs处理下超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性均随胁迫浓度的增加呈先上升后下降的趋势,叶绿素荧光参数(F_o、F_m、F_v/F_m)均呈下降趋势,而稳态下的PSⅡ反应中心关闭程度(1-Q_p-Lss)总体呈上升趋势,这可能与PS-MPs抑制黑藻PSⅡ反应中心有关。黑藻的荧光成像强度随PS-MPs浓度的增加而降低,在PS-MPs浓度为10 mg·L^-1及以下时,黑藻叶片表现出正常的光合活性;当PS-MPs为30 mg·L^-1及以上时,叶片边缘的光合强度小于茎秆及其周边,叶片呈现发黄、残叶等现象。推测黑藻基本能适应低浓度PS-MPs(0～30 mg·L^-1)的污染水域,而在PS-MPs高于30 mg·L^-1的污染水域中其生长和光合作用将受到抑制。     

黄柏等中草药对MRSA的抑菌作用及其对质粒的消除作用

研究黄柏等10种中草药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌作用及黄柏和甘草对MRSA的质粒消除作用。采用牛津杯法测定中草药对耐药性金黄色葡萄球菌的抑菌作用;逐个检出法测定黄柏和甘草对临床分离的MRSA多重耐药菌株的质粒消除作用。结果显示,在10种中草药中,黄柏和甘草对MRSA的抑制作用最好,其对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)均是1 mg/mL,且抑菌效果在一定浓度范围内随药液浓度的增大而增强。黄柏和甘草对MRSA的质粒有消除作用,药物作用48 h后,黄柏和甘草对MRSA的质粒消除率分别为17%和12.2%。结果表明,黄柏和甘草对MRSA有显著抑制作用,且对MRSA的质粒有消除作用。     

樱桃番茄繁殖技术初探（简报）

4～ 7℃低温处理不影响樱桃番茄种子的萌发力 ;NAA 10mg·L-1处理腋芽或茎切段 5min ,并转入自来水中浸泡 ,能较好诱导不定根的产生 ,生理年龄和实际年龄大的侧芽或茎切段有利于不定根产生 ;正交分析表明 :MS 6 BA 3 .0mg·L-1 NAA 0 .1mg·L-1有利于外植体产生不定芽 ,ZT、KT在芽分化中的作用不如 6 BA明显。     

ZnS量子点的生物合成及对阿萨尔基亚芽胞杆菌的标记

通过微生物合成金属量子点是目前研究的热点。本研究通过白色念珠菌合成ZnS量子点,对合成的量子点用高分辨透射电镜(HR-TEM)和X射线衍射(XRD)进行表征,用生物合成的ZnS量子点标记生防菌阿萨尔基亚芽胞杆菌,为建立生防菌阿萨尔基亚芽胞杆菌的荧光探针标记提供科学依据。实验结果表明,ZnSO4浓度为20 mmol/L时白色念珠细胞内合成ZnS量子点,通过反复冻融破细胞壁提出胞内ZnS量子点,紫外-可见光谱(UV)检测ZnS量子点在348 nm处显示有吸收带,HR-TEM测其粒径约7. 06 nm,荧光分光光谱分析量子点激发波在280 nm和363 nm,XRD显示ZnS量子点特征峰。ZnS量子点中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)偶联剂的芽胞杆菌样本的标记效率明显高于不加偶联剂的样本。白色念珠菌合成的ZnS量子点可以用于微生物标记。     

荞麦属种间13S球蛋白基因序列比较研究

荞麦13S球蛋白是荞麦种子中的一类主要贮藏蛋白。本研究选用荞麦属植物甜荞栽培种及其野生类型、苦荞栽培种及其野生类型、毛野荞、左贡野荞、细柄野荞和硬枝万年荞6个种共44份材料,进行PCR特异性扩增、测序得到荞麦13S球蛋白基因的保守片段序列。对序列进行差异分析,结果发现44份供试材料13S球蛋白基因片段的285个排列位点中不变位点为24个,多态性位点S为261个(含简约信息位点数198个和单型可变位点63个),序列总突变位点Eta为503个。野生甜荞种内13S球蛋白基因序列差异明显高于栽培甜荞,但野生苦荞种内13S球蛋白基因序列差异仅稍高于栽培苦荞。推测其一方面可能与繁殖方式有关,另一方面可能与荞麦驯化过程中通常只有少数野生型群体被驯化有关。系统聚类分析发现栽培甜荞与野甜荞亲缘关系近,与左贡野荞亲缘关系次之;栽培苦荞与野苦荞亲缘关系近,与毛野荞亲缘关系次之;细柄野荞和硬枝万年荞的13S蛋白基因片段序列差异较小,说明其亲缘关系较近。上述结果为荞麦属种间遗传多样性与进化关系研究提供了理论依据。     

四种植物蛋白对中华绒螯蟹幼蟹生长性能、氨基酸沉积率和抗氧化酶活性的影响

为了筛选适宜于养殖中华绒螯蟹幼蟹的饲料植物蛋白源,探究不同植物蛋白源饲料对幼蟹生长性能、氨基酸沉积率和抗氧化性能等方面的影响,以50%的鱼粉配制基础饲料（记为FM）,分别采用30.5%发酵豆粕、32.5%豆粕、28%棉粕和39%菜粕替代基础饲料中鱼粉总量的50%,配制成4种等氮等能的饲料（分别记为FSBM、SBM、CSM和RSM）,投喂初始体重为（0.249±0.003）g的中华绒螯蟹幼蟹8周。结果表明:（1）与FM组相比,FSBM、SBM和CSM组的增重率、特定生长率、饲料系数、蛋白质效率和蛋白质沉积率均没有显著性差异;RSM组的增重率与FM组相比差异不显著（P>0.05）,但显著低于SBM组（P < 0.05）,而其饲料系数则显著高于FM、FSBM及SBM组（P < 0.05）,蛋白质效率显著低于其他各组（P < 0.05）,蛋白质沉积率显著低于SBM和CSM组（P < 0.05）。（2）不同植物蛋白组的总必需氨基酸沉积率和FM组相比差异不显著（P>0.05）,而RSM组总必需氨基酸沉积率显著低于FSBM和CSM组（P < 0.05）。（3）与FM组相比,不同植物蛋白组蟹的血清和肝胰腺中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性和肝胰腺丙二醛（MDA）含量并没有显著的影响,而RSM组血清丙二醛（MDA）含量显著的高于其他各组（P < 0.05）。结果表明,在幼蟹饲料中,豆粕、发酵豆粕和棉粕替代基础配方中鱼粉的50%后并未对幼蟹的生长性能、氨基酸沉积率及抗氧化能力造成负面的影响,发酵豆粕、豆粕和棉粕可以作为替代鱼粉的适宜蛋白源,且添加水平约在30%左右。菜粕替代后降低了饲料的利用和氨基酸沉积效率,这可能是由于菜粕的蛋白质消化率低、含有相应的抗营养因子和添加水平过高所致,建议使用前应适当进行脱毒处理,并与或和其他植物蛋白配伍使用。