马立克氏病病毒超强毒感染鸡羽髓蛋白质组分析

【目的】羽毛是细胞游离马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)释放的部位,为了解感染MDV后鸡羽中宿主基因表达的变化及对病毒感染的应答,进行了MDV感染鸡的羽髓蛋白质组学分析。【方法】1日龄无特定病原体(specific pathogen free,SPF)鸡人工感染MDV超强毒RB1B株(1000PFU),感染后21d采集鸡羽毛,提取羽髓蛋白,以17cm,pH5-8的IPG胶条进行二维电泳,以未感染病毒的SPF鸡羽髓蛋白为对照,使用PDQuest软件对二维电泳图谱进行差异蛋白分析,并选取部分差异斑点进行质谱鉴定。【结果】PDQuest软件分析发现攻毒组和对照组表达差异大于两倍的蛋白点有41个,其中攻毒组表达上调的蛋白点25个,下调的蛋白点7个,新出现的蛋白点有9个。质谱分析共成功鉴定了21个斑点,对应于20个蛋白。如载脂蛋白AI(apolipoprotein AI)、14-3-3 sigma(两个斑点均为该蛋白)、癌蛋白18(stathmin)等。【结论】功能预测表明这些蛋白涉及到宿主的抗病毒应答、物质代谢、细胞骨架成分、细胞增殖相关等方面。     

cGAS-STING信号通路在畜禽疾病中的研究进展

cGAS-STING信号通路是一种细胞内DNA感受器,可以识别自身病变或外部进入细胞质中的双链DNA。其不仅与肿瘤、病毒和细菌感染及自身免疫系统疾病密切相关,而且在非特异性免疫系统中发挥重要作用。截至目前,国内外对于cGAS-STING信号通路的研究主要集中在哺乳动物肿瘤相关性疾病及与先天性免疫系统相关的疾病中,而通路对畜禽疾病调控的影响机制非常重要。本文以cGAS-STING信号通路在宿主受到病原感染中发挥的作用为切入点,对其在不同畜禽病原感染中的调控作用进行综合论述,以期为畜禽疾病的防控提供理论依据和参考。     

老年冠心病护理健康教育对策及应用效果分析

目的：分析老年冠心病患者的护理健康教育需求,并给予有效护理干预方法,分析其临床效应。方法：选取本院治疗的80例老年冠心病患者为研究对象,随机分为对照组和观察组各40例,入院后给予健康教育知识评估,对照组采用常规护理模式,观察组针对健康知识评估给予护理干预。随访3个月,比较两组患者护理后健康知识的掌握及实际临床效果。结果：①住院期间,观察组对冠心病知识的掌握情况,服药依从性均明显优于对照组（P〈0．05）。②出院3个月后,观察组体重指数、甘油三酯、血压改善情况明显优于对照组（P〈0．05）。结论：针对性护理教育提高了患者治疗依从性,各项临床指标得到了改善,是治疗冠心病的有效补充。     

通过反向遗传操作技术构建传染性支气管炎病毒nsp15核酸内切酶活性缺陷型重组毒株

传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)属于γ属冠状病毒,其核酸内切酶nsp15(Non-structural protein 15)的功能尚未得到解析.为探讨nsp15在IBV感染和复制过程中的作用,本研究对nsp15的核酸内切酶活性中心H238进行突变,通过体外连接技术构建重组病毒rIBV-nsp15-H238A,并对病毒滴度、感染复制能力和生长曲线进行鉴定.方法 如下:将IBV Beaudette-R毒株的基因组分成5个片段克隆到质粒载体,并在每个片段加上BsaI或BsmBI限制性酶切位点.通过质粒载体进行扩增后,通过酶切获得cDNA片段,在体外连接成全长基因组cDNA,转录出全长基因组RNA,跟N的转录本一起电击转染到Vero细胞,拯救出重组病毒rIBV和rIBV-nsp15-H238A.利用空斑试验检测比较rIBV和rIBV-nsp15-H238A的病毒滴度和空斑大小,鉴定nsp15核酸内切酶活性对IBV感染性的影响.结果 显示,rIBV-nsp15-H238A的病毒滴度为2.7×106PFU/mL,比rIBV的病毒滴度(9.4×106PFU/mL)低3倍还多,且rIBV-nsp15-H238A空斑孔径远小于rIBV,说明rIBV-nsp15-H238A复制和扩散能力远低于rIBV.利用TCID50检测病毒的生长曲线,结果表明在感染后0～24h,rIBV-nsp15-H238A的生长曲线均低于rIBV.由此可见,IBV nsp15H238核酸内切酶活性位点对IBV的感染复制起着重要作用.本研究通过反向遗传操作构建nsp15核酸内切酶活性缺陷型重组病毒,为研究nsp15的功能提供了一个有力的工具.     

鹅星状病毒江苏分离株JSSQ遗传特征分析

【背景】自2016年以来,我国山东、安徽、江苏、广东等养鹅地区暴发了一种以痛风为主要特征的急性传染病。【目的】研究引起江苏某鹅场雏鹅痛风的鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)的基因组特征。【方法】从疑似患有痛风的雏鹅肝脏样品中分离到一株GAstV,命名为JSSQ,并对JSSQ全基因组序列及遗传特征进行分析。【结果】GAstV JSSQ株可在LMH细胞上稳定传代,无明显细胞病变;该毒株基因组全长7 175 nt,与其他已报道的鹅星状病毒参考株相似性为57.3%-99.1%。系统进化分析显示,JSSQ与参考毒株AHAU3亲缘关系最近,处于同一分支。重组分析显示,在GAstVJSSQ基因组中的第807和2818位点发生了2次重组,起源于GD AHAU2(major parent)和AHAU4(minor parent)。抗原表位分析显示,在ORF2区出现多处氨基酸突变,存在P64S、A224T、A228S、Q229P等独特突变,可引起抗原表位的变化。【结论】不同地区GAstV可能存在不同生物学特性,在防控中应予以注意。     

鸡马立克病毒的研究进展

马立克病毒(Marek’s disease virus,MDV)是一类可感染鸡诱发急性或亚急性淋巴细胞肉瘤的疱疹病毒。本文在对MDV的经典病毒学及分子生物学研究的早期成果进行概述的基础上,对近十多年来感染性克隆技术用于探索MDV主要蛋白基因的功能、以病毒编码的全部蛋白质为对象的蛋白组学、病毒编码的有调控作用的RNA及基因工程疫苗等方面的研究进展进行综述,并展望MDV进一步的研究方向和内容。     

供应室人员手卫生的干预措施及效果

目的:探讨提高供应室人员手卫生的干预措施,并对干预后的效果进行评价.方法:采用自制调查表的方法了解手卫生依从性差的原因,进而制定相应的干预措施.采用隐蔽式现场观察法对比手卫生干预前后手卫生依从性.结果:通过调查掌握了手卫生依从性差的原因,并制定了干预措施.干预前后医务人员手卫生执行水平分别为45.63％和70.26％,其中护士手卫生执行水平分别为49.75％和74.47％,护工手卫生执行水平分别为39.56％和63.97％,差异均有统计学意义.证明干预措施效果显著.结论:本调查显示我科室手卫生干预前医务人员手卫生依从性只有45.63％,其中护士手卫生依从性为49.75％,明显高于护工手卫生依从性(39.56％).且护士掌握正确洗手方法明显高于护工,但二者对洗手指征的掌握均很差.经过调查发现手卫生差的原因主要包括认识不足,知识缺乏;工作繁忙,依从性低;设备不足,操作麻烦;频繁洗手,损伤皮肤;从众心理,缺乏监管这五大方面.我院通过提高认识,增强培训;按劳分配,合理安排;更新用物,改善方法;完善制度,加强监控等干预措施,可以显著提高了全体工作人员手卫生的依从性.     

我国2002−2016年间鸡传染性支气管炎病毒基因组序列重组分析

【目的】传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus，IBV)主要引起鸡群呼吸道与肾脏疾病，是影响养禽业重要的病毒性病原之一。了解我国IBV的流行及基因重组情况。【方法】收集GenBank中我国2002?2016年间分离的92株IBV S1基因及55株IBV基因组序列，并对这些序列进行比对分析。【结果】IBV S1基因序列分析结果表明，2002?2016年间我国流行的92株IBV可以分为13个基因型，包括QX、4/91、Mass、tl/CH/LDT3/03、CK/CH/LSC/99I、TW-I、TW-II、TC07-2、Ck/CH/LDL/97I、N1/62-associated、Arkansas、New-I及一个新鉴定的基因分支New-II。值得注意的是，属于美国相关基因分支的ck/CH/LSD/110712已在我国出现。RDP4方法进行重组分析显示，新出现的基因分支New-II病毒S1基因来源于tl/CH/LDT3/03型与QX型毒株重组，我国2002?2016年间流行的55株IBV中有52株IBV基因组存在重组事件，其中25个IBV分离株基因组中发现有疫苗型(Mass，tl/CH/LDT3/03及4/91型等)病毒基因组片段的重组，这一结果在SimPlot分析中进一步得到确认。【结论】根据生物信息学分析结果，证明流行于我国的IBV基因型众多，疫苗毒株基因频繁参与了IBV基因重组，导致IBV新的基因型或变异株出现，提示在防控IB时要注意合理使用IBV疫苗。